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本研究合成了两个成熟人IL-6cDNA引物,采用PCR法扩增出了成熟人IL-6基因片段,并在其5'端加入了一个EcoRI部位和ATG,3'端加入了一个BamHI部位和TAA。利用pBV220质粒构建成功了pBV220IL-6表达载体。将重组质粒导入E.coliDH5a中,经30℃扩增的42℃诱导,表达出了分子量为21000的预期蛋白。经SDS-PAGE分析与溥层证明具有明显的IL-6活性。实验还对 相似文献
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本研究合成了两个成熟人IL-6cDNA引物.采用PCR法扩增出了成熟人IL-6基因片段,并在其5’端加入了一个Eeo RI部位和ATG,3’端加入了一个Bam HI部位和TAA.利用pBV220质粒构建成功了pBV220 IL-6表达载体.将该重组质粒导入E.coli DH5α中,经30℃扩增和42℃诱导,表达出了分子量为21000的预期蛋白.经SDS-PAGE分析与薄层扫描测定,重组IL-6的含量约占全菌体总蛋白的27%以上.菌体裂解液用7TD_1细胞测定,证明具有明显的IL-6活性.实验还对工程菌的IL-6表达动态和包涵体提取进行了研究,从而为工程菌发酵与IL-6纯化提供了工作基础. 相似文献
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