芜菁花叶病毒长春分离物p3基因的克隆、序列分析及P3蛋白抗血清的制备

 用RT-PCR方法从长春感染芜菁花叶病毒( Turnip mosaic virus,TuMV)的十字花科蔬菜中扩增获得该病毒的p3基因,并对其序列进行了比较分析。结果表明,本研究所获得的10个TuMV分离物p3基因含1 065个核苷酸,其序列一致率为98.8%~99.6%,与GenBank中其他15个TuMV分离物核苷酸一致率为80.9%~99.4%。根据p3基因核苷酸序列构建的系统进化树显示:25个TuMV分离物可分为4个组,本研究得到的10个TuMV分离物均属于basal-BR组。将TuMV JCR06分离物p3基因N端663 bp片段克隆至原核表达载体pET-28a(+),并在大肠杆菌BL21(DE3) pLysS中表达出分子量约为28 kDa的融合蛋白。以纯化的融合蛋白为抗原免疫家兔,制备了P3蛋白的特异性抗血清。以TuMV侵染的萝卜为抗原,间接ELISA测定抗血清的效价为1∶2 048。Western blotting分析表明,制备的抗血清能与诱导表达的融合蛋白发生特异性反应。     

雪茄烟叶pH、总挥发酸和总挥发碱含量及相关性分析

对不同类型及产地雪茄烟叶pH、总挥发酸和总挥发碱含量进行对比分析,并对三者关系进行偏相关分析。结果表明,雪茄烟叶的pH、总挥发碱高于烤烟,总挥发酸低于烤烟,3个指标为负相关;不同产地雪茄烟叶pH、总挥发酸和总挥发碱含量差异显著。综上,雪茄烟叶具有高pH和高总挥发碱、低总挥发酸的特点。