超高效液相色谱-串联质谱法测定食用菌中维生素D_2含量

采用超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLCMS/MS)技术建立食用菌中维生素D_2的测定方法;优化质谱条件中的加速电压及碰撞电压,色谱条件中的色谱柱、流动相及其比例。优化结果如下,加速电压选择120 eV,定量子离子与定性子离子的碰撞电压分别选择22 eV和12 eV,色谱柱选择ZORBAX Eclipse plus C18(2.1 mm×150 mm,3.5μm),流动相选择甲醇-水,其比例为95:5(v/v)。方法学考察结果表明,在0.1～40μg/mL浓度范围内,维生素D_2的峰面积与其浓度线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限为20.0μg/kg,定量限为60.0μg/kg;回收率为77.0%～92.5%,相对标准偏差(relative stardard deviation,RSD)为2.1%～4.9%,方法准确可靠,可满足食用菌中维生素D_2含量的测定需要。对0.5、1.0、1.5、2.0 kJ/m~2不同剂量短波紫外线照射后的双孢蘑菇(Agaricus bisporus)、糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)和香菇(Lentinus edodes)中维生素D_2的含量进行测定,结果表明4种剂量短波紫外线照射均能显著提高3种食用菌中维生素D_2的含量,在实验范围内,维生素D_2的含量随照射剂量的增加而增加。同一照射剂量处理,糙皮侧耳所含维生素D_2最多,其次为双孢蘑菇、香菇。