小麦天然钙调素抗体制备及酶标免疫组化定位

以小麦不修饰的天然钙调素(CaM)制备抗体.免疫学特性分析表明,小麦CaM抗体不能与牛脑CaM发生交叉反应,而可与多种植物CaM发生良好的交叉反应,即所得抗体对多种植物CaM是专一的.酶标免疫组化法在烟草愈伤组织细胞定位表明,细胞质CaM含量较高;在细胞核中,特别是核仁中亦含有CaM.     

水稻高效RNA干涉体系的建立及其在受体激酶基因功能研究中的应用

利用RNA干涉(RNAi)技术，可以特异性的抑制真核生物体中目标基因的表达。本研究构建了适合水稻转化的RNAi诱导载体pCADS1341。为检测其有效性，使用它构建了针对GUS基因的RNAi载体，并利用基因枪转化法导入GUS基因稳定表达的转基因水稻愈伤组织。GUS染色分析结果表明该载体中RNAi诱导元件的瞬时表达可显著抑制GUS基因的表达。为探讨影响水稻中转基因诱导的RNAi效率的因素，对针对某个目标水稻基因的水稻RNAi植株进行了详细的分析。通过Southern和Northern杂交检测了T0代RNAi植株中T-DNA插入的拷贝数和目标基因的表达量，筛选出T-DNA为单拷贝插入，且目标基因的表达被高效抑制的株系。对来源于该株系的T1代植株进行了半定量RT-PCR检测，结果表明RNAi效应可以遗传给后代转基因水稻植株，但是不同个体中的RNAi效率存在差异。RNAi系统的表达量可能是决定RNAi效率的最关键因素。我们建立的高效RNAi技术体系对于水稻功能基因组学研究具有重要意义，利用这个系统我们已经构建了60多个水稻受体激酶基因的RNAi载体，系统的研究正在进行中。     

糖氮比在小麦植株营养诊断中的运用

目前,小麦植株的营养化学诊断主要是测定无机态营养(硝态氮,无机磷、钾)。我们在诊断实践中体会到:单独的氮素营养指标,不仅难以说明苗情壮弱,而且对判断植株体内氮营养水平本身也是不够的。自1974年以来,我们应用糖氮比在小麦上进行无机—有机营养化学诊断的研究工作。测定方法是采取压汁稀释法制取待测液(稀释20—40倍),在白磁板上进行点滴测定,临时制作标准色阶进行比色。硝态氮用硝酸试粉法。可溶性糖测定用0.2%葸酮硫酸试剂比色法:取一滴待测液或标准液于穴中加5滴葸酮     

乙烯在植物中的信号转导

乙烯是所有植物激素中结构最简单的一种,它对植物的代谢调节可贯串其整个生活周期.作为信号物质,它的生物合成主要由ACC合成酶和ACC氧化酶调控.通过对拟南芥中一系列乙烯反应的突变体的分析,人们掌握了很多在乙烯信号转导中发挥作用的生化组分.乙烯受体与细菌的双组分调节系统结构相似,乙烯与之结合后,调节与Raf激酶极为相似的CTR1,进而将信号传递给下游的EIN2.EIN3是一个转录因子,可结合到与乙烯反应相关的基因的启动子的特殊序列上,激活这些基因并使其转录,从而使植株出现与乙烯反应相关的诸多表型特征.