川贝母组培快繁实用技术

本文介绍了川贝母组培快繁实用技术,包括外植体的选择、无菌体系的建立、培养基和激素的选择、培养条件等内容,以期为川贝母的组培快繁提供技术参考。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

云南松胚性愈伤组织诱导研究

以未成熟云南松种子为研究材料,选择合适的消毒方法,进行合子胚发育状态观测,从外植体类型、采果母树基因型、培养基种类3方面探讨其对胚性愈伤组织诱导的影响,并鉴定了胚性愈伤组织。结果表明：75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,2%氯酸钠浸泡15 min,无菌水冲洗4～5次为种子最佳消毒方案;不同外植体类型对出愈率影响不显著,但对胚性愈伤组织的形成具有极显著影响,取带胚乳的合子胚作为外植体的胚性愈伤组织诱导率可达34.3%,而合子胚作为外植体时诱导率为14.3%;采用14种培养基接种,平均诱导率在2.2%～17.6%之间,其中接种于MLV+2, 4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+肌醇 0.1 g/L,1/2LM+2, 4-D 2.2 mg/L+6-BA 1.1 mg/L +AgNO₃ 3.4 mg/L+肌醇 0.1 g/L,DCR+6-BA 0.63 mg/L +KT 0.61 mg/L+NAA 2.0 mg/L+肌醇 0.2 g/L+麦芽糖15 g/L培养基的胚性愈伤诱导率分别为17.6%、17.6%、16.5%,表明该3种培养基适合于云南松的胚性愈伤诱导;8株云南松优株未成熟带胚乳合子胚的胚性愈伤组织平均诱导率为5.1%～19.4%,最高的是076号云南松,最低的是075号云南松,表明基因型对胚性愈伤组织诱导具有极显著的影响。     

不同瓣型腾冲红花油茶的遗传多样性与遗传结构分析

采用荧光AFLP标记技术,对采集于腾冲的3个自然类型90份腾冲红花油茶样本进行遗传变异分析,结果显示：7对AFLP引物扩增出697条带,多态性条带百分率（PPB）为100%,有效等位基因数（N_e）为1.361 4,基因多样性指数（H）为0.257 6,Shannon’s信息指数（I）为0.421 5,腾冲红花油茶具有较为丰富的遗传变异。在自然类型水平上,基因多样性指数（H_nfp）和Shannon’s信息指数（I_nfp）分别介于0.241 8～0.255 8和0.395 9～0.413 2之间,遗传多样性水平为单瓣类型>半重瓣类型>重瓣类型。3个自然类型之间的遗传分化系数（G_st）为0.034 5,与AMOVA分析结果一致（Φ_st=0.056）,表明自然类型内不同个体的遗传差异是腾冲红花油茶遗传多样性的主要来源,需要对现存个体加强保护。基于Nei’s遗传距离的UPGMA聚类分析,将3个自然类型分为2个大组,其中单瓣类型独自构成一组,半重瓣类型与重瓣类型构成另一组。而基于单株之间Nei’s遗传距离的UPGMA聚类结果,将90个个体主要聚分为3个大组,较清晰地将3个自然类型分开,并表明半重瓣是单瓣和重瓣类型的过渡类型,且3种自然类型具有各自特有的遗传物质基础。因此,腾冲红花油茶划分为3种自然类型具有一定的科学性和合理性。