枣疯病植原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据枣疯病植原体16S rDNA基因保守区域设计、合成特异性引物和TaqMan探针, 以构建的重组质粒作为阳性标准品, 建立并优化了对枣疯病植原体的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。对优化后的方法进行灵敏度、特异性及稳定性评价, 制作了标准曲线。结果显示, 制作的标准曲线有极好的线性关系, 相关系数( r 2 )达到0.998, 建立的实时荧光定量PCR检测方法能够特异性地检测枣疯病植原体, 能检测到60拷贝的质粒DNA。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度、特异性、重复性好, 不仅能够实现对枣疯病植原体的快速检测, 而且为实现从病原定量水平上对枣疯病病情分级奠定了基础。     

海南省抗番木瓜环斑花叶病种质资源评价研究

在48个番木瓜种质资源中,发现琼木瓜18号、琼木瓜27号、琼木瓜28号和琼木瓜29号表现出比对照(穗中红)更强的抗番木瓜环斑花叶病特性,且在产量、长势、可溶性固形物含量、果肉色泽、平均单果重和始瓜高度等方面均有明显优势,可作为鲜食水果型番木瓜推广.该试验为进行番木瓜种质资源筛选利用和杂交育种研究奠定了基础.     

枣疯病植原体新疆分离物16S rDNA基因克隆与序列分析

利用植原体16SrDNA基因保守序列通用引物对新疆阿克苏地区和喀什地区的疑似枣疯病植株总DNA进行常规PCR和巢式PCR检测,分别扩增出1.5kb和1.2kb的特异性片段。对片段进行克隆、序列测定分析及系统发育树构建,结果表明,新疆枣疯病阿克苏分离物和喀什分离物的16SrDNA基因序列同源性极高,达到100%,与16SrⅤ组植原体的同源性达到98.4%以上,并且与16SrⅤ-B亚组中的枣疯病山东莱芜株系、山东龙口株系同源性最高,达到99.5%,因此归属于榆树黄化组16SrⅤ-B亚组。首次报道新疆枣疯病植原体16SrDNA的序列,确定新疆枣疯病植原体的分类地位,为枣疯病的早期诊断和检测提供依据。     

杏褪绿卷叶植原体新疆分离物可视化LAMP检测方法的建立

为新疆杏褪绿卷叶病的田间快速诊断和检测提供新方法,根据杏褪绿卷叶植原体新疆分离物tuf基因保守序列,设计并筛选出1套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,通过对反应体系中主要影响因素的优化,建立适用于快速检测杏褪绿卷叶植原体的LAMP检测方法。结果表明:建立的LAMP检测方法能特异性地检测出杏褪绿卷叶植原体,检测灵敏度是普通PCR的100倍,且可通过肉眼观察直接对反应结果进行判定。     

几份荔枝种质材料的RAPD鉴定

采用RAPD技术探讨了2个荔枝新种质(荔13号和A4)与原产海南的2个品种(大丁香和南岛无核荔)之间的亲缘关系。结果表明，荔13号与大丁香、A4与南岛无核荔的亲缘关系较近，但它们之间没有同种异名关系。     

海南妃子笑荔枝标准化生产技术

海南现有荔枝面积2．7万hm^2，其中90％以上为妃子笑。荔枝是海南5个大宗水果之一，目前年产量在2万～3万t(全国年产量140万t)。海南荔枝由于早熟(相同品种比大陆早15～20天)、品质优等特点，可以抢先占领市场，获得丰厚的经济回报。但目前海南种植荔枝科技含量低，产量差异悬殊。为了使海南荔枝产业能迅速、健康发展，我们在调查海南妃子笑荔枝丰产栽培技术经验的基础上，总结出《海南妃子笑荔枝标准化生产技术》，并经2003年和2004年试验验证，证明该技术有效、可行。     

枣疯病植原体LAMP可视化检测方法的建立

根据枣疯病植原体16SrDNA基因保守序列,设计出4条特异性环介导等温扩增(LAMP)引物。通过对反应条件的优化,建立一种适用于枣疯病植原体的可视化LAMP检测技术,对优化后的方法进行特异性、灵敏度评价。结果显示,该方法能够特异性地检测出枣疯病植原体,且LAMP产物的特异性通过MaeⅡ酶切得到验证;灵敏度较常规PCR高出100倍;并可通过肉眼观察反应液颜色变化,直接判定结果。建立的枣疯病植原体LAMP可视化检测方法适用于基层及现场快速检测,为枣疯病的快速检测提供了新方法。     

"改良日升"番木瓜主要性状及无公害栽培技术

“改良日升”番木瓜是我国台湾培育的优质、丰产、抗病小果型番木瓜新品种。2004年,海南省农业科学院热带果树研究所从台湾省引进“改良日升”番木瓜,经试种、示范与推广,该品种目前已成为海南省鲜食番木瓜主栽品种,深受消费者喜爱,90%以上外销和出口,取得较好的经济效益。现将其性状表现和无公害栽培技术总结如下。1植物学特征“改良日升”番木瓜属红肉小果型品种,以两性株的果实为商品果,两性株占群体株的68%。进入初采果期,平均干高85cm,干周42cm,株高305cm,节间长3.5cm,茎干淡灰绿色。叶柄痕小,叶柄绿色或红绿色,叶裂数8裂,叶柄弯缺处稍…     

地下滴灌条件下不同接种处理对苜蓿根瘤菌的定殖、结瘤和固氮的影响

在苜蓿地下滴灌田间小区试验条件下,研究不同处理接种绿色荧光蛋白基因(GFP)标记的苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)XGL026菌株在苜蓿根际的定殖、结瘤动态和固氮性能。结果表明:拌种接菌(B)在第1茬苜蓿根际根瘤菌的定殖密度、结瘤数和占瘤率最高,第2、3茬苜蓿则明显降低。第1茬苜蓿刈割后滴施1次根瘤菌(D),拌种结合第1茬刈割后滴施1次根瘤菌(B+D1),拌种结合第1、2茬刈割后滴施2次根瘤菌(B+D2),拌种结合第1茬刈割后滴施1次根瘤菌并增施1次氮肥(B+D1+N1),拌种结合第1、2茬刈割后滴施2次根瘤菌并增施2次氮肥(B+D2+N2)处理,根瘤菌的定殖水平持续稳定,显著高于B处理。B+D1、B+D2、B+D1+N1和B+D2+N2处理均能显著增加苜蓿结瘤数,提高占瘤率(P0.05),其中B+D1+N1和B+D2+N2接种效果最优。地下滴灌模式有利于苜蓿侧根形成根瘤。采用15 N天然丰度法测定不同接种处理的固氮效率,结果显示,接种处理在苜蓿一年生长期中的固氮率和固氮量分别为54.52%~76.80%和43.00~183.39kg·hm~(-2),较未接种对照提高3.35%~40.41%和13.56~83.86kg·hm~(-2)。B处理在第1茬苜蓿的固氮效率最突出,之后明显下降。B+D1+N1、B+D2+N2处理分别在第2、第3茬苜蓿上具有最高的固氮效率。研究结果表明,滴灌条件下拌种结合滴施根瘤菌同时加施少量氮肥可以显著提高根瘤菌的定殖、结瘤和固氮性能。