HPLC法检测果实组织中内源IAA、ABA方法的改进

以柑橘、猕猴桃、桃和葡萄果实为材料,在前人研究的基础上,结合近10年的研究积累,针对果实组织材料富含多酚类和色素等杂质的特点,对以往的HPLC分析植物内源激素的植物材料前处理方法进行了改进,并配合适宜的HPLC色谱条件,用于果实组织内源IAA和ABA的分析测定。结果显示该改进方法适合果实组织内源IAA和ABA的分析测定。     

猕猴桃基因组DNA文库的构建

采用改良CTAB法提取美味猕猴桃(Actinidiadeliciosacv.Bruno)基因组DNA,经CsCl密度梯度离心纯化后用Sau3AI部分酶切,通过透析袋电泳的方法分级回收,剔除14kb以下的片段,回收长为14～23kb的酶切片段。部分酶切片段经dATP和dGTP部分补平后与LambdaFIXII载体连接,连接产物用GigapackⅢPackagingExtract进行包装,最后得到含有1.05×106pfu的基因组文库,扩增后文库滴度为2.5×109pfu/mL。利用6对根据植物基因保守区或猕猴桃基因序列设计的专一引物对基因组文库和基因组DNA进行PCR扩增,均得到与预计长度相符的目的基因片段。RR     

杨梅果实采后生物学特性与冷链物流技术

杨梅是原产我国的特色水果。自然条件下,杨梅果实采后贮藏时间短,是最不耐贮藏的水果之一。采用基于预冷、温湿度控制的采后冷链物流技术,可以有效延缓杨梅果实成熟衰老进程,降低表面微生物活力,维持良好品质和商品性,延长贮藏物流时间,促进杨梅产业规模扩大和市场开拓,提高产业经济效益。     

“玉露”桃的采后生理及其贮运技术研究

以七八成熟的“玉露”桃果实为试材，研究其采后生理的变化及与之适应的贮运技术．试验结果表明：①“玉露”桃果实采后常温下后熟衰老进程很快，果实组织中的ＳＯＤ活性急剧下降，果实迅速软化，采后第３天出现乙烯释放高峰，随之果实即达完熟；②３℃贮藏果实，可维持较高的ＳＯＤ活性，减缓果实软化，减少乙烯释放量并推迟其峰值的出现；③经３℃预冷１－３天后的果实，置于常温下仍能正常后熟并不影响其品质，且后熟进程得以推迟，从而为“玉露”桃的短期低温集结与批量外运提供了技术依据；④采用内有隔板瓦楞纸箱加聚乙烯发泡网套果包装，与传统的竹箩包装相比较，可明显减少运输过程的振动损伤，使果实商品率增加，腐烂率减少，货架寿命延长．     

猕猴桃成熟果实中脂氧合酶基因的克隆

采用ＰＣＲ扩增方法,从成熟猕猴桃果实组织中克隆到一个８２４ｂｐ的脂氧合酶（ＬＯＸ）基因片段（ｐＫＬＣ１）,该片段含有２７５个氨基酸组成的开放阅读框架,它与拟南芥菜、黄瓜、豌豆、土豆、水稻、大豆、烟草和番茄的核苷酸同源性为５９．０％～７４．６％,氨基酸同源性为６３．１％～７６．３％。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明,ｐＫＬＣ１片段为一低拷贝数基因家族所编码。     

银杏苯丙氨酸解氨酶基因的克隆和序列分析

根据其他植物PAL基因的DNA序列的保守区域，设计了一对简并引物，经PCR扩增，得到一条862 bp的特异性扩增带。将PCR扩增产物构建到T-载体并测序，获得了862 bp DNA序列。通过分析所得的862 bp DNA序列及其编码的氨基酸序列，与其他植物PAL基因的DNA序列和蛋白质序列分别进行比较，证实了所得序列为银杏PAL基因的部分序列。Gbpal1已经被Genebank收录，序列号为AY578145。Southern杂交结果表明银杏PAL是一个多基因家族。     

桃果实采后脂氧合酶活性和膜脂脂肪酸组分的变化

 以‘湖景蜜露’桃果实为试材, 分析了果实后熟软化进程中的乙烯释放、脂氧合酶(LOX) 活性和细胞膜脂脂肪酸组分的变化, 探讨其与果实软化的关系。结果表明, 细胞脂脂肪酸组分主要有棕榈酸(16∶0) 、硬脂酸(18∶0) 、油酸(18∶1) 、亚油酸(18∶2) 和亚麻酸(18∶3) 。在果实采后20 ℃后熟过程中, 三种不饱和脂肪酸组分比例变化较大(尤其是亚油酸和亚麻酸) , 而两种饱和脂肪酸的变化很小。在LOX 自我活化之前, 亚麻酸可能是LOX催化反应的主要底物。果实组织的后熟软化与LOX参与的细胞膜脂过氧化作用有关, 乙烯跃变可能是桃果实成熟启动后的伴随因子, 参与后熟软化进程。