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冷休克结构域蛋白(CSPs)是含有不同数量冷休克结构域(cold shock domain,CSD)的低温响应蛋白,在低温胁迫中发挥重要作用。以沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)为材料,克隆得到了冷休克结构域蛋白基因AmCSDP。生物信息学分析显示AmCSDP(Gen Bank登录号:KX756575)全长540bp,编码180个氨基酸,二级结构由8.9%的α–螺旋、47.8%的β–折叠和43.3%的无规则卷曲组成,其N端含有冷休克结构域。进化分析表明沙冬青与花生同源性最高。构建了AmCSDP真核表达载体Pcambia2300-35S-AmCSDP-OCS,经农杆菌介导转入本氏烟中。对转基因T1代和野生型烟草进行4℃低温胁迫处理,结果证实转基因本氏烟比野生型的耐冷能力强。 相似文献
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沙冬青GATA型锌指蛋白基因序列及表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
根据沙冬青低温干旱诱导cDNA文库表达序列标签中锌指蛋白基因序列设计特异引物,采用PCR技术扩增锌指蛋白基因AmZFPG的cDNA全长.序列分析表明,cDNA全长669 bp,推测编码223个氨基酸残基、分子量约25 kD的蛋白质.氨基酸保守性分析及同类锌指结构比对表明AmZFPG属于GATA结合蛋白家族,且具有高度的... 相似文献
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A20/AN1锌指蛋白普遍存在于真核生物中,在胁迫响应引起的信号传导过程中发挥着重要作用。本文利用生物信息学和RT-PCR方法从低温干旱胁迫的沙冬青叶片组织中分离锌指蛋白基因AmSTZF,该基因编码一条含172个氨基酸残基的多肽,含A20和AN1两个锌指蛋白保守结构域,属A20/AN1锌指蛋白。生物信息学分析显示该蛋白定位于细胞质中,具有磷酸化位点,参与细胞转录调控。RT PCR分析表明:低温和干旱胁迫处理的沙冬青叶片中,AmSTZF的表达增强,初步推测该基因与沙冬青低温、干旱胁迫响应相关。 相似文献
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转沙冬青锌指蛋白基因AmZFPG 烟草非生物胁迫抗性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
分析了沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)锌指蛋白基因AmZFPG 在非生物胁迫下的表达
特性,结果显示AmZFPG 受低温、干旱、高盐胁迫诱导表达,表明该蛋白参与多种胁迫相关的信号转导
和应答反应。为进一步探索AmZFPG 的功能,构建了真核表达载体AmZFPG-pCAMBIA2300,将该基因
转入烟草(Nicotiana tabacum L.),对转基因烟草T1 代进行非生物胁迫分析,结果显示,转基因烟草的耐
寒性、耐旱性、耐盐性均获得了提高。 相似文献
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颐和园古西府海棠的组织培养与快速繁殖 总被引:1,自引:0,他引:1
以北京颐和园古西府海棠嫩枝为外植体进行组织培养研究,结果表明:取西府海棠当年新生嫩茎务切段为外植体进行组织培养,其中最适不定芽启动培养基为1/2MS+IBA0.3mg/L+NAA0.05mg/L;将无菌苗接种到分化培养基MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L上,组培苗生长健壮且分化率高,增殖系数可达4.16;不定根最适诱导培养基为1/2MS+IBA0.6mg/L和1/2MS+NAA1.0mg/L,生根率分别达100%、98%。炼苗基质为蛭石:珍珠岩体积比:1:1。试管苗移栽成活率达92%。 相似文献
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以北京颐和园古桑树为外植体进行组织培养,取桑树当年新生嫩茎切段为外植体进行,其中不定芽启动培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+PVP 0.2 g/L;将无菌苗接到最适分化培养基MS+ 6-BA 0.8 mg/L +NAA 0.1 mg/L +PVP 0.2 g/L上,组培苗分化率高;不定根最适诱导培养基为:1/2MS+NAA 0.5 mg/L +PVP 0.2 g/L,生根率达100%。组培苗移栽成活率达95%。 相似文献
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一种改进的固相扣除杂交法直接克隆全长差异表达基因 总被引:1,自引:0,他引:1
该文集多种分离差异表达基因方法的优点于一体,自行优化了一种基于固相扣除杂交和聚合酶链式反应(PCR)技术直接克隆全长差异表达基因的策略.该策略中的所有操作步骤,包括poly (A)+mRNA的分离,cDNA的合成和扣除杂交都是在磁珠上进行的,操作简单易行.扣除杂交是用结合在磁珠上的以oligo(dT)为引物合成的对照材料(Driver)的cDNA第一链,直接扣除加有接头的处理材料(Tester)cDNA第二链中的共有序列.多次反复使用Driver一链与Tester二链进行杂交,能有效去除Tester二链中的共有序列.磁珠的分离能最小限度地减少每次杂交造成的损失.最后一轮扣除后的Tester二链中,含有大量差异表达序列,用Tester二链特有的接头引物进行扩增,能进一步提高扣除效率.该文选用此扣除方法,成功分离到了低温驯化沙冬青幼苗和对照苗2个群体的18个差异表达克隆,其中有4个克隆是全长cDNA序列.经序列分析发现,这些基因都与低温相关,进一步说明,该方法可用于克隆未知差异表达基因. 相似文献
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高山植物水母雪莲的组织培养 总被引:5,自引:0,他引:5
以自青海海拔4,150m高山采集的水母雪莲叶片为外植体,在含有6-BA(2mg/l)和NAA(0.2mg/l)的MS固体培养基上,14d后可诱导出粉红色愈伤组织.当愈伤组织被转移到含6-BA(0.5mg/l)和NAA(0.05mg/l)的MS培养基上,7d后在愈伤组织上即可诱导出幼芽,伸长后成幼苗.将生长21d的幼苗移入含NAA(0.2mg/l)的MS固体培养基上,7d后即可从茎基部生出根. 相似文献