鹅星状病毒的分离鉴定及全基因组序列分析

2017年10月—2019年5月,本实验室从广东、四川、河北、山东、安徽、辽宁等广大养鹅地区采集了67份典型雏鹅痛风样品进行了实验室检测以及病原的分离鉴定,检测结果表明：所有样品中均检测到了鹅星状病毒,并且约有94.03%的样品为两个不同种的鹅星状病毒混合感染。病原分离结果表明：鹅星状病毒FLX株的变异株病毒（命名为SCCD）可以在鹅胚上稳定增殖,并且能稳定致死10日龄鹅胚,致病力较鹅星状病毒FLX增强;新型鹅星状病毒株（命名为SDPD）不能在鹅胚和SPF鸡胚上稳定增殖。病毒的基因组测序结果表明：鹅星状病毒FLX株与鹅星状病毒FLX的变异株病毒SCCD株、新型鹅星状病毒SDPD株全基因组核苷酸相似性分别为89.7%、58.1%,ORF1b基因氨基酸相似性分别为98.4%、61.0%,ORF2基因氨基酸相似性分别为81.0%、42.5%。将新分离的鹅星状病毒株接种1日龄健康雏鹅,结果表明,鹅星状病毒SCCD株和鹅星状病毒SDPD株虽然能使雏鹅发生死亡,引起肝炎、肾肿胀和增重减少等变化,但雏鹅均无典型痛风（脏器尿酸盐沉积）表现,而两种鹅星状病毒株混合攻毒能使44%的雏鹅发生典型痛风,并与临床发病症状一致。因此,临床上引起雏鹅痛风的病原可能是两种鹅星状病毒,即新型鹅星状病毒和鹅星状病毒FLX的变异株病毒。     

α-淀粉酶对鲜湿面条品质的影响

本课题研究不同添加量的α-淀粉酶对鲜湿面条品质的影响。试验结果表明:随着添加量的增加,鲜湿面的最佳蒸煮时间随之变短,吸水率也随之变小。α-淀粉酶的添加使鲜湿面的L*值减小,a*值减小,b*值增大。由于α-淀粉酶水解面条中的淀粉,使直链淀粉和支链淀粉的比例发生变化,从而影响了鲜湿面条的品质。     

生长期籽鹅免疫器官指数变化规律的研究

选取80只健康黑龙江籽鹅常规饲养,分别在1,10,30,60,90,120,日龄宰杀,观测免疫器官重量、指数及其变化规律。结果表明：胸腺和法氏囊的重量随籽鹅日龄的增长逐渐增加,到60日龄达到最大值后又减小;脾脏和哈德氏腺的重量120日龄时达到最大值。胸腺和法氏囊指数随晶龄的增加逐渐变小;脾脏指数30日龄达到最大值后减小;哈德氏腺指数随日龄的增加逐渐减小,90日龄减少到最低值,120日龄时又略有增长。     

RNA可视化原位杂交技术对感染细胞中猪瘟病毒RNA定位与分布

【目的】为研究CSFV RNA在体外感染细胞中的分布及定位,建立了一种准确、敏感的RNA可视化原位杂交技术。【方法】本研究通过比对GenBank公布的CSFV、BVDV和BDV全序列,避开BVDV和BDV的同源区,设计了CSFV RNA及内参基因β-actin的特异探针。以CSFV中等致病力毒株（HeBHH1/95）为参考毒株,在PK15细胞中培养病毒,加入RNA可视化原位杂交特异探针和相应试剂,采用荧光共聚焦显微镜进行成像观察。通过综合分析观测结果、荧光强度、重复性等因素,采用正交试验优化了对原位杂交过程中具有重要影响的蛋白酶K浓度和甲醛固定时间,建立了CSFV RNA可视化原位杂交技术,并与FAT方法比较该技术灵敏度;用我国目前流行的CSFV 1.1、2.1、2.2、2.3基因亚型及BVDV、PPV、PRV和PCV-2病毒进行特异性试验。最终,以CSFV强致病力毒株（SM）接种PK15细胞,病毒感染后0.5、1、3、6、8、10、14、18、24、36、48、72、96h(hours post inoculation,hpi)取样,每个时间点2个重复,采用CSFV RNA可视化原位杂交技术进行检测。为佐证病毒蛋白在细胞中的定位及分布,同时采用FAT方法对SM株E2蛋白在PK15细胞中的表达情况进行动态研究。【结果】采用该技术在荧光共聚焦显微镜下可观察到CSFV RNA在细胞中的定位;当蛋白酶K浓度为1:1 000、甲醛固定时间为30min时为最优反应条件;灵敏度试验表明该技术对病毒的检测极限为10-8/200μL,比FAT高3.5个数量级;特异性试验结果显示该探针能与CSFV 1.1、2.1、2.2、2.3亚型结合,与BVDV、PPV、PCV-2、PRV无交叉反应。采用该技术对CSFV RNA感染后在靶细胞中的定位与分布研究结果显示:0.5hpi在胞核和胞浆均能检测到RNA,0.5-6hpi RNA主要分布于胞核内并在核内富集;10hpi胞浆内RNA逐渐增多,胞核内RNA逐渐减少,24hpi RNA主要集中在胞浆内细胞核周围;36hpi核外RNA大量聚集增多,72hpi达到峰值;96hpi RNA总量有所下降。而FAT结果显示：8hpi在少数细胞的胞浆内检测到病毒E2蛋白,10-24hpi蛋白表达数量一直较少;36hpi蛋白表达量不断增多,72hpi到最大值;96hpi荧光信号由强变弱。病毒蛋白在细胞浆内的聚集数量与细胞浆中RNA含量成正相关。【结论】首次建立了CSFV RNA可视化原位杂交检测技术,并对CSFV强致病力毒株在细胞中的RNA定位分布进行了研究,发现病毒RNA吸附和进入靶细胞的时间早于0.5hpi,观察到CSFV RNA有在细胞核内的生活史。     

黄颡鱼高效人工繁殖技术

以人工饲养的2、3冬龄黄颡鱼为研究对象,进行4批次的人工催产和孵化试验。催产雌亲鱼5960尾,平均体重120.6～148.2g,雄亲鱼350尾,平均体重278.6～310.5g。催产药物为LHRH-A2、DOM和HCG合剂。亲鱼注射后放入水泥池暂养,到达效应时间时实施人工采卵、采精液和人工授精,受精卵脱黏后用孵化桶孵化。雌雄亲鱼为20∶1。共收获受精卵4389.6万粒,孵出水花鱼苗3774.2万尾。平均催产率和受精率达到94.6%和84.1%,每尾雌亲鱼平均产受精卵约0.74万粒,孵化出鱼苗约0.63万尾。结果表明,该方法操作简便,亲鱼产卵率、受精卵孵化率和出苗率均较高,同时,节省人力、物力和空间,可大大提高黄颡鱼人工繁殖生产效率。     

水分胁迫与小麦产量性状及籽粒容重的关联度研究

本研究利用相关性分析及灰色关联度分析法,对10个小麦新品种的产量、容重等7个主要性状进行了分析,结果表明：相关性分析结果显示小麦产量性状及容重受水分的影响不同的性状表现不同幅度的减小,灰色关联度结果表明水旱地条件下各性状对单株产量及容重的关联度大小并不一致,各性状对单株产量及容重的关联度大小不同。在沧州地区选择小麦品种时品种的分蘖力和成穗率是首要考虑的条件,穗粒数也要兼顾考虑,小麦籽粒产量及小麦籽粒容重是比较复杂的综合性状,由许多因素相互结合、互相作用。因此,应用灰色关联度分析方法评价性状间的影响程度是客观可行的,可用于今后的育种实践中。     

鱼在长期嗅觉缺失时的味觉选择

已确定,长期嗅觉缺失(鲤鱼Cyprinus carpio-12个月,鱼Phoxinus phoxinus-11个月)不会使鱼对游离氨基酸(L-立体异构体)的味觉选择及对其敏感水平发生重大改变。在未处理的鱼和嗅觉被毁的鱼中,在气味上最有吸引力的氨基酸谱(鲤鱼-半胱氨酸、谷氨酸和脯氨酸;鱼-丙氨酸)及阈浓度值一致。未处理的鱼和嗅觉缺失的鱼对试验琼脂饵料表现出的行为反应有差异。未处理的鲤鱼平均再次捕捉饵料(咬饵)的次数较多,含在口腔中(持饵)的时间也较长。在吞咽或最终拒绝之前,第一次咬饵时持饵时间的差异较小。结论是:由于长期嗅觉缺失,鱼类味觉系统中正在发育的代偿过程不会改变味觉感受的基本特性,说明味觉感受及其机能参数稳定。     

间歇光照对肉鸡生长及饲料转化率的影响

间歇光照对肉鸡生长及饲料转化率的影响北京大发正大有限公司（１００１０１）张勇，张玉杰近１０年来，我国的肉鸡事业发展很快，但如何提高饲料转化率和成活率仍是人们十分关注的问题．饲料成本占总成本的６０％～７０％，所以提高饲料转化率是降低成本的关键，成活率是...     

磐石市农发行积极开展文明创建活动

几年来，磐石市农发行积极落实精神文明创建部署，认真组织开展帮扶活动。 一、参与泥草房改造工程 磐石市烟简山镇南岗村的姜增让、潘同业二人是磐石农发行的帮扶对象。     

大豆大面积喷灌效果

大豆大面积喷灌效果中国人民解放军８１３８９部队农场王贵五大连池市农业技术推广中心姚卫华绥化市国家大型商品粮生产基地建设办公室１５２０５４曲英斌张庆武王春清姜科张玉杰一、基本情况绥化市国家大型商品粮生产基地建设项目区，设在绥东兴福乡的三个村。该乡地理座...