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为了建立马梨形虫病双重PCR检测方法,试验根据Gen Bank发表的驽巴贝斯虫和马泰勒虫18S rRNA保守基因序列分别合成2对特异性引物,以核酸混合物为模板,优化反应条件建立马梨形虫病双重PCR检测方法,并检验该方法的特异性和敏感性。同时用该双重PCR检测方法对采自昭苏种马场的马疑似病例全血进行检测,并与镜检法和单重PCR法进行比较。结果表明:该双重PCR检测方法能对驽巴贝斯虫和马泰勒虫核酸扩增出大小为529 bp和789 bp特异性目的片段,而对双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、羊泰勒虫、牛巴贝斯虫核酸的扩增均为阴性;驽巴贝斯虫和马泰勒虫阳性DNA被稀释1×108倍时均能检出其相应目的片段;对采集的46份马疑似病例血样进行PCR诊断,其中驽巴贝斯虫感染率为30.4%(14/46),马泰勒虫感染率为41.3%(19/46);双重PCR检测方法与单重PCR方法的符合率为100%。说明建立的双重PCR检测方法具有一定的特异性和敏感性,可用于驽巴贝斯虫和马泰勒虫临床感染隐性病例的联合检测与鉴别诊断。 相似文献
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毛白杨2年生埋条平茬苗在土壤含水量15%的春早期能正常生长,年总生长量和净增总干重均为相应原总量的27%左右,根冠比1.28,苗冠生长受抑制,叶片解剖构造具数量庞大的光合细胞器,矿质元素在叶内数量随生长进程而递减,不合理的倒卵形苗冠结构抑制了中下部叶光合潜能的充分发挥,从而使苗木生长量大为下降。 相似文献
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农机培训教育工作.是国营农场农机管理的一项重要工作。随着社会主义市场经济的深入发展,为适应农场,农机经营体制形式发展变化的需要,进一步加大培训工作力度.显得尤为重要和迫切。目前个体所有的农业机械得到迅猛发展.据资料统计截止到1999年5月底,全垦区农场大、中型拖拉机中,私营占57.3%。联合收获机中,私营占68.l%。私有车主一般文化素质较低,在获得拥有和使用农业机械自主权后,所雇佣的机组人员,大多数是没有经过专业培训而匆忙上岗的年青人,这些不合格的“机手”需急待“补课”和进行职业技术教育。另外,由于垦区… 相似文献
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刘世芳 《山西农业大学学报(自然科学版)》1984,(1)
<正> 华北落叶松以我省北部高山为中心分布区,其数量多、生长好,是高中山地区的针叶速生林,也是该地区的主要造林树种,木材经济价值高,经营管理意义大,为进一步提高经营管理水平,有必要对其分布及生长更新特点进行较深入的探讨。一、分布状况我省华北落叶松主要分布在五台、关帝、管涔、恒山等高中山地区,太岳林区也有少量分布,其分别属于温带暖温带山地落叶针叶林和温带暖温带针叶、落叶阔叶混交林 相似文献
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棒状体相关蛋白1(rhoptry-associated protein 1,RAP-1)是由棒状体分泌的与侵袭宿主细胞相关的蛋白。本研究以顶复门原虫RAP-1基因为靶标,用最大似然法构建了巴贝斯属、疟原虫属、泰勒虫属的RAP-1基因进化树;应用软件预测分析RAP-1蛋白的理化性质、亲疏水性、跨膜区以及二、三级结构,并表达纯化了马泰勒虫(Theileria equi)RAP-1重组蛋白。结果显示:巴贝斯属不同虫株相聚类,测定序列与马泰勒虫聚为一支,又与恶性疟原虫相聚类,表明亲缘关系较近。马泰勒虫RAP-1蛋白理论等电点为9.85,半衰期为30 h,总平均亲水性(GRAVY)为-0.368,无跨膜区;RAP-1蛋白二级结构中,α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲占比分别为38.5%、15.5%、27.8%、18.1%;构建的三级结构立体展现了RAP-1蛋白形态。成功构建了原核表达载体pET-32a-RAP-1;该重组蛋白主要以包涵体形式存在,蛋白大小为65 kDa。RAP-1蛋白可通过原核表达系统高效表达,纯化后的产物能被马泰勒虫标准阳性血清识别,具有良好的反应原性。本研究为深入了解马泰勒虫入侵宿主的机制机理以及RAP-1蛋白的功能研究奠定了基础。 相似文献
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为了探索稀土配合颗粒饵料在网箱养鱼中应用的可能性和效果,寻求饵料中添加稀土元素的适宜剂量,达到促进鱼类生长,提高产量,降低成本的目的,1989年7月25日至10月10日,我们在北京市东郊鱼类饵料厂内湖网箱养鱼场,进行了稀土配合颗粒饵料应用于网箱养鱼的探索性试验,取得了试验组鱼种产量比对照组提高8.6%的初步成果。 相似文献
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裂殖子表面抗原蛋白家族因其高抗原保守性常作为马泰勒虫ELISA检测方法的基质。本研究根据马泰勒虫EMA2基因序列合成引物,以马泰勒虫新疆株DNA为模板,扩增获得目的基因,将其连接至pEASY-E1载体构建重组质粒pEASY-E-TE,并转化至大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达重组EMA2蛋白并鉴定。结果显示:PCR扩增获得了约819bp特异性DNA片段,构建了pEASY-E-TE重组质粒,成功诱导表达了35kDa的可溶性目的蛋白;经SDS-PAGE、Western blot鉴定,重组蛋白rEMA2具有良好的抗原性。本试验克隆表达的重组蛋白rEMA2可为ELISA方法的建立及后期研究提供靶基因材料。 相似文献
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为了观察和探讨不同检测方法及不同药物对马泰勒虫病的临床诊疗效果,提高对马泰勒虫病临床诊疗的防治水平,随机采集昭苏县种马场128匹疑似马血样品,采用临床症状观察、病原学检查和PCR检测等方法确诊了12例马泰勒虫病病例。将12匹阳性马随机分为2组,即处方1组和处方2组,用药后的5d内,分别对每组患马进行临床症状观察、体温测定、血涂片检查和染虫率统计。结果显示,血涂片中含有圆形或圆点形的马泰勒虫,PCR检测得到512bp的目的条带,与目的片段相符。第1治疗组(三氮脒治疗组)治愈率为66.7%(4/6),第2治疗组(盐酸吖啶黄组)治愈率为83.3%(5/6),第2治疗组治愈率高于第1治疗组。本试验发现,临床症状观察、病原学检查和PCR检测法相结合可准确诊断马泰勒虫病;处方2组是2种处方中治疗马泰勒虫病的最佳处方,以上诊疗数据可为马泰勒虫病的防控提供参考。 相似文献