一种快速简便检测马铃薯病毒的方法——病毒细菌协同凝集法(VBA)的研究

 在国内、外首次选用金黄色葡萄球菌(Staphylococc aureus)的No.180菌株用于病毒细菌协同凝集试验(Virobacterial agglutination test简称VBA)检测了来自马铃薯的4种不同形态粒子的病毒:马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯丫病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和马铃薯卷叶病毒(PLRV),其灵敏度达2.7~6.1ng/ml,检出病汁液的最大稀释度达10⁴~10⁵(PLRV1:500),较国内、外采用的Cown I菌株的灵敏度提高5~10倍。与血清学方法相比,VBA在2~3分种内就可获得结果,无假阳性反应,其灵敏度显著高于间接酶联法和免疫电镜,而接近于A蛋白酶联法。经抗血清致敏的菌体在4℃下保存4个月,对VBA检测的灵敏度没有影响。用VBA对采自田间的93个马铃薯病样进行检测,它们大多受2~3种病毒(PVX、PVY及PLRV)的复合侵染;和用间接酶联法及鉴别寄主检测的结果趋向一致。室内和田间试验均表明VBA灵敏度高、特异性强、快速简便和经济,尤其适合在基层单位中推广应用。     

一种快速简便检测马铃薯病毒的方法——病毒细菌协同凝集法(VBA)的研究

在国内、外首次选用金黄色葡萄球菌(Staphylococc aureus)的No.180菌株用于病毒细菌协同凝集试验(Virobacterial agglutination test简称VBA)检测了来自马铃薯的4种不同形态粒子的病毒:马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯丫病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和马铃薯卷叶病毒(PLRV),其灵敏度达2.7～6.1ng/ml,检出病汁液的最大稀释度达10~4～10~5(PLRV1:500),较国内、外采用的Cown I菌株的灵敏度提高5～10倍。与血清学方法相比,VBA在2～3分种内就可获得结果,无假阳性反应,其灵敏度显著高于间接酶联法和免疫电镜,而接近于A蛋白酶联法。经抗血清致敏的菌体在4℃下保存4个月,对VBA检测的灵敏度没有影响。用VBA对采自田间的93个马铃薯病样进行检测,它们大多受2～3种病毒(PVX、PVY及PLRV)的复合侵染;和用间接酶联法及鉴别寄主检测的结果趋向一致。室内和田间试验均表明VBA灵敏度高、特异性强、快速简便和经济,尤其适合在基层单位中推广应用。     

病毒细菌协同凝集试验在蔬菜病毒检测中的应用

在蔬菜病毒病的病毒细菌协同凝集试验（简称ＶＢＡ法）中,首次比较了金黄色葡萄球菌Ｃｏｍｎ１和Ｎｏ．１８００菌株对ＶＢＡ灵敏度的影响,结果表明用Ｎｏ．１８００菌株代替国内、外通用的Ｃｏｍｎ１菌株,ＶＢＡ检测ＴｏＭＶ、ＣＭＶ和ＰＶＸ纯病毒的灵敏度提高了２～１０倍,达３．４～１３．０ｎｇ／ｍＬ,检出病汁液的最大稀释度达１０３～１０５,其灵敏度接近于Ａ蛋白酶联法。在此基础上,又将经抗血清致敏的金黄色葡萄球菌液体免疫剂冷冻干燥,制成一种新型的固体免疫剂,可在４℃下保存;在－１０℃贮藏１年后,用ＶＢＡ法检测ＴｏＭＶ、ＣＭＶ和ＰＶＸ纯病毒的灵敏度分别为８１、２０５和２１０ｎｇ／ｍＬ;即使在１５℃下贮藏１年,灵敏度仍高达２～６μｇ／ｍＬ;在２５℃下贮藏３个月,还有一定的效价。而液体免疫剂不能在１５℃下贮藏;在４℃下贮藏１０个月即失效。因此,固体免疫剂既保持了原液体免疫剂灵敏度高、特异性强、快速简便和经济的特点,又增加了耐贮藏的优点,更加适合在基层单位推广使用。