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用PCR法扩增里氏木霉cbhⅡ基因,并将其克隆到P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP9K-cbhⅡ。通过电转法将cbhⅡ基因整合到P.pastoris的基因组中,然后筛选高G418抗性的克隆作为工程菌菌种。在生物反应器中生产CBHⅡ,将20L发酵液装入50L的发酵罐中,在发酵过程中连续64h补加甘油-PTM4,放罐时生物量为A600=170,CBHⅡ的表达量为75mg/L。其表达产物具有酶解羧甲基纤维素的活性。 相似文献
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文章从山地丘陵地区农业机械推广所存在的地理环境、机械质量和后期维护问题等制约因素出发,对需要采用的完善推广体系、建立示范基地和加大政策扶持等措施做出了研究,并进行了相应的说明和阐释。 相似文献
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