拮抗青枯雷尔氏菌的放线菌筛选及其防病作用

【目的】青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的青枯病是烟草的主要病害。本研究从不同生境的土壤中筛选出对青枯雷尔氏菌有较强拮抗作用的放线菌,探究其对青枯雷尔氏菌的生理特征影响以及对烟草青枯病的防治效果,为进一步开发防病微生物菌剂提供理论依据。【方法】利用共培养法和牛津杯法筛出目标放线菌后,通过形态学研究、生理生化试验和多基因系统发育分析对目标菌株进行菌种鉴定。通过96孔板法测定目标放线菌粗浸膏对青枯雷尔氏菌的最低抑菌浓度(MIC)。粗浸膏对青枯雷尔氏菌处理后,检测青枯雷尔氏菌的生长动态变化,并用扫描电子显微镜观察其形态的变化;通过测定β-半乳糖苷酶活性和碘化丙啶(PI)荧光试验以及傅里叶变换红外光谱观察对细胞膜通透性和膜成分的影响;通过测定胞外多糖(EPS)、胞内活性氧(ROS)等探究目标放线菌株对青枯雷尔氏菌的影响。并通过盆栽试验测定目标放线菌株对烟草青枯病的防治效果。【结果】根据形态特征、生理生化试验结果和测序结果,将筛选得到的目标放线菌Sa-21菌株鉴定为雷帕链霉菌(Streptomyces rapamycinicus),对青枯雷尔氏菌的抑菌圈直径达47...     

链霉菌Sa-21对烟草黑胫病的防效及抑菌作用研究

烟草疫霉引起的烟草黑胫病,是烟草生产上的重要病害之一。为了明确链霉菌Sa-21防治烟草黑胫病的应用潜力,用盆栽试验测定了链霉菌Sa-21的生防效果,并用生长速率法等手段探讨了链霉菌Sa-21对烟草疫霉的抑菌作用。盆栽试验表明,链霉菌Sa-21菌株发酵液对苗期和成株期烟草黑胫病有较好的控制效果,最高防效可达98.39%。菌株Sa-21粗浸膏对烟草疫霉菌丝生长的抑菌中浓度为56.1μg/mL,50μg/mL的粗浸膏处理后可以降低50%的菌丝生物量。菌株Sa-21粗浸膏对烟草疫霉孢子囊的产生、游动孢子释放、休止孢萌发以及细胞膜透性均有抑制作用,100μg/mL的粗浸膏基本能够完全抑制孢子囊的产生,并且对游动孢子释放的抑制率达50%以上;粗浸膏浓度为150μg/mL时,对休止孢萌发的抑制率达94.35%;随着粗浸膏浓度增加,菌丝细胞膜的透性也会加大。研究结果表明,链霉菌Sa-21代谢物对烟草疫霉的生长繁殖产生抑制作用,并为链霉菌Sa-21生防菌剂的开发及其对烟草黑胫病的防治提供了理论依据。     

一株拮抗菜豆普通细菌性疫病链霉菌的筛选、鉴定及防效研究

为寻找有潜力的生防菌株,本研究通过共培养初筛和牛津杯复筛从土壤中分离筛选获得123株放线菌。最终获得1株对菜豆普通细菌性疫病病菌Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli(Xap)抑制能力最强的菌株Sa-4,发酵液抑菌圈直径为（31.62±3.23）mm。根据显微形态观察、生理生化特性测定并结合16S rDNA序列分析,鉴定菌株Sa-4为阿维丁链霉菌Streptomycesavidinii。抗菌谱测定结果表明,菌株Sa-4发酵液对多种植物病原菌均具有较强的拮抗作用。稳定性试验结果表明,菌株Sa-4的发酵液具有较好的光稳定性和热稳定性。抑菌机理研究结果显示,菌株Sa-4发酵液对Xap的基因组DNA无明显作用;对Xap蛋白质合成有一定的影响;傅立叶变换红外光谱结果显示,菌株Sa-4发酵液会导致Xap细胞膜表面的物质发生改变;电镜观察结果显示Xap细胞出现皱缩、凹陷等现象。防效结果表明,菌株Sa-4发酵液对菜豆普通细菌性疫病的相对防效可达68.69%。本研究结果为阿维丁链霉菌菌株Sa-4在菜豆普通细菌性疫病的生物防治产品开发提供基础参考数据。