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本研究通过反转录PCR方法克隆了巨尾桉谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase,简称GR)基因,该基因定位于巨尾桉细胞质、长度为1485 bp,在NCBI申请基因注册(GenBank Accession Number KU904639)。构建了pET-EuGR1原核表达载体,酶活检测表明转化菌株GR活性较高。利用实时定量 PCR分析巨尾桉EuGR1的时空表达特性,结果表明:EuGR1的表达量随着巨尾桉叶片的成熟而降低,在幼叶中表达量最大,近根部的叶片表达量最低;在巨尾桉组培苗中,EuGR1在茎中表达量最大,叶中表达量较低,根中表达量最低。通过转基因抗寒巨尾桉温室苗研究EuGR1基因在低温胁迫下的表达模式,发现常温和低温胁迫下耐寒性强的株系其EuGR1的表达量较高(如P40、P41、P52),耐寒性弱的株系其EuGR1的表达量较低(如P36、F44、F76),说明巨尾桉EuGR1的表达量与植株的抗寒能力具有相关性。随着低温胁迫时间的延长,EuGR1的表达量在36 h后出现降低趋势,表明EuGR1在桉树耐低温胁迫的前期发挥作用较大。 相似文献
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以5年生欧亚种"早黑宝"葡萄为试材,以冬季不埋土为对照,设置7个防寒处理:树干涂白、茎干裹黑膜、保温棉包裹、基干套白膜、保温棉覆盖、玉米秸20 cm+覆膜、铺黑地膜,研究不同防寒措施对葡萄根系附近土层温度的影响、枝条部分生理指标的变化和枝条生长情况,以期筛选出北方寒区塑料大棚内葡萄越冬最合适的防寒措施,促进葡萄种质资源的有效利用。结果表明:葡萄根际地下5 cm和20 cm处的土层温度变化强弱排序为玉米秸20 cm+覆膜、铺黑地膜保温棉覆盖对照、茎干裹黑膜、保温带包裹、树干涂白、基干套白膜;采用抗寒性隶属函数法进行综合评价,防寒效果排序为茎干裹黑膜玉米秸20 cm+覆膜、铺黑地膜保温带包裹基干裹白膜保温棉覆盖对照树干涂白;越冬后保温带包裹处理的葡萄萌芽率最高,枝条没有出现霉变现象,且萌芽整齐;综合经济成本考虑建议在北方冬季埋土区塑料大棚内以玉米秆20 cm+覆膜或铺黑地膜覆盖根系,以保温带或黑膜包裹枝条作为葡萄越冬防寒方法;露地栽培可使用保温被覆盖,具体覆盖所需厚度需依据实际各地区气候情况进一步研究。 相似文献
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建立了QuEChERS前处理的棉花叶片中吡虫啉及其代谢物含量的高效液相色谱(HPLC)分析方法。在QuEChERS前处理方法的基础上,确定了乙腈作为提取剂,盐析材料为1.00 g氯化钠、4.00 g无水硫酸镁、0.50 g柠檬酸二钠和1.00 g柠檬酸钠,净化材料为25 mg的N-丙基乙二胺(PSA),在2%乙腈-甲醇∶水=3∶7条件下HPLC法进行定量测定。结果表明:棉花叶片中的吡虫啉及其4种代谢物吡虫啉脲、烯式吡虫啉、吡虫啉胍和6-氯烟酸的平均加标回收率为92.84%~110.90%,相对标准偏差(RSD)在0.15%~6.99%之间,检出限(LOD)分别为0.0044、0.042、0.0011、0.091 mg·kg-1和0.0066 mg·kg-1,定量限(LOQ)分别为0.015、0.19、0.0059、0.036 mg·kg-1和0.028 mg·kg-1。该分析方法前处理简便、快速、准确,可为棉花叶片中吡虫啉及其代谢物残留的测定提供参考。 相似文献
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