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NAC转录因子参与植物生长发育、果实色素积累、细胞壁形态形成和植株衰老等过程。为系统研究SNAC4(SlNAC48,基因ID:101247735)和SNAC9(SlNAC19,基因ID:101248665)在番茄成熟衰老进程中的精准功能,本试验设计SNAC4/9敲除靶点,通过重叠聚合酶链式反应(overlapping PCR)法构建单引导RNA(sgRNA)表达盒,采用金门分子克隆(golden gate)方法将单个或多个sgRNA表达盒组装至pYLCRISPR/Cas9载体。PCR和测序结果表明,SNAC4/9敲除载体构建成功,通过农杆菌转化法将编码Cas9蛋白和sgRNA的基因导入Micro-Tom番茄细胞,对阳性苗进行靶点和脱靶位点检测,结果表明番茄成功突变且未脱靶,通过鉴定T1代突变体进一步证明,CRISPR/Cas9基因编辑番茄的靶点在代际之间可以稳定遗传。与野生型相比,SNAC4/9敲除果实色素积累减少,成熟延迟,表明SNAC4/9在番茄果实成熟中发挥重要作用。本研究为进一步探究SNAC4/9调控番茄果实色素代谢和胞壁代谢机制提供了遗传材料和试验基础。 相似文献
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重组葡萄球菌肠毒素SEQ的生物活性及其结构关系分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用原核表达系统表达、亲和纯化重组蛋白、Western-blot、MTT比色法及同源模建的方法,分析了新型葡萄球菌肠毒素SEQ的生物学活性及其与结构的关系,预测了发挥超抗原活性的功能位点.结果表明,表达纯化的可溶性重组GST-SEQ、His-SEQ蛋白表达量分别占菌体蛋白的20%和25%,且均具有良好的免疫原性以及诱导小鼠脾淋巴细胞分化增殖的能力,SEQ成熟肽中α-螺旋、β-折叠、无规则蜷曲分别约32,68,116 aa;SEQ毒素潜在的与MHCⅡVβ链结合的关键位点为H169、H207、D209,而与TCR的结合域位于α3-β8环区域.2种重组SEQ肠毒素均具有超抗原活性,这与其存在于细胞MHCⅡ Vβ链及TCR作用的结合域有关. 相似文献
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提高菜子分离蛋白得率的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
针对目前菜子分离蛋白生产得率偏低的现状,通过对等电点沉淀法和饱和硫酸铵法的研究和分析,探讨了提高菜子分离蛋白各组分蛋白得率及蛋白含量的途径. 相似文献
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植物抗病反应中的信号物质 总被引:3,自引:0,他引:3
植物在受到病原物侵染时 ,常表现出一系列的防卫反应 :活性氧的释放、防卫基因的表达、过敏反应(HypersensitiveRe sponse,HR)和系统获得抗性(SystemicAc quiredResistance,SAR)等。许多研究表明 ,这些反应是由于在植物体受病原菌侵染后 ,体内产生一些信号物质 ,这些物质能够诱发以上反应的产生。早在60年代 ,Ross就假设植物体内存在一种能诱发SAR的系统性信号。80年代 ,Dean和Kue进一步证实了这个假设。近年来对植物抗病反应中信号物质的研究主要集中在一氧… 相似文献
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提高菜子分离蛋白得率的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
针对目前菜子分离蛋白生产得率偏低的现状,通过对等电点沉淀法和饱和硫酸铵法的研究和分析,探讨了提高菜子分离蛋白各组分蛋白得率及蛋白含量的途径. 相似文献