桂花OfABFs基因克隆和表达分析

【目的】研究OfABFs基因家族成员在桂花‘堰虹桂’Osmanthus fragrans ‘Yanhonggui’不同组织和花开放进程中的表达模式,筛选参与调控花开放的关键成员。【方法】在桂花基因组数据库中筛选出相关OfABFs基因序列,克隆序列全长并对其进行生物信息学分析,通过荧光定量PCR分析OfABFs基因在‘堰虹桂’不同组织及花开放进程中的时空表达模式。【结果】筛选得到5条OfABFs基因序列。生物信息学分析得出：桂花OfABFs蛋白具有亲水性,较不稳定,无信号肽段;预测其蛋白二、三级结构具有相似的特性,无规则卷曲和α-螺旋为其结构组成的主要元件;5条OfABFs转录因子均含有bZIP转录因子家族保守结构域。亚细胞定位预测表明：5条OfABFs编码蛋白均定位在细胞核。荧光定量PCR结果表明：OfABF1、OfABF2、OfABF3、OfABF4和OfABF6在桂花中的表达具有组织特异性,其中OfABF1、OfABF4和OfABF6在花中有较高表达。OfABF1在顶壳期被转录激活,表达显著升高;铃梗期后表达水平虽呈下降趋势,但仍保持较高水平。OfABF2的表达在顶壳期到达峰值,且...     

杭州市临安区不同园林植物群落抑菌作用研究

植物在园林绿化中具有非常重要的地位，不仅能美化环境，还能起到增湿、降温、减尘、抑菌等作用。近年来，随着人们对人居环境改善的关注越来越高，园林植物及其群落的抑菌作用成为了人们关注的热点。然而，鲜有研究系统地分析比较不同群落间的抑菌差异。本研究通过比较杭州市9种常见植物群落类型的携菌量，研究不同群落配植的抑菌作用，发现不同群落间的抑菌作用存在显著差异，由罗汉松、四季桂、龟甲冬青和金森女贞等乔木、灌木树种为主的人工群落的抑菌作用较强，且结构较复杂的群落抑菌作用越强，但随着群落向外辐射范围的增加，抑菌效果明显减弱。通过进一步比较分析发现，在群落边缘1.5m处，空气细菌数量显著高于群落内部，表明植物群落的抑菌作用范围有限。此外，还发现配置植物的多样性能够明显增强群落的抑菌作用，该发现可为城市绿化、园林植物配置提供理论参考，对实现生态抑菌及净化环境意义重大。     

桂花OfNCED3调控转基因烟草叶片类胡萝卜素和叶绿素的合成

从桂花（Osmanthus fragrans）‘堰虹桂’转录组数据库中筛选获得OfNCED3基因序列。氨基酸序列分析发现OfNCED3具有NCED家族特有的2个保守结构域MIAHPKxDP和HDFAITE以及4个保守的组氨酸残基。进化树分析发现OfNCED3与番茄SlNCED1聚为一支。实时荧光定量PCR结果表明，桂花开放过程中，Of NCED3在类胡萝卜素含量较高的‘堰虹桂’花瓣中的表达量显著低于类胡萝卜素含量较低的‘玉玲珑’，推测OfNCED3可能与‘堰虹桂’和‘玉玲珑’花瓣中类胡萝卜素含量差异有关。通过农杆菌介导的遗传转化方法获得过表达OfNCED3烟草株系。利用分光光度计和超高效液相（ultra high performance liquid chromatography,UPLC）测定叶绿素、类胡萝卜素和ABA的含量，并采用实时荧光定量PCR分析类胡萝卜素通路上相关基因的表达差异，结果发现异源过表达Of NCED3导致转基因烟草叶片中叶绿素和类胡萝卜素含量下降，ABA含量增加，类胡萝卜素合成基因的表达量明显上调，且下游合成基因上调幅度高于上游合成基因。本研究表明Of NCED...