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研究螺旋霉素生物合成基因中orf1*c的功能,优化菌株,减少出发菌株发酵液m/z为875的杂质组分。试验选取pKC1139和pSET152作为质粒载体,构建重组质粒pKC1139-orf1*c和pSET-orf1*c。然后分别对螺旋霉素工业生产菌株Streptomyce ambofaciens的orf1*c基因进行敲除和倍增,得到相应的突变株L-D-1*c和L-P1*c-7,将突变株进行发酵、生物效价测定和LC-MS检测。发现突变株L-D-1*c完全丧失了生产螺旋霉素组分的能力并产生了相应的中间产物,突变株L-P1*c-7具有有效减少m/z为875杂质组分的生产能力。通过序列比对和中间产物分析,表明基因orf1*c负责编码螺旋霉素合成中的N-二甲基转移酶,得到了初步的优化菌株L-P1*c-7。 相似文献
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