马铃薯Y病毒CP基因的原核表达及免疫金标试纸条的研制

选取马铃薯Y病毒（potato virus Y,PVY）代表株（NC＿001616.1）外壳蛋白基因37～281区间，采用化学合成方法合成目标序列，将其连接到原核表达载体pET-32a（+），并转化至大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导表达出45 kDa融合蛋白，回收后免疫日本大耳白兔制备抗血清。Western Blot分析多克隆抗体特异性良好，后制备25 nm胶体金，标记PVY CP37-281多克隆抗体，制备胶体金免疫层析试纸条。结果表明，试纸条能在15 min内检出PVY,PVY病株汁液检测稀释限度可达106倍（W/V），使用常见复合侵染烟草检测，未出现交叉反应。由此可知，该试纸条操作简便，反应灵敏特异，适用于田间一线及种薯生产中马铃薯Y病毒的检测。