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为了研究禽多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白A(Omp A)的免疫原性,根据C48-1菌株Omp A基因序列设计一对特异性引物,采用PCR方法扩增去信号肽的成熟Omp A基因.将去信号肽的成熟Omp A基因扩增片段双酶切后,克隆到p GEX-6p-1表达载体中,构建重组表达质粒p GEX-Omp A,转化宿主菌BL21并经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.SDS-PAGE的结果显示,融合蛋白GST-Omp A大小约为63 ku,与预期的分子质量相符.免疫印迹分析结果表明,该融合蛋白与鸡抗Pm血清具有明显的免疫反应,说明Omp A具有良好的抗原性,这为禽Pm Omp A在免疫防御研究中的应用奠定了基础. 相似文献
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2008年3月份,江苏省句容市天王镇一养鸭场饲养的8 000只10日龄樱桃谷肉鸭发病.病鸭精神沉郁,羽毛蓬乱,食欲下降,有的站立不稳,表现神经症状,排绿色粪便,发病率达到80%左右,每天死亡超过500只.解剖死亡鸭可见严重的心包炎、气囊炎和肝周炎,对病死鸭通过无菌采集病料进行细菌分离得到1株细菌,经分离培养、染色镜检和生化特性鉴定确定该菌为鸭疫里默杆菌.经玻片凝集试验证明该鸭疫里默杆菌分离株的血清型为XV型.通过药敏试验选择敏感药物进行了及时治疗,有效地控制了疫情的蔓延,现报道如下. 相似文献
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为了解国内禽多杀性巴氏杆菌流行株(Pasteurella multocida,Pm)OmpA基因的变异情况,参考GenBank中已发表的多杀性巴氏杆菌序列设计一对特异性引物,采用PCR方法对11个禽Pm菌株和3个荚膜型参考株(A,B,D)的OmpA基因进行扩增,将各菌株纯化回收的扩增产物与pMD18-T载体连接,筛选阳性克隆进行测序。结果表明:14个菌株的OmpA基因开放阅读框在1 047~1 077 bp之间,其中长度为1 062 bp的有9个菌株;Signal IP 4.0预测表明,信号肽均为N端21个氨基酸残基,成熟蛋白氨基酸残基数量在327~332之间,推测的分子量为35.19~36.35 kD。与GenBank中12个菌株OmpA基因核苷酸序列比对及遗传进化分析发现,核苷酸同源性为85.3%~100%;氨基酸同源性为83.1%~100%;其中C48-1,1010,9003,890920,921012,xj等6个国内禽Pm分离株OmpA序列同源性为100%。由此可见国内禽Pm菌株OmpA基因非常保守。 相似文献
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鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的高度接触性传染病,给养殖生产造成巨大的经济损失。近年来随着反向遗传操作技术的发展,国内外学者在分子生物学水平对IBV基因组结构与功能开展了深入研究,在IBV编码的结构蛋白和辅助蛋白功能研究方面取得了重要进展。文章就IBV辅助蛋白对病毒复制、病毒毒力的影响以及辅助蛋白在疾病预防方面的研究进行总结,为IBV辅助蛋白的功能研究及减毒活疫苗研发提供新的方向。 相似文献
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禽传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的雏鸡和成年鸡呼吸系统以及泌尿生殖道组织损伤和病变的急性、高度接触性疾病。虽然临床上广泛使用疫苗免疫防控该病,但由于IBV基因组存在频繁的变异和重组,导致新基因型和血清型不断出现,从而造成我国鸡IB未能得到有效控制。文章详细介绍了基于IBV S1基因系统发育学建立的分型方法以及我国流行的IBV 4个基因型、18个分支的来源、传播和流行现状,为IB防控和疫苗研发提供参考。 相似文献
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为了解国内禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)流行株外膜蛋白 H(OmpH)基因的变异情况,参考GenBank中已发表的多杀性巴氏杆菌序列设计1对特异性引物,采用PCR方法对不同来源的8株禽Pm菌株和3个荚膜型参考株(A、B、D)的OmpH基因进行扩增、测序。结果显示,11个菌株的OmpH基因开放阅读框在1002~1071 bp 之间;SignalIP 4.0预测结果表明,信号肽均为N端20个氨基酸残基,成熟蛋白氨基酸残基数量在314~337 aa之间,推测的分子质量在33.76~37.04 ku之间。与GenBank中15个菌株OmpH基因序列比对结果发现,核苷酸同源性在84.9%~100.0%之间;氨基酸同源性在81.5%~100.0%之间;其中C48-1、1010、9003、890920、921012、XJ-e 6个国内禽Pm分离株OmpH序列同源性为100.0%。试验结果表明,国内禽Pm菌株OmpH基因非常保守。 相似文献
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通过分离和鉴定病原确诊江苏一肉鸽场暴发了曲霉菌病,观察和研究肉鸽感染曲霉菌病后各系统的病理学变化。采用血琼脂、麦康凯琼脂和沙保弱氏葡萄糖琼脂平板对病原进行了分离与鉴定,涂片检验毛滴虫,应用微量血凝抑制试验检测鸽新城疫抗体。进行流行病学调查,观察临床症状,解剖并记录病变,采集肺、肝、肠和脑组织进行病理组织切片,病原经分离鉴定是烟曲霉菌。病理学研究发现临床上会出现精神、呼吸和饮食等变化,影响肉鸽的产蛋率、受精率和出孵率等,剖检可见肺、气囊、肝脏和十二指肠等组织器官有不同程度的霉菌性结节,脑、脾脏、肾脏和法氏囊等组织器官也可见霉菌性病变,肺、肝、肠和脑组织的病理组织切片中可见大小不一的坏死灶,坏死灶周围出现炎性细胞浸润,坏死灶内有霉菌菌丝和孢子。 相似文献