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Dip法获得转反义磷脂酶Dγ( PLDγ)基因拟南芥植株 总被引:12,自引:0,他引:12
在含反义PLDγ基因的质粒根癌农杆菌的介导下,以生长到初果期的健壮拟南芥植株为转基因材料,用Dip法进行转基因实验,对影响转化率的浸染条件进行了比较研究。适宜的转化条件是将拟南芥的整个花序浸泡于农杆菌悬浮液中(含5%蔗糖,0.04%吐温—80),每次浸染10min,间隔3天浸染一次,共浸染3次。每次浸染后将植株横放于暗箱中24h,再置于22—24℃的光照下正常生长。待种子收获后在含有卡那霉素70mg/L的选择培养基中选择转化植株。PCR及PCR—Southem blot分析检测,该方法的转化率每100粒种子可高达2%。 相似文献
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