牛皮蝇蛆病间接ELISA诊断方法的建立

以纹皮蝇Ⅰ期幼虫粗提蛋白为包被抗原,通过方阵试验确定了血清最佳稀释倍数为80倍,抗原最佳包被浓度为26.64μg/mL,并对其特异性、敏感性和重复性进行了试验,建立了牛皮蝇蛆病间接ELSIA诊断方法。再以建立的ELISA诊断方法对采自内蒙古地区的233份牛血清进行了检测。结果表明,所建立的牛皮蝇蛆病间接ELISA诊断方法具有较好的特异性、敏感性和可重复性,可用于牛皮蝇蛆病的血清学检测。     

骆驼斯氏副柔线虫病间接ELISA检测方法的建立

为建立骆驼斯氏副柔线虫病间接ELISA （iELISA）诊断方法,本试验对骆驼斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶CPR基因进行重组表达,将获取的重组蛋白（rCPR）进行纯化和Western blotting检测,然后以纯化好的重组蛋白为抗原,通过棋盘滴定试验优化了抗原包被浓度、包被条件、抗体稀释度、酶标二抗稀释度、封闭液和封闭时间等,建立了骆驼斯氏副柔线虫病iELISA诊断方法,并对建立的iELISA检测方法进行了重复性、敏感性、特异性试验和临床检测。结果显示,抗原最佳包被浓度为8 μg/孔,血清最佳稀释度为1：50,酶标二抗最佳稀释度为1：5 000,最佳包被条件为4℃包被过夜,最佳封闭条件为3% BSA封闭2 h。临界值为0.235,待检血清D_{450 nm}值>0.235则确定为阳性。重复性试验中变异系数均<10%,重复性较好;用该方法检测阳性血清的敏感性为96.3%;此方法仅与骆驼斯氏副柔线虫病阳性血清发生特异性反应,与感染了其他寄生虫的阳性血清无交叉反应,特异性为100%;对140份临床血清进行检测,阳性率为86.4%。综上可知,本试验成功建立了一种快速有效诊断骆驼斯氏副柔线虫病的iELISA方法。     

干旱半干旱地区华北落叶松人工林可持续经营技术研究进展

对国内外关于干旱半干旱地区森林的可持续经营理论研究进行了综合评述,介绍了干旱半干旱地区森林特别是华北落叶松人工林可持续经营技术及研究现状,指出了当前国际及国内主要森林可持续经营的指导思想,介绍了森林认证的目的、作用等,阐述了干旱半干旱地区华北落叶松人工林可持续经营的发展趋势和生产实践中急需解决的重点问题。意在为干旱半干旱地区华北落叶松人工林的持续经营提供理论支持,并为将来干旱半干旱地区华北落叶松人工林方面的研究提供理论依据。     

干旱半干旱地区华北落叶松人工林不同密度的土壤水文研究——以塞罕坝机械林场为例

试验通过标准地调查、土壤物理性质、持水能力测定及入渗实验,对塞罕坝机械林场3种不同密度华北落叶松林分土壤水文效应做了初步研究,结果表明:裸地各层土壤容重最大,为134.25 g/cm3;最大蓄水量及有效蓄水量在林分密度为3 990株/hm2(样地3)最高,其它样地分别为122.05,670.59 t/hm2;样地3非毛管孔隙度是裸地非毛管孔隙度的2.4倍,利用幂函数对土壤入渗速率与入渗时间进行拟合,结果显示相关系数都在0.90以上。     

噪声影响下舆论传播的建模与仿真

考虑到在现实社会的舆论传播过程中各种外界因素对人的干扰,使得每个人只能以一定的概率按照少数服从多数的规则进行演化这一情况,建立了相应的元胞自动机(Cellular Automata,CA)舆论传播模型,并利用"平均场"对该模型进行了理论分析和仿真试验。结果显示,在不同强度噪声的影响下,舆论演化将会得到完全不同的3种结果:①舆论最终偏向于某一种意见;②两种舆论意见各占50%;③系统处于周期性振荡中,舆论时而偏向一种意见,时而又偏向另一种意见。     

内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药种群Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性调查

为了解内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性的情况,对来自内蒙古乌审旗、察右后旗和科右前旗3个地区各19条捻转血矛线虫雄虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定为捻转血矛线虫后,扩增出Ⅰ型β微管蛋白基因,测序后对耐药相关167、198和200位点突变情况进行调查分析。结果表明,在这3个地区均未发现167位点突变,主要是198和200位点发生突变,总体上看198位点突变频率高于200位点。分析这57条雄虫基因序列发现4种基因型,分别是198纯合耐药型及200纯合敏感型、198纯合敏感型及200纯合耐药型、198纯合敏感型及200杂合耐药型和198及200均杂合耐药型。而耐药基因型频率乌审旗为100%,察右后旗68.42%,科右前旗94.74%,这与粪便虫卵减少试验结果一致。研究结果为捻转血矛线虫病的预防和治疗提供一个新思路,可有效避免耐药性或者减缓耐药性的产生,减少畜牧养殖行业的经济损失。     

毛乌素沙地4种灌木地上构件生物量和碳分布特征

采用收割法、烘干法、湿烧法对毛乌素沙地4种灌木地上构件的生物量、含水率、含碳率进行了测量,结果表明,4种灌木地上构件含水率差异较大;4种灌木的主枝含碳率均较低,构件含碳率分布具有随机性,由植物自身生理生态特性控制;4种灌木构件生物量密度和碳密度大于草本植物,含碳率大于杨柳类阔叶乔木;4种灌木均表现为主枝生物量和碳分配最大,主枝是4种灌木储存碳的主要构件和构成种群的主要构件.4种灌木构件生物量和碳分布特点反映了植物在干旱环境中能够很好地吸收固定二氧化碳,在于旱半干旱地区应以臭柏等耐旱、含碳率高的灌木为主要树种进行碳汇林建设.     

牛皮蝇幼虫抗原基因原核表达条件的优化

分别对构建的3种牛皮蝇幼虫抗原(Hypodermin A,B,C)基因重组表达菌BL21(pETHA)、BL21(pETHB)、BL21(pETHC)在不同的诱导时间、诱导剂浓度和诱导温度等条件下的表达情况进行了研究.结果表明,重组表达菌BL21(pETHA)、BL21(pETHB)、BL21(pETHC)最佳诱导时间...     

纹皮蝇Hypodermin C基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立

为建立牛皮蝇蛆病的抗体检测方法,本研究从纹皮蝇I期幼虫中提取总RNA,采用RT-PCR扩增了Hypodermin C(HC)基因.将该基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+)中进行原核表达.获得了31ku以包涵体形式表达的重组HC蛋白.Western blot结果表明表达产物能够与阳性牛血清IgG特异性结合,具有良好的抗原活性.以纯化的重组HC作为包被抗原建立了牛皮蝇蛆病间接ELISA诊断方法,实验确定抗原最佳包被浓度为15.63 μg/mL,血清最佳稀释度为1:80,阳性标准判定为待检血清OD值＞0.256.所建立的诊断方法具有较好的特异性、敏感性和可重复性.应用该检测方法对230份临床血清进行检测,阳性率为20.6％.研究结果表明该间接ELISA方法是一种有效的牛皮蝇蛆病血清学检测方法.     

Study on Molecular Characterization of Class Ⅰ Integron and Integron-associated Antimicrobial Resistance in Escherichia coli from Beef Cattle

To investigate the prevalence and molecular characterization of class Ⅰ integron in Escherichia coli isolated from beef cattle, and analyze the relationship between integron and antimicrobial resistance, susceptibilities to 11 antimicrobials were conducted on 92 isolates, the presence and characterization of class Ⅰ integrons and inserted gene cassettes were performed using PCR combined with sequencing analysis. The results showed that 29 isolates had been detected positive for class Ⅰ integron integrase gene (intⅠ1) among 92 isolates, and aadA1 and dfrA17＋aadA5 were the most prevalent gene cassette arrays detected. The resistance rates of 92 isolates to ampicillin, streptomycin, sulfisoxazole and tetracycline were all more than 45.0%. As revealed by analyzing the association between resistance phenotypes and class Ⅰ integron, isolates that contained the class Ⅰ integron were significantly highly resistant to ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, sulfisoxazole and sulfamethoxazole-trimethoprim (P<0.05), but not to quinolones and amoxicillin/clavulanic acid. The conclusion was that E.coli isolated from beef cattle were seriously resistant to antimicrobials,and integron/cassettes widely existed. The presence of integrons and the association of antimicrobial resistance determinants with transferable elements might play a crucial role in the dissemination of antibiotic resistance among E.coli. Data reported here clearly emphasized the need for a stricter application of antimicrobials restriction policies in feedlot setting.