优质肉鸡放养技术

<正>利用经济林,用材(柴)林,荒山草坡,放养地方品种及土杂肉鸡,对林地、草地的立体开发,可减少林地,草地虫害,培肥土壤,利用树叶及种子,牧草及种子,昆虫等自然饲料,生产优质鸡肉和鸡蛋产品,供应市场,提供劳动就业岗位,促进畜牧业可持续发展。技术要点如下:     

《中国兽药典》与《中国药典》中部分中兽药质量标准的比较

对2005年版《中国兽药典》和《中国药典》收载的中成药从[制法]、[功能与主治]、[鉴别]及[含量测定]等项所采用的技术和方法方面进行比较，从中找出两者之间存在的差距，并对中兽药质量标准的修订提出了建议。     

潼南县七彩山鸡生产现状与发展

1现状 七彩山鸡,学名雉鸡,也称环颈雉鸡、山鸡、野鸡,是一种集食用、药用、观赏于一体的野外饲养特禽,潼南县已有10多年的饲养经历,全县有11个镇乡109户农户饲养,饲养量110万只,建有种鸡生产、孵化、育雏场7个,年孵化育雏山鸡200万只,生产山鸡商品蛋500万余枚,山鸡生产产值达6000万元,建有山鸡生产合作社3个,发展七彩山鸡区域化生产村1个。     

HPLC测定参黄安泰注射液中麻黄碱的含量

参黄安泰注射液由苦参、麻黄二昧药经水醇法制成,具清热燥湿,宣肺利水的功效,临床研究证明对仔猪白痢有明显疗效,麻黄主要含麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱、甲基伪麻黄碱、去甲基伪麻黄碱,苦参主要含苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱,传统主要用滴定法检测麻黄和苦参总生物碱控制质量,因方法专属性差且操作复杂,不能有效控制产品质量。笔者等采用高效液相色谱法测定制剂中麻黄碱的含量,该方法操作简便,快速,准确可靠,可用于参黄安泰注射液的质量控制。     

正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库部分EST序列的电子克隆及验证

【目的】探讨从EST序列电子克隆全长基因序列的有效性,为今后快速克隆和研究免疫相关基因提供新方法。【方法】以正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库测序所得的EST序列作为起始材料,应用生物信息库对文库中的部分EST序列进行电子克隆,并用RT-PCR验证其准确性。【结果】电子克隆正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库序列,共获得20条片段重叠群（Contigs）,经基因注释,证实其均得到了有效延伸,具有完整开放阅读框（ORF）,其中已知的猪基因序列14条,猪新基因序列6条;从已知猪基因序列和未知猪新基因序列中各抽取1条感兴趣序列（ESTcontig110和ESTcontig133）进行全长cDNA预测,发现电子克隆所得序列ESTcontig110和ESTcontig133的预期扩增片段（ORF）与实际扩增片段（ORF）基本一致,核苷酸相似性在98.0%以上,氨基酸相似性在93.0%以上。而对ESTcontig133的ORF序列（猪的60S核糖体蛋白L18a亚基）进行基本特性及结构预测,发现ORF133蛋白为非分泌型蛋白,由6个折叠和6个螺旋结构组成,含有8个不同的磷酸化位点。【结论】从EST序列电子克隆全长基因是可行的,为今后快速克隆和研究免疫相关基因提供了参考。     

猪STAT-1α基因的原核表达及其多克隆抗体制备

[目的]通过制备STAT-1α多克隆抗体,为进一步研究STAT-1α蛋白的功能特性及探索STAT-1α与猪瘟病毒间的相互作用机制奠定基础.[方法]利用RT-PCR从猪肾PK-15细胞中克隆出STAT-1α基因保守片段,与pET-32a（＋）构建原核表达重组质粒,转化原核宿主菌（Rosetta）,进行IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经纯化和复性浓缩后,免疫小鼠制备STAT-1α多克隆抗体.[结果]STAT-1α基因能与原核表达载体pET-32a（＋）构建原核表达重组质粒pET-STAT-1o,转化大肠杆菌Rosetta后的最佳体外诱导条件是IPTG 0.5 mmol/L、诱导时间6h,其重组蛋白主要以包涵体的形式表达.STAT-1α多克隆抗体具有高效特异性,与真核细胞PK-15细胞作用后,在PK-15细胞内能检测到STAT-1α蛋白表达,可观察到大部分细胞胞浆内有绿色荧光,但胞核内几乎无荧光,即STAT-1α主要定位在正常PK-15细胞的细胞浆内表达.[结论]制备获得的猪STAT-1 α多克隆抗体特异性好,既能与原核细胞大肠杆菌（Rosetta）表达的STAT-1α反应,又能与真核细胞PK-15的STAT-1α发生反应.     

正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库构建及EST初步分析

【目的】构建猪淋巴细胞基因文库,初步绘制正常猪外周血淋巴细胞的基因表达谱,为进一步筛选免疫相关基因提供平台。【方法】以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与质粒载体连接后转化大肠杆菌,进一步扩增后,获得猪外周血淋巴细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合,并进行序列分析和注释。【结果】构建了正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库,获得库容量为1.2×106 PFU/mL、重组率为93.3%、85%插入片段处于750～2000 bp的高质量文库;随机测定1100条ESTs,经拼接和聚类,获得152条高表达的基因重叠群（Contigs）和619条低表达基因——单拷贝的EST（Singletons）;经序列比对分析,发现23.3% ESTs为与任何物种都没有匹配的新基因,75.9% ESTs为与猪没有匹配的新基因。用GO数据库对获得的EST进行基因功能分类和KEGG路径图分析,发现丝裂原活化蛋白激酶途径（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）、钙信号通路、胰岛素信号通路、脂肪细胞因子信号通路、Toll-like受体信号通路、B细胞受体信号通路和T细胞受体信号通路的基因均有较高表达。【结论】大部分的猪外周血淋巴细胞基因尚未被分离和鉴定出来,但这些基因mRNA转录和表达丰度均较高,且在猪外周血淋巴细胞中起着非常重要的作用。     

浅谈抗菌药物与中药在兽医临床上的联合使用

抗菌药物在人医、兽医和农业上广泛应用,由于其在使用中产生耐药性和残留等,影响人类用药和食品安全,很多国家都颁布抗菌药物的使用管理制度和法规。抗菌药物与中药联用是我国中西医结合的特色,针对目前抗菌药物与中药联用的研究成果及使用状况,笔者等从合理、合法使用抗菌药物和中药,探讨联合用药的发展方向,以求教于同道。