欧美杨"山地1号"组织培养再生系统的建立

欧美杨“山地1号”是美洲黑杨与欧洲黑杨(P.deltoides×P.nigracv.,‘shandis1’)杂交培育成功的杨树优良品种。本研究以叶片作为外植体进行组织培养,建立了欧美杨“山地1号”组织培养再生系统。分别用植物生长调节剂α-萘乙酸(NAA)和细胞分裂素6-苄氨基嘌呤(6-BA)诱导芽的分化,促进侧芽生长;用3-吲哚丁酸(IBA)诱发根生长,使根多而长,本研究筛选出诱导率最优的培养基和激素浓度:分化培养阶段——以1/2MH培养基(6-BA0.5mg/L与NAA0.05mg/L)诱导分化获得再生芽;继代培养阶段——以MH培养基(6-BA0.5mg/L与NAA0.05mg/L)进行继代培养获得丛生芽;抽茎培养阶段——以MH培养基(6-BA0.1mg/L与NAA0.05mg/L)进行抽茎培养获得丛壮无根苗;生根培养阶段——以1/2MH培养基(IBA0.3mg/L)诱导生根。然后,选择根系发达、主茎高达2～3cm且木质化程度高的幼苗移栽到塑料大棚中,约14d后长出新根即可成活,移栽成活率达90%。本欧美杨组织培养再生系统可用于基因的遗传转化。     

应用RAPD技术对东北地区白桦种源遗传变异的分析

用随机扩增多态DNA（RAPD）分子标记方法对白桦13个种源115个个体进行了遗传变异的比较分析。通过14个随机引物扩增共检测到233个位点。各种源多态位点百分率差异明显，在20.17%-32.19%之间，多态位点百分率最高的是帽儿山种源和清源种源，最低的是绰尔种源。遗传变异在大兴安岭、小兴安岭和长白山3个区域间占23.88%，种源间遗传变异占27.99%，种源内个体间遗传变异占48.13%。根据种源间的遗传距离，构建了白桦13个种源的遗传关系聚类图，结果大兴案岭地区的白桦和源聚为一类，小兴安岭、张广才岭、完达山和长白山分布区的白桦种源聚为另一类。同时，根据地理气候因子和遗传距离对白桦13个种源进行了种源区的划分，为种子调拨提供了依据。     

白桦种源区划及优良种源的初步选择

以4个试验点7年生白桦种源试验林的树高、胸（地）径、保存率、采用方差分析及多点种源试验联合分析方法，进行差异显著性分析，结果表明：各试验点不同种源间生长性状、保存差异显著，种源与立地的交互作用达显著水平。用Tai法进行种源稳定性分析，得出栾川、黑河、帽儿山种源为稳定型种源。利用各种源的生长性状、保存率与各种源的地理气候因子做聚类分析，进行种源区划，初步划分为10个种源区。综合各种源的生长量和适应性，初步为4个试验点选择出各自的优良种源。     

大豆疫霉菌诱导的β-1,3-葡聚糖酶与寄主抗病性的关系

为明确-1,3-葡聚糖酶与大豆抗大豆疫霉根腐病的关系,分别测定了具有不同抗性的3个大豆品种的真叶和第1片复叶被大豆疫霉菌侵染后β-1,3-匍聚精酶的活性,并分析其与抗病性的关系.侵染大豆真叶和第1片复叶后备品种的β-1,3-葡聚糖酶活性均明显升高.接种大豆真叶后抗病品种48 h出现酶活性高峰,酶活性增加105.9%;中感晶种和感病品种72 h出现酶活性高峰,酶活性增加量分别为66.3%和65.7%.接种大豆复叶后酶活性的变化与真叶反应一致.说明β-1,3-葡聚糖酶的活性与大豆品种的抗病性呈正相关,抗病品种较感病品种酶活性峰值出现早,酶活性增加量高.对酶的部分性质的研究结果表明:酶的最适反应温度为55℃,最适反应pH为5.0,在55℃以下,pH 4.5～7.5范匍内酶活性较稳定.Ca2+、Mn2+、K+、Al3+对酶均有激活作用,Mg2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Fe2+、Hg2+、Ba2+对酶有抑制作用.抑菌试验表明,β-1,3-葡聚糖酶粗酶液对大豆疫霉菌的菌丝生长和游动孢子萌发有明显的抑制作用.     

外源铁蛋白基因NtFer1对粳稻生理影响的研究

[目的]验证铁蛋白基因的功能,提高转基因粳稻的含铁量和转基因粳稻对盐胁迫和生物胁迫的抗性。[方法]利用农杆菌介导法将烟草铁蛋白基因NtFer1导入粳稻基因组。[结果]对T0、T1代卡那霉素抗性植株PCR、Southern杂交、Northern杂交和RT-PCR检测分析表明,外源基因已整合到粳稻基因组中,并能够稳定遗传表达。转基因粳稻超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和叶绿素相对含量高于对照,丙二醛(MDA)含量低于对照,其根、叶片和糙米中铁含量均高于对照。接种稻瘟病病菌后转基因植株叶瘟指数低于对照。[结论]转入外源铁蛋白基因NtFer1能够提高粳稻的含铁量和转基因粳稻对盐胁迫和生物胁迫的抗性。     

SMART策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库

为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因,以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA,采用SMART(RNA转录过程中的5′末端转换机制)技术合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明:原始文库滴度为2.18×106pfu/mL,扩增后的文库滴度为5.46×109pfu/mL,重组率为96%。插入片段长度在0.5～2.0kb之间,平均长度为1.12kb,表明构建的小黑杨茎形成层cDNA文库较为理想。     

帽儿山地区21年生兴安落叶松种源试验

利用兴安落叶松自然分布区内17个种源21年生的树高、胸径、材积等生长性状及树干通直度进行方差分析，其结果是，种源间差异显著或极显著。并运用相关分析方法研究了兴安落叶松地理变异规律，结果表明：兴安落叶松的生长性状与纬度呈负相关，与经度呈正相关；呈明显的经向为主，纬向为辅，经纬双向连续渐变的特点；利用生长性状材料结合17个种源的地理集团对种源进行聚类分析，将各种源在2.7遗传距离上分成3个种源区：即大兴安岭南、西、北部种源区（编号为I）；小兴安岭北部、大兴安岭东部种源区（编号为III）；小兴安岭东南部种源区（编号为IV），用LSD法对各种源进行多重比较，结合综合指数法，确定帽儿山及其毗邻地区的最佳种源有友好和乌伊岭种源。     

黄芪种衣剂的性状测定与生理效应

针对药用植物黄芪的农艺性状和栽培中遇到的主要问题,初步开发制备了黄芪专用型种衣剂,并对其理化性能进行了测定。以不同用量(种子干质量的2%、4%、6%和8%)的黄芪种衣剂包衣为处理,以ND牌种衣剂(种子干质量的8%)包衣和空白种子为双对照,通过发芽、盆栽和大田试验研究了黄芪种衣剂的生理效应。结果表明:黄芪种衣剂的理化性状符合种衣剂的一般标准,对种子发芽安全,能够加速种子萌发,提高出苗率,增加黄芪的根茎和主根体积,从而提高主根的干物质量。     

二色补血草硫氧还蛋白过氧化物酶基因LbTPx的克隆及其表达

从二色补血草(Limonium bicolor)cDNA文库中分离出一个新的硫氧还蛋白过氧化物酶基因(LbTPx)全长cDNA序列.基因全长1016 bp,其中:5'非翻译区146 bp,3'非翻译区69 bp,开放读码框(ORF)801 bp,共编 码266个氨基酸;编码蛋白的分子质量为47.99× 10-24...