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设计特异引物,采用RT—PCR技术,成功从本实验室分离、保存的H6N禽流感病毒毒株(HB2002)中克隆到血凝素基因(HA)序列,该克隆基因全长1714hp,提交GenBank,获得登录号DQ285546。同部分H6,H5,H7,H9亚型禽流感病毒HA基因序列分析表明,该基因核酸、氨基酸序列与A/duck/Hainan/4/2004(H6N2),A/duck/HongKong/3600/99(H6N2)毒株有99%的相似性;分子进化分析结果显示,该基因与此2毒株亲缘关系最近。由该克隆核酸序列推导的HA蛋白共566个氨基酸,该蛋白同其他H6亚型AIV的HA蛋白有相同裂解位点序列即PQIETR↓G,无高致病性毒株典型的裂解位点特征,因此,初步判定毒株HB2002为低致病性禽流感病毒. 相似文献
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多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
参考H1-H15亚型禽流感病毒(AIV)的核蛋白(NP)基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素(HA)基因,共设计4对引物,建立了2对引物扩增AIV的NP、HA基因的多重RT-PCR方法.应用此法分别对H5、H6、H9亚型AIV尿囊液RT-PCR,电泳,回收预期片段进行测序,并同Genebank的注册序列进行同源性分析.也对NDV、IBV、IBDV尿囊液以及3种亚型AIV尿囊液的2倍系列稀释样品进行检测.结果表明,3种亚型AIv尿囊液均出现2条特异性条带,经测序确证为目的扩增片段,BLAST的同源性初步判断3种AIV的亚型为H5N1、H6N2、H9N20对NDV、IBV、IBDV的RNA扩增未见2条目的条带,判断为阴性,说明该法特异性强:能对3种亚型AIV尿囊液64~128倍稀释的样品检测出AIV,表明其灵敏度高.该检测法检测的整个过程仅需4h,实现了AIV的快速检测. 相似文献
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猪的繁殖调控技术对于提高种猪的繁殖效率,进而提高养猪场总体生产效率和经济效益具有重要意义。近年来国内外在这方面取得了一系列令人瞩目的进展。目前技术比较成熟且实用意义较大的有发情排卵调控、定时分娩、早期孕检、提高窝产仔数和频密产仔等方面的技术。为了尽快将这些技术应用于生产,促进养猪业的发展,本刊特邀请湖北省农业科学院畜牧兽医研究所魏庆信研究员,将这方面的技术进展分四个部分进行讲座,供广大养猪户和各类养猪场的技术人员、管理人员和饲养人员参考。各地可根据自己的实际情况,因地制宜地使用,并不断总结经验,有所提高。 相似文献
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为了探讨在自体移植的情况下,每头受体移入的微注射基因胚胎的数量对猪基因导入总效率的影响,在导入PEFhDAF(Humandecayacceleratingfactor,人类补体衰减加速因子)基因的实验过程中,将受体母猪按称入胚数分成三组:第一组12~15枚,第二组16~20枚,第三组21~32枚,其受孕率分别为80%,90.9%,和70%,三组之间的差异不显著(P〉0.05);共产仔率分别为19. 相似文献
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转人MCP和CD59双基因小鼠的制备 总被引:4,自引:0,他引:4
采用显微混合注射的方法制备转人MCP(膜辅因子蛋白)和CD59(膜反应性溶解抑制物)双基因小鼠,共注射478枚受精卵,移植于21只受体,其中14只受孕,8只受孕小鼠中途流产,从6只受孕小鼠获得18只仔鼠,经检测,其中9只仔鼠单基因阳性(50%),6只仔鼠双基因阳性(33.3%)。结果表明:通过显微混合注射的方法可以获得转人MCP和CD59双基因小鼠。 相似文献
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乌骨鸡是原产中国的观赏和药用珍禽 ,在中国的饲养历史悠久。金水乌鸡是湖北省农业科学院以江西泰和鸡为主 ,按照白羽丝毛乌骨鸡的十大特征 ,进行闭锁性继代选育获得的一个特有品种。卵清白蛋白是鸡蛋中蛋白质的主要成分 (占总蛋白的 5 4 % ) [1 ] ,其合成与分泌严格地受激素包括雌激素和孕酮的调节[2 ] 。目前 ,鸡卵清白蛋白的基因结构及功能已较为清楚 ,为 7个外显子的分离基因[3] ,转录后经内含子的切除 ,连接成为成熟的mRNA。由于卵清白蛋白基因只在输卵管细胞中表达 ,因此 ,该基因在输卵管蛋白质合成与分泌中具有主要的调控作用。… 相似文献
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采用外周血淋巴细胞培养技术,硝酸银银染法研究转基因猪的染色体银染核仁组织区(Ag-NOR)。结果表明:由湖北白猪V系经基因转移形成的转基因猪(以后简称转基因猪)与湖北自猪IV系普通猪(以后简称普通猪)银染点的数目和大小在个体、细胞、染色体水平上具有多态性,Ag-NOR位于第8号和第10号染色体的次缢痕区;不同个体的Ag-NOR数不同,转基因猪平均每个细胞有二个银染点,普通猪平均每个细胞有三个银染点 相似文献