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应用半套式RT-PCR技术诊断番鸭呼肠孤病毒病 总被引:1,自引:0,他引:1
参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300 bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和番鸭胚成纤维细胞(MDEF)培养物进行扩增.结果仅能从MDRV中扩增出300 bp特异片段,而不能从ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF细胞培养物中扩增出特异片段;该方法检测灵敏度为1 fg核酸,重复性好.对人工感染和临床疑似病例用病毒分离和半套式RT-PCR进行检测,2种方法符合率为100%.因此,该半套式RT-PCR可以用于番鸭呼肠孤病毒病的临床快速检测. 相似文献
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铬的生物学意义及开发应用前景 总被引:2,自引:0,他引:2
铬(Chromium,Cr)做为动物机体必须微量矿物营养元素,最早发现其生物活性的是SobWartz和Mertz(1959)。之后,工作者对铬在人体作用方面研究颇多。近年,对动物体影响的研究逐渐多起来。为了推动钻(3)的开发应用过程,特做简要综述。1铬的生物学意义早在本世纪60~70年代即有大量研究证实,Cr(3)是人体必需的微量矿物营养元素,给小鼠口粮添加Cr(3),对维持小鼠正常生长,延长寿命有明显补益。进一步的研究证明,Cr(3)是胰岛素的辅助因子GTF的主要组分,能激活胰岛素和细胞膜间的二硫键,提高胰岛素与特异受体结合力,促进… 相似文献
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【目的】制备抗鸭副粘病毒(DPMV)的单克隆抗体,为鸭副粘病毒病免疫学诊断方法的建立奠定基础。【方法】采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心法提纯DPMV,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞株SP2/0融合,采用间接ELISA、间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制(HI)试验等方法筛选阳性杂交瘤细胞株,并测定其生物学特性。【结果】筛选到7株能稳定分泌抗DPMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为J28、F4、B3、E39、E41、A12和A30。这7株单克隆抗体都具有ELISA和1FA特性,其中J28和F4还具有HI和中和特性。免疫球蛋白亚类测定结果显示,J28和F4均为IgG1,其他5株均为IgM。相加ELISA试验结果显示,单抗B3,J28与F4,A30与E39/E41/A12分别识别3个不同的抗原位点。特异性测定结果显示,7株单克隆抗体与雏番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、番鸭呼肠孤病毒(MDRV)及正常细胞均无交叉反应。【结论】筛选出了7株具有ELISA、1FA等特性且分泌抗DPMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并明确了各株单克隆抗体的特性,为鸭副粘病毒病的免疫治疗和临床诊断奠定了基础。 相似文献
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我们应用番鸭细小病毒单克隆抗体建立检测MPV抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,并和胶乳凝聚试验(LPA)、免疫荧光抗体试验(FA)的检测结果相比较:1材料方法1.1病毒和单克隆抗体雏番鸭细小病毒强毒株(MPV-F),雏番鸭细小病毒单克隆抗体(MPV-McAb15),由本所单克隆研究室制备提供犤1、2犦。1.2样品处理2日龄雏番鸭20羽,每羽腿部肌肉注射0.2mlMPV-F番鸭胚悬液。待雏番鸭发病后扑杀,取肝脏和脾脏组织。一部分组织用蒸馏水制成1∶1匀浆液后,加等体积氯仿振荡3min,5000rpm/min离心5min,… 相似文献
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为明确番鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗在番鸭体内中和抗体消长规律,采用固定病毒稀释血清法,测定了经弱毒疫苗免疫后的雏番鸭不同时间其血清中和抗体效价。结果显示:疫苗注射1日龄雏番鸭,免疫后28 d部分鸭血清中出现抗体,35 d全部鸭血清中出现抗体;6个月抗体效价达高峰,有效免疫期在18个月以上。表明番鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗诱导的中和抗体产生期较晚,但持续期长。 相似文献
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60Co-γ射线辐射对早熟禾种子发芽及种子内酶活性的影响 总被引:11,自引:0,他引:11
利用^60Co-γ射线辐射处理草地早熟禾的三个品种解放者、新哥来德和奖品的干种子,观测不同辐射剂量(OGy、50Gy、100Gy、150Gy、200Gy)的^60Co-γ射线对种子发芽的影响及种子萌发过程中的SOD和POD酶的活性。结果表明。低剂量(50Gy)的辐射有促进作用,高剂量的辐射对草地早熟禾种子的萌发有抑制作用,且随着辐射剂量的加大,抑制作用增强。在这五种剂量的辐射下,两种酶的活性都是先升高后降低。 相似文献
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小鼠脾淋巴细胞转化试验最佳条件的测定 总被引:13,自引:0,他引:13
淋巴细胞转化试验是检测T细胞免疫功能的方法,本文讨论小鼠脾淋巴细胞转化试验的最适条件。1材料与方法1.1试验小鼠8~10周龄健康昆明鼠。1.2试剂和仪器RPMI1640培养基,GIBCOBRL公司产品;ConA,华美产品;Brdu-ELISA试剂盒,Roche公司产品;淋巴细胞分离液,上海试剂二厂产品;318MC型酶标仪,上海三科仪器有限公司;GS-15R型离心机,BECKMAN产品;96孔细胞板,FALCON公司产品。1.3小鼠脾淋巴细胞悬液的制备将小鼠拉颈处死,无菌取出脾脏置于含10%小牛血清的RPMI1640营养液中,用无菌弯头镊子轻轻挤压脾脏,吹打分散成脾细胞悬液,将悬液… 相似文献