含ipt融合基因的根癌农杆菌转化大豆萌动种胚的研究─Ⅰ苗期子叶的同工酶分析

本实验以大豆萌动种胚为受体，用含有３５Ｓ启动子—Ｇｕｓ基因—ｉｐｔ基因—Ｎｏｓ基因的融合基因根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４进行转化。通过对转化及对照植株苗期子叶的过氧化物酶同工酶及酯酶同工酶分析，结果表明酶谱有明显差异，过氧化物酶同工酶有两条差异带：Ｒｆ０．５０９及Ｒｆ０．７１２；酯酶同工酶有一条差异带：Ｒｆ０．５３１。综合分析，上述三条差异带都显示的转化植株占所分析的转化植株的１４．４％。此法可作为转基因植株早期筛选的方法之一。     

新城疫病毒F48E9株NP基因的克隆与序列分析

根据NDV NP蛋白已知基因序列设计合成了一对引物，利用RT-PCR扩增出了F48E9株NP基因1598bp的片段，将该片段克隆到pMD18-T Vector上，并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定，结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子。为了更充分证实所得阳性质粒的可靠性，采用Sanger's双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定，获得了F48E9株NP基因片段的基因序列，利用DNASIS分析软件，将F48E9株与La Sota株的相应序列进行比较，其核苷酸序列同源性为88.2%。至此，我们获得了F48E9株NP基因的全长克隆。     

葡萄扦插苗三个不同部位的过氧化物酶同工酶分析

栽培葡萄近些年在我省已受到普遍重视,特别是盆栽葡萄发展迅速。有关栽培技术的书刊已经很多,但涉及葡萄遗传学方面的报道尚不多见。在同工酶分析方面,有人曾用之鉴别葡萄品种,也有人用之探讨葡萄品种间杂交的某些规律。国内这方面报道也较少。     

对TMV抗性不同番茄品种和变种的同工酶比较分析

本实验应用连续浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳和分光光度法,在普通番茄 Lycopersiconesculentum 中,对烟草花叶病毒(TMV)五个抗性不同的栽培品种和三个半栽培型变种,在被 TMV 感染后叶片中过氧化物酶同工酶和谷氨酸脱氢酶同工酶的变化,进行酶谱分析和过氧化物酶总活性的测定。结果表明,过氧化物酶对 TMV 的感染反应十分强烈,抗性和非抗性材料都有显著的活性增加,增加的幅度与材料本身对 TMV 抗性程度有密切关系,即含有抗 TMV 基因的品种和半栽培型变种过氧化物酶活性增加的幅度,明显低于敏感型品种。由此推断,过氧化物酶有可能成为衡量番茄品种,对 TMV 抗性的一个定量化指标,在筛选抗病品种中加以应用。     

含ipt融合基因的根癌农杆菌转化大豆萌动种胚的研究：Ⅰ苗期子叶的…

本实验以大豆萌动种胚为受体，用含用３５Ｓ启动子－Ｇｕｓ基因－ｉｐｔ基因－Ｎｏｓ基因的融合基因根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４进行转化。通过对转化及对照植株苗期子叶过氧化物酶同工酶及酯酶同工酶分析，结果表明酶谱有明显差异，过氧化物酶同工酶有两条差异带：Ｒｆ０．５０９及Ｒｆ０．７１２；酯酶同工酶有一条差异带：Ｒｆ０．５３１。综合分析，上述三条差异带都显示的转化植株占所分析的转化植株的１４．４％。此法可作为转基     

大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)苹果酸脱氢酶(mdh)基因的插入失活

本试验是用粘末端连接法把卡那霉素抗性基因(Kan~r)插入到大豆根瘤菌B.j110的苹果酸脱氢酶(mdh)基因中,使mdh基因失活。首先,通过EcoRI切点把Kan~r连接到pTZ18U载体上,经转化把这一重组DNA转入大肠杆菌XLI-Blue中,利用含有氨苄青霉素和卡那霉素的选择培养基选出转化菌株,提取pTZ18U-Kan~r质粒DNA;然后,用Sall分别切已克隆在pTZ19U中的B.j110mdh基因及pTZ18u-Kan~r,经粘末端连接把卡那霉素抗性基因连接到苹果酸脱氢酶基因中间,从而使其失活。再将所得到的这一重组DNA用电脉冲法(Electroporation)转入大豆根瘤菌B.j2143中,用以检验经插入失活后的苹果酸脱氢酶基因对大豆固氮作用的影响。     

转ipt基因大豆感染SMV1号的生理特性变化

本文对黑龙江省推广的三个大豆品种及它的ｉｐｔ基因株系Ｆ４,采用生化技术酶联免疫检测技术（ＥＬＩＳＡ）研究了病毒病侵染条件下,转基因植株的生化特性变化及内源激素含量及其人平衡状况的影响,实验结果表明,ＳＭＶ１号诱导条件下,转基因大豆细胞中ＭＤＡ含量减少,ＳＯＤ酶活性较强,转７ＳＬ－ｉｐｔ基因的大豆,内源激素ＩＰＡ,ＩＡＡ,ＧＡ含量明显增加,而转８ＳＬ－ｉｐｔ基因的大豆,则通过内源激素ＩＡＡ,ＡＢＡ含     

T-afp番茄的生产特性初探

通过转美洲拟鲽抗冻蛋白基因（T-afp）番茄的田间试验,探讨其生产特性,结果表明在徐州地区T-afp番茄比对照品种具有较强的抗寒性,其生长势明显增强,产量达10264.1kg/667m^2,有较高的推广应用价值。     

番茄不同生育期和不同部位过氧化物酶同工酶分析

作者通过对过氧化物酶同工酶分析,探计了番茄从芽期至采收末期的酶谱情况,实验结果表明不同生育期及植株不同部位显示的酶谱是不同的。在生育进程的转化时期,酶谱带数目多,扫描峰高;根和茎基显示的谱带数比其它部位多,特征也明显;综合观察,同工酶分析的取材以芽期为好。 用同工酶分析一代杂种,证明酶谱带的变化不受栽培条件及采种早晚的影响,因此可为签定真假杂交工作提供了一种新的方法。     

不同贮藏年限的番茄种子发芽情况及其芽期过氧化物酶同工酶酯酶同工酶分析

种子在贮藏期间,时刻都受外界环境条件的影响,超过一定的贮藏期限,终将丧失其生活力。种子生活力的降低首先反映在发芽率降低,从而降低其种用价值。这一系列生理过程,势必引起种子及发芽后体内酶系统发生变化。曾有报道,随着种子生活力的丧失,与呼吸有关的酶类,如过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶和谷氨酸脱氢酶的活性趋向降低,因而呼吸作用也随之减弱;而水解酶类,如植酸酶、蛋白酶和磷脂酶等的活性却增加[1]。看来酶生物学特性的变化可以反映种子生活力状态。本实验通过对番茄不同贮藏年限的种子发芽情况及其芽期过氧化物酶同工酶、…