水库移植池沼公鱼试验

自1998年开始,我们在乌什水水库开展了池沼公鱼(Ｈｙｐｏｍｅｓｕｓｏｌｉｄｕｓｐａｌｌａｓ)移植工作,从乌伦古湖移入发眼卵,移植效果报道如下。1　乌什水水库自然概况乌什水水库位于中亚内陆高寒干旱地区,额敏河水系沙拉依敏河中游。海拔876ｍ,东经81°21′,北纬46°51′。总库容3850万ｍ3,死库容40万ｍ3,养鱼面积2400亩,最大水深37ｍ。属山谷灌注式调节型水库,农业灌溉面积15万亩,库水无工业污染。年平均气温625℃,最高气温夏季平均349℃,最低气温冬季多年平均-28℃,无霜期120ｄ,年日照数近3000ｈ。11月下旬结冰,冰层厚度80ｃｍ;库水4月…     

新疆赛里木湖移入鱼类仔鱼生长调查

<正> 1980～1983年新疆赛里木湖移入鱼苗鱼种201.11万尾。经1983～1984年调查研究,证实移入鱼类通过了成活阶段和繁殖阶段。为弄清移入鱼类的仔鱼生长情况,1986年6月至7月我们在三台站湖边使用鱼苗网捕仔鱼303尾,计4293.46克(见表1)。     

大豆翻译延伸因子GmEF1A干扰载体的构建及大豆遗传转化

研究发现GmeEF1A与大豆花叶病毒的P3蛋白存在互作关系,并且参与SMV在大豆体内的繁殖。通过大豆GmeEF1A基因5个拷贝的核苷酸和氨基酸序列比对,确定其保守区间,克隆得到180 bp的干扰片段GmeEF1Ai。利用GATEWAY技术构建RNA干扰(RNA interference,RNAi)表达载体pB7GWIWG2(II)-e EF1Ai,并通过农杆菌介导的子叶节转化法导入到受体大豆品种天隆1号中。测序结果显示重组质粒中插入的干扰片段GmeEF1Ai与目标序列完全符合,通过PCR和酶切验证表明GmeEF1Ai是以反向重复形式插入到表达载体中。经转化获得组培苗8株,PCR、除草剂涂抹和PAT/bar试纸条多重检测确认7株为阳性。绝对荧光定量结果显示,阳性苗中4株为单拷贝。GmeEF1A基因表达量分析结果显示GmeEF1Ai载体对GmeEF1A的5个拷贝基因有不同程度的阻抑。这不仅为验证GmeEF1A基因在大豆受SMV侵染时的功能提供试验材料,也为大豆抗病育种提供新的种质。     

大豆花叶病毒CP基因RNAi载体的构建及大豆遗传转化

为获得含有大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus,SMV）CP基因干扰片段的转基因大豆新材料,对11个SMV流行株系的CP基因进行了核苷酸序列比对,采用GATEWAY技术构建了RNA干扰（RNA interference,RNAi）载体pB7GWIWG2（Ⅱ）-CPi,对重组载体测序比对,通过酶切以及PCR方法鉴定载体,并利用农杆菌介导的转基因体系进行大豆遗传转化。克隆出264 bp高度保守的CPi干扰片段,通过测序证实其与目标序列的匹配度达到100%;重组质粒经过XbaⅠ单酶切后出现783 bp和10 818 bp两条带,经过EcoRⅠ、Hind Ⅲ双酶切后出现2 256 bp和9 346 bp两条带,说明2个ccdB结合位点均被CPi取代;PCR反应得到474 bp和460 bp两条带,说明CPi以反向重复形式与pB7GWIWG2（Ⅱ）组合。共获得10棵T₀代转基因幼苗,经除草剂涂抹、PCR、PAT/bar转基因检测试纸检测后,6株为阳性,表明该方法可筛选出对大豆花叶病毒具有抗性的转基因大豆新种质,为SMV抗病育种工程提供良好的亲本材料。