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液泡加工酶(VPE)基因是植物内启动和执行细胞程序性死亡的关键基因,β型VPE是种子特异表达并且为种子蛋白成熟所必须的基因.本研究以黑比诺葡萄(Vitis vinifera cv.Pinot Noir)花后8个不同时期胚珠的cDNA混合样为模板,通过RT-PCR扩增得到葡萄β型液泡加工酶基因(暂命名VvβVPE,GenBank登录号:KC136352),开放阅读框1 485 bp.进一步将VvβVPE克隆到pGEX-6P-1原核表达载体并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中,经IPTG诱导,获得约81.3 kD的包涵体融合蛋白GST-VvβVPE.将诱导条件优化后,在37℃、0.05 mmol/L IPTG诱导5h后融合蛋白GST-VvβVPE的表达量最大,采用电透析与盐酸胍处理后透析复性两种方法获得纯化包涵体蛋白,电透析纯化法获得纯化包涵体蛋白的浓度可达到免疫要求.使用纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗血清,经Western blot检测,该抗血清(稀释到1∶10 000)与GST-VvβVPE融合蛋白识别反应良好,获得的抗血清可用于以后的VvβVPE的酶活性分析、免疫亚细胞定位分析以及转基因植株蛋白水平的鉴定等,为进一步明确VvβVPE在葡萄胚珠发育中的作用提供基础数据. 相似文献
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本试验在西门塔尔品种的母牛群中进行。对照组(502头)给予常规日粮。试验组1(487头)在产犊前40~30天和20~15天肌肉注射维生素A 的制剂,试验组Ⅱ(495头)在产犊前40~30天和20—15天以及产犊后10—15天和35—40夭肌肉注射维生素 A 的制剂。试验各组每头母畜给予维生素 A2,000,000国际单位。试验处理全年进行。试验所得繁殖指数表明,试验组1的平均配种期减少了10.10天(降到106.92天);试验组Ⅱ减少了19.38天(降到97.64天)。从产犊到首次授精的间隔期,分别缩减 相似文献
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发展养鸡业必须以全价配合饲料作为基础。如何提供合理实用的日粮配方,这是养鸡科技人员与养鸡工作者经常遇到的一个实际问题。这不单涉及到营养、管理方面的知识,还关系到较为复杂的计算问题。目前国外是用电子计算机,将数十个营养成分、原料价格和配制水平等数据输入机内贮存,进 相似文献
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用直接放射免疫法(RIA)和微滴平板酶免疫测定法(Micro-EIA)发展成了沼泽型水牛的快速血浆孕酮(P)免疫测定法。在育种群中用来进行不孕和繁殖力低等方面的选择的 P 测定法,应用于大型牧场的常规育种计划。48头母水牛分为17头、15头和16头三群,3头公水牛分在各群并保持70天。分开公牛后15、25和35天进行血浆 P 的测定,并在分开公牛后15、38和60天进行临床直肠检查。全期妊娠的15头牛在选择时的 P 水平,用 RIA 法测定分别为 相似文献
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在寻找能将犊牛与其母牛分开的理想的肉牛放牧方法中,做了两个试验,以弄清限制哺乳对母牛及其犊牛的影响。试验1中,在产犊后4天将21对母子分成三组,即每日一次哺乳组(1S)、每日两次哺乳组(2S)和哺乳对照 相似文献
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无核葡萄是鲜食与制干葡萄的重要组成部分。当前市场上无核葡萄品种较少的主要原因是无核葡萄抗病性差、果粒小、产量低,因此优质无核葡萄品种选育成为当前葡萄育种领域的重要课题。育种过程中有核后代所占比例较大及童期较长在一定程度上制约无核葡萄育种的进度。无核基因分子标记技术的引入可以高效的在幼苗期检测出该品系是否为无核葡萄,有效的排除有核后代,加速无核葡萄育种进程。该文主要从葡萄无核标记的研究进展、在科研实践中的应用、存在问题以及未来发展方向等研究进行了综述。 相似文献
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