双亲灭活原生质体融合技术在草菇耐低温菌株选育上的应用

为了选育耐低温草菇菌株,以草菇V23、V3552为亲本,采用酶解法制备原生质体,用紫外诱变、化学诱变两种方法对草菇菌株进行诱变,筛选到耐低温的突变株;然后利用紫外灭活（20 W,30 cm,110 s）和热灭活（50℃ 3 min）的双亲灭活标记法对突变株进行化学融合,结果表明在400 g/L的PEG6000、pH 8.0、融合时间30 min和融合温度32℃的条件下融合率最高,达到0.517%, 共获得200个融合子。经过0℃低温筛选,最终获得15株草菇耐低温菌株,菌丝在0℃的耐冻能力提高了4.5倍。经出菇实验证明其子实体与出发菌株相比具有明显的耐低温性,液化现象明显推迟,说明该方法筛选出的菌株具有进一步应用开发的价值。     

食品级枯草芽孢杆菌表达系统的最新研究进展

综述了枯草芽孢杆菌表达系统的特点、载体及其元件、转化方法及外源基因表达和蛋白分泌机理等方面的基础研究和最新进展。     

应用乳酸脱氢酶释放法研究黄芪多糖对雏鸡外周血中自然杀伤细胞活性…

将１０８羽１日龄伊莎系蛋用公雏均分为三组，一组为对照组，其余两组在雏鸡３日龄时，于背侧颈部皮下分别注射不同剂量的黄芪多糖注射液１次，再分别于雏鸡７、２１、３５、４９日龄时采用乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放法测定雏鸡外周血中自然杀伤细胞（ＮＫ）活力的动态变化。注射剂量０．４ｍｌ／羽能极显著（Ｐ〈０．０１）地提高３５日龄雏鸡ＮＫ活力，０．２ｍｌ／羽能显著（Ｐ〈０．０５）提高３５日龄雏ＮＫ活力。结果表明，黄芪     

普通羊肚菌密码子偏好性分析

采用CodonW1.4.2软件和CUSP程序,以普通羊肚菌(Morchella conica)全基因组蛋白质编码序列(coding sequence,CDS)为对象,解析了该菌的有效密码子数(effective number of codon,ENC)、密码子3个位点的 GC含量、相对同义密码子使用度(relative synonymous codon usage,RSCU)和高表达优越密码子。结果表明：普通羊肚菌全基因组密码子第2位密码子的 GC含量明显低于第1位和第3位,第3位密码子与第1位含量差异不大,分别为57.8%和56.8%,RSCU 值大于等于1的密码子总共35个,其中以 G 或 C 结尾的25个,占71.4%,确定了25个高表达优越密码子。     

氰基类拟除虫菊酯类农药检测研究进展

主要综述了近年来国内外关于检测氰基类拟除虫菊酯类农药残留的现状和检测方法的研究进展,并对其优缺点进行了讨论和分析。     

黄芪多糖对雏鸡外周血中NK细胞活性的影响

黄芪多糖对雏鸡外周血中ＮＫ细胞活性的影响唐雪明刘家国宋大鲁（南京农业大学动物医学院，２１００９５）黄芪是中兽医常用的扶正药物，可“补益元气而托毒”［１］，现代研究还证实了，黄芪可以调节机体免疫功能，在人医临床上常用于抗肿瘤、消除慢性炎症［２］［３］。...     

青稞慢消化淀粉酶法制备技术研究

为了探索酶解处理对青稞慢消化淀粉含量的影响,以青稞淀粉为原料,分别以α-淀粉酶法,β-淀粉酶法,转葡糖苷酶协同α-淀粉酶处理法,转葡糖苷酶协同β-淀粉酶处理法等4种方法制备慢消化淀粉(SDS),通过单因素试验和正交试验确定最佳制备方案。结果表明,制备SDS的最佳方法为转葡糖苷酶协同β-淀粉酶处理法,具体处理条件为:β-淀粉酶的添加量0.032%,转葡糖苷酶的添加量0.192%,酶解时间8h,冷藏回生时间5d,淀粉乳浓度15%。此条件下制备的SDS含量为32.53%。本研究结果为青稞慢性消化淀粉产品的开发利用提供了科学依据和技术参考。     

黄芪多糖对雏鸡外周血T淋巴细胞转化功能的影响

将１０８只１日龄伊莎系蛋用公雏均分为３组：一组为对照,其余２组在３日龄时,于背侧颈部皮下分别注射０．２、０．４ｍＬ黄芪多糖注射液（０．０１ｇ／ｍＬ）１次,再分别于７、２１、３５、４９日龄时采用ＭＴＴ比色法及微量全血培养３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测外周血Ｔ淋巴细胞转化率的动态变化。结果表明,黄芪多糖对２１、３５日龄雏鸡Ｔ淋巴细胞转化功能有增强作用,且与剂量有相关性,而对７、４９日龄雏鸡的作用不明显。ＭＴＴ比色法与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法的检测结果无显著差异（Ｐ＜０．０５）。     

基于RPA技术对转CP4-EPSPS基因产品的快速检测

核酸检测在农产品安全检测中的应用十分广泛,随着转基因作物的商业化种植,迫切需要一种快速、特异、灵敏的转基因作物检测方法。利用重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification,RPA）技术对含有转基因产品及其制品中CP4-EPSPS基因进行检测,共设计5对引物来筛取最佳引物,并对反应体系和反应温度进行优化。结果表明,该方法采用20 μL体系在37 ℃恒温反应15 min即可对CP4-EPSPS基因进行快速检测。该方法检测转基因的灵敏度阈值为45拷贝,灵敏度高、特异性强,为大规模筛查CP4-EPSPS基因提供了一种新的途径。     

同步检测动物源性成分的五重PCR的条件优化和检出限分析

为获得肉制品中牛、羊、猪、鸡、鸭等动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用5对牛、羊、猪、鸭和鸡等动物源性成分特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组),对多重PCR反应条件引物浓度和退火温度进行优化,并确定该检测方法的检出限。结果表明,多重PCR方法最佳反应条件为鸭源特异性引物浓度0.12μmol·L~(-1),鸡源特异性引物浓度0.16μmol·L~(-1),猪源特异性引物浓度0.16μmol·L~(-1),羊源特异性引物浓度0.32μmol·L~(-1),牛源特异性引物浓度0.24μmol·L~(-1),退火温度58℃,d NTPs浓度0.20 mmol·L~(-1),Taq DNA聚合酶添加量5 U,循环次数40。在最佳反应条件下,所建立的牛、羊、猪、鸡和鸭等5种动物源性成分多重PCR的g DNA检出限达到20 pg。应用优化后的多重PCR方法对21份市售肉制品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性,结果与现行标准的检测结果一致,掺假率达42.86%。本试验结果为肉制品中该5种动物源性成分的快速检测提供了技术支撑。