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近年来,我国养牛业蓬勃发展,走向集约化和规模化,养牛业已成为许多农民的主要经济来源。但养殖户往往疏忽管理,对疾病预防的意识不足,给牛采食较多易发酵、已霉变腐烂的饲料,导致食物在瘤胃内发酵,产气与排气动态不均衡,造成牛瘤胃臌气,本病是临床常见的消化系统疾病之一,会引起瘤胃机能障碍,若不及时治疗病情会加重,可能会引起继发性感染或导致呼吸困难、停止嗳气、窒息、胃及横膈膜破裂等,造成急性死亡。大大增加了牛的死亡率,给养殖户造成严重的经济损失。为此,笔者结合临床经验及导师的指导,对牛瘤胃臌气发病原因、症状、诊断、治疗与预防措施等进行了分析、总结,希望为养殖户有效诊断、治疗与预防提供参考。 相似文献
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【目的】硒(Se)能否通过Nod2/MAPK/mTOR途径调控金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤,有待于进一步研究。因此本研究将探究硒对金黄色葡萄球菌(S. aureus)感染的奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键蛋白表达的影响,从而为阐明硒的免疫调控机制提供理论依据。【方法】首先将bMECs以10 6细胞/孔接种于6孔板中,当细胞超过80%的汇合度时,用含2、4和8 μmol·L -1浓度硒的培养基替换原来的培养基,继续孵育12 h,然后用PBS洗涤每孔3次,将S. aureus按MOI=1:1的比例加入6孔板中,继续培养0.5 h,然后收集bMECs细胞进行相关蛋白的检测。本试验共分3大组,即对照(Con)组(bMECs)、模型(Mod)组(bMECs+S. aureus)和试验组。其中试验组又分3个亚剂量组,即Low组(bMECs+2 μmol·L -1 Se+S. aureus)、Mid组(bMECs+4 μmol·L -1 Se+S. aureus)和Hig组(bMECs+8 μmol·L -1 Se+S. aureus),每组设3个重复。利用BCA蛋白测定试剂盒对收集的bMECs细胞进行总蛋白提取。应用Western blotting技术检测bMECs中Nod2和RIP2蛋白表达水平及JNK,AKT和mTOR蛋白磷酸化水平。将蛋白样品加到10%的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中,上样量为20 μg/孔,之后将蛋白转移到聚偏氟乙烯(PVDF)膜上。将PVDF膜用5 mL 5%脱脂乳阻断2 h,脱脂乳脱脂后用TBST清洗后,分别用5 mL的 Nod2、RIP2、JNK、AKT、mTOR和β-actin的一抗孵育过夜,回收一抗。之后在PVDF膜中分别加入5 mL上述蛋白的二抗,室温孵育2 h,回收二抗。PVDF用TBST洗涤5次,最后在暗室条件下进行化学显影。 【结果】S. aureus能显著提高bMECs中Nod2和RIP2蛋白表达水平及JNK,AKT和mTOR蛋白磷酸化水平(P<0.01)。S. aureus感染0.5 h后,Nod2蛋白水平显著升高(P<0.01)。在培养基里添加2 μmol·L -1 的硒可极显著抑制Nod2蛋白的表达(P<0.01),在培养基里添加8 μmol·L -1 的硒可显著抑制Nod2的表达(P<0.05); S . aureus感染0.5 h后,RIP2蛋白水平显著升高(P<0.05),而在培养基里添加8 μmol·L -1 硒可显著抑制RIP2蛋白的表达(P<0.05);S. aureus感染0.5 h后,与对照组相比,模型组JNK蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01)。在培养基里添加4 μmol·L -1 的硒能显著抑制JNK蛋白的磷酸化水平(P<0.05),在培养基里添加8 μmol·L -1 的硒能显著抑制JNK蛋白的磷酸化水平(P<0.01); S. aureus感染0.5 h后,与对照组相比,模型组AKT蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01)。在培养基里添加4 μmol·L -1 硒可极显著抑制JNK蛋白的磷酸化水平(P<0.01),在培养基里添加8 μmol·L -1 硒可显著抑制AKT蛋白的磷酸化水平(P<0.05);S. aureus感染0.5 h后,模型组mTOR蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01)。在培养基里分别添加4 μmol·L -1 和8 μmol·L -1 硒均能显著抑制mTOR蛋白磷酸化水平(P<0.05)。 【结论】硒可通过抑制bMECs Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键因子蛋白的表达而减轻S. aureus诱导的bMECs炎症反应。 相似文献
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为了解临沂地区猪蓝耳病的流行情况,从临沂市某规模化养猪场随机采集174份猪血清样本,采用间接ELISA的方法检测血清中的PRRSV抗体水平,结果显示,所测174份样品中公猪抗体阳性率为44.00%、母猪(妊娠30~60 d)抗体阳性率为93.00%、母猪(妊娠60~90 d)抗体阳性率为87.00%、哺乳期母猪抗体阳性率为86.00%、猪瘟一免前仔猪抗体阳性率为48.00%、猪瘟二免前仔猪抗体阳性率为83.00%。公猪抗体离散度为68.00%、母猪(妊娠30~60 d)离散度为49.00%、母猪(妊娠60~90 d)离散度为65.00%、哺乳期母猪离散度为59.00%、猪瘟一免前仔猪离散度为88.00%、猪瘟二免前仔猪离散度为64.00%。结果表明,该猪场对PRRS的免疫比较到位,猪群自然感染率较低,猪群之间离散度差异大,猪蓝耳病在猪群之间稳定性较差。调查结果希望能为猪蓝耳病的防治提供理论参考。 相似文献
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