AFLP在畜禽遗传育种中的应用研究进展

扩增片段长度多态性(AFLP)是一种新的分子标记技术,它是在RFLP和RAPD结合的基础上发展起来的,在动植物基因组研究中有着广泛的应用。阐述了AFLP在畜禽遗传多样性、遗传图谱构建、品种(品系)的鉴定与保护、新基因的发现和DNA甲基化等遗传育种研究中的进展。     

蛋壳质量变异的主成分分析

对蛋壳质量的影响因素进行了主成分分析。结果表明：第一主成分为综合因子，反应了三类影响因素对蛋壳质量变异的作用权重，是影响因素的普遍度量；第二主成分为遗传因子，反应了个体蛋壳质量的选择潜力，是一个较大实用价值的指标；两者的累积贡献率达９６．３３８％。研究结果说明遗传因素是蛋壳质量变异的重要来源，为寻抠蛋壳质量的分子标记提供了理论依据。     

母猪FSHβ基因多态与乳头数的关系研究

用PCR SSCP法对 152头姜曲海母猪的FSHβ基因进行了分型 ,分析了NN、Nn和nn 3种不同基因型母猪的乳头数差异。结果表明 ,NN、Nn和nn基因型母猪的左乳头数分别为 8 733± 0 743 ,9 182± 0 72 4和 9 2 0 0± 0 756 ,右乳头数分别为 9 0 33± 0 850 ,9 2 0 0± 0 931和 9 30 0± 0 971,总乳头数分别为 17 766± 1 0 82 ,18 382± 1 0 98和 18 50 0± 1 177,Nn基因型母猪中左右乳头数不对称个体比例明显高于另外 2种基因型的比例。另外 ,对于以上 3性状 ,n基因的加性替代效应值分别为 0 2 4 8(P <0 0 5) ,0 183 (P <0 0 1)和 0 4 16 (P <0 0 5) ,左乳头数和总乳头数的显性效应值分别为 0 2 16(P <0 0 1)和 0 2 4 8(P <0 0 1)。结果说明FSHβ基因对乳头数的影响符合加性 显性遗传模式     

显微注射Ca^2＋激活小鼠M Ⅱ期卵母细胞

胞质内显微注入Ｃａ＾２＋可以激活小鼠Ｍ Ⅱ期卵母细胞，且随着卵龄的增加，激活率明显升高。卵龄小于１６ｈ（ｈＣＧ注射后）注射Ｃａ＾２＋引起的激活率很低，卵龄超过１８ｈ，激活率达到５０％以上。卵龄小于１６ｈ的卵母细胞，卵内注入超纯水未能激活卵母细胞，而在１８￣１９ｈ卵龄组，注射水的对照组激活率为３５％，但显著或极显著地低于注射Ｃａ＾２＋的试验组。激活前注射ＥＤＴＡ卵母细胞的激活率约为３０％，激活后注射     

经改造的猪IGF-I基因在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达

采用酵母偏爱密码子合成五条编码猪IGF-I基因的引物，利用重叠PCR技术拼接获得长度为210bp的猪IGF-I成熟蛋白基因。将该基因插入分泌表达载体pPIC9K中，转化巴斯德毕赤酵母菌。经表型鉴定、PCR分析及G418筛选得到Muts型多拷贝整合菌，以1.5%甲醇诱导培养后，经SDS-PAGE检测表达产物，在7.5 kDa处出现一特异蛋白条带，目的蛋白表达量达410mg/L。Dot blot检测表明，重组蛋白可与抗IGF-I多克隆抗体反应。     

猪卵泡卵母细胞体外受精研究

采用３种获能方法（常规获能法、肝索获能法、钙离子载体获能法）进行猪冷冻附睾精子的体外获能研究，其相应的受精率分别为４２．５％，３２．０％，３０．８％，卵裂率分别为１８．６％，１５．７％，１６．１％。受精率、卵裂率间均无显著差异。精子与ＳＭＴ－ＰＧＨ基因质粒混合培养后引起卵裂率下降，实验组的卵裂率（７．５％）显著地低于对照组的水平（２１．０％）．３９℃与３７℃下受精，其受精率分别为３８．８％。１８．７％；多精受精率分别为８９％，３０．７％；卵裂率分别为２６．９％，３．７％，３９℃组的受用率、卵裂率均显著高于３７℃组水平，而多精受精率则极显著地低于３７℃组。发育培养液Ａ液、Ｂ液中的卵裂率分别为２４．３％，１３．０％，两者无差异。在兔输卵管内培养猪体外受精卵，卵裂率为４６．７％，极显著地高于对照组水平（１０．９％）．受精卵体外培养１６～１７ｈ后离心，可观察到１８．４％的原核形成率，这与受精卵体外培养的卵裂率（１９．５％）相当。     

米猪与大白猪、长白猪FSHβ基因多态性分布差异分析

采用PCR方法对FSHβ基因在中国地方猪种米猪和外种猪大白、长白这2种群体共193头母猪中的多态性分布进行分析。结果显示:2群体均有2个等位基因A和B,3个基因型AA、AB和BB。米猪各种基因型数量AA型>AB型>BB型,AA型为其优势基因型,等位基因A、B的频率分别为0.841 5、0.158 5。外种猪BB型>AB型>AA型,BB型为其优势基因型,等位基因A、B的频率分别为0.108 1、0.891 9。由此可见,中国地方猪种米猪与外种猪长白猪和大白猪的FSHβ基因多态性分布上有显著差异。     

H2A.X在不同时期小鼠原始生殖细胞核质区分布

以小鼠为研究对象,研究H2A.X在不同时期原始生殖细胞(PGCs)核质区的分布。结果表明:PGCs在迁移过程中,8.5、10.5、11.5dpc时H2A.X在PGCs细胞核和细胞质中呈弥散分布;13.5dpc时H2A.X在PGCs细胞核和细胞质中均有分布,但雌性小鼠PGCs中H2A.X主要集中于细胞核,而雄性主要集中于细胞质。结果提示H2A.X在PGCs中的表达可能与其性别分化后精原细胞和卵母细胞的细胞周期维持密不可分。     

RNA干扰在动物生殖生物学研究中的应用

RNA干扰(RNAi)是指双链RNA(dsRNA)分子在mRNA水平抑制相应基因的表达或使其沉默的过程,是一种序列特异性的转录后基因沉默。到目前为止,已经有很多试验证明RNAi作为一种基因功能研究的新手段,在哺乳动物卵母细胞及早期胚胎发育相关研究中发挥了极其高效的作用。本文综述了RNAi在哺乳动物生殖生物学研究中的应用进展。