猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断及其分子特点

采用流行病学调查、临床症状观察、病理学检查、病毒分离、分离毒株测序以及遗传演化分析的方法,对北京及其周边地区4个猪场剖检的4头猪进行分析。结果:流行病学和临床症状表现为急性高热性传染病;病理学观察为非化脓性脑炎和间质性肺炎等多器官严重的病理变化;RT-PCR和病毒分离确定该疫情的主要病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。与典型PRRSV感染不同的是:成年猪感染率达50%以上,病死率达80%以上;PRRSV分离株全基因序列分析表明属于PRRSV北美洲型,特别是PRRSV NSP2不连续缺失30个氨基酸,说明此次流行的PRRSV毒株可能为高致病性毒株。     

京津冀禽屠宰场禽流感流行病学调查及风险防控

中国养殖业的发展趋势是规模化和集约化养殖,在一些疫病的传播过程中,屠宰企业处于关键的节点性位置,是禽产品从养殖场流向消费者餐桌的必经途径。禽屠宰场是禽流感病毒感染的易发地,是禽流感监测的薄弱环节,因此对禽屠宰场进行禽流感监测并对屠宰场的无害化处理机制开展评估,能有效防止疫病的传播和流行,对养禽业的生产和公共卫生安全意义重大。     

北京地区鸽子鹦鹉热嗜衣原体流行状况研究

<正>禽衣原体病主要是由鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,Cps)感染禽引起不同征候群的一种接触性人畜共患病,临床上以肺炎、心包炎、气囊炎、结膜炎为特征。     

猪瘟病毒C株检测用国家核酸标准物质的研制

为研制均匀、稳定的猪瘟病毒（CSFV）核酸标准物质,选择CSFV C株接种于PK-15细胞并收获病毒液,然后经过病毒灭活、分装、冻干,最终形成核酸标准物质。用微滴式数字PCR对制备的CSFV标准物质进行均匀性和稳定性评估、标准物质合作定值,在评定不确定度后计算得出最终量值结果,并开展临床试用。结果显示,该标准物质均匀,4 ℃条件下可稳定存放4周,25 ℃可稳定存放1周,-20 ℃可稳定存放11个月,量值结果为（5.1±0.7）×105 copies/mg;临床试用显示,所制备的标准物质与临床样本的互通性良好。本研究制备的CSFV C株国家核酸标准物质均一性良好、稳定、量值准确度高,并通过了全国标准物质管理委员会评定,可用于动物及动物产品质量安全检测,从而有效保障猪瘟防治工作的开展。     

美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP可视化快速检测方法的建立与应用

为建立一种快速诊断美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(NA-PRRSV)的可视化检测方法,根据GenBank已发表的美洲型PRRSV经典病毒株JXA1序列,运用在线生物软件设计合成并筛选出1组引物,通过反应体系优化,建立了NA-PRRSV RT-LAMP可视化快速检测方法,并验证了该方法的特异性、敏感性,同时开展了初步临床应用。结果显示:该方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,可检测病毒RNA模板的最低浓度为10 copies/μL;应用该方法检测30份临床样品,结果与实时荧光RT-PCR方法符合率为100%,进一步证实了该方法的可行性。结果表明,所建立的RT-LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、可视等优点,适用于NA-PRRSV的现场快速检测。本研究为NA-PRRSV的快速、准确鉴别提供了有效手段。     

商品猪牛O型、亚洲-I型口蹄疫2价苗免疫效果的评价及免疫方案的探索

参照既定的商品猪O型口蹄疫疫苗免疫方案,对47头不同日龄的商品猪免疫牛口蹄疫O型、亚洲-I型2价灭活疫苗,并通过免疫应激反应观察、抗体效价跟踪监测,以评价该疫苗的免疫效果及摸索合适的免疫方案。结果表明,受试的47头不同日龄的猪,除个别出现一过性采食下降外,均未出现其他异常表现;该2价苗在猪只30日龄以1ml/头肌肉注射做基础免疫,间隔30d以>2ml/头剂量做加强免疫,其效果比较好。     

北京创新动物防疫管理模式，服务绿色奥运

2008年第29届北京奥运会举办在即,奥运会给我国带来新的机遇和挑战,北京吸引着全球的目光.国际上对奥运参赛动物健康和运动员食品质量十分关注,如何做好动物疫情控制和保障动物源性食品的安全成为举办国首要任务.     

猪圆环病毒免疫学研究进展

猪圆环病毒(PCV)在世界范围内广泛存在,可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎-肾病综合征(PDNS)和猪呼吸系统疾病症候群,给养猪业造成重大经济损失.已有研究表明,PCV-2感染和免疫刺激作用在PMWS发生中起关键作用,母源抗体对PMWS发生有被动保护作用,通过对初产母猪和经产母猪进行PCV-2免疫,增加母源性免疫和降低病毒血症的措施可以减少PMWS对仔猪死亡的影响.PCV-2疫苗现在已经在商业上应用,疫苗对PCV-2复制和PCVD的诱导增强作用似乎依赖于疫苗佐剂的类型和疫苗的接种时间.因此,基于有效的试验,在发生过PMWS感染的猪群,应该根据PCV-2感染的时间有目的地制定免疫接种方案,以控制或者减少PMWS的发生.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的表达和重组蛋白的纯化及免疫学活性分析

[目的]在基因工程菌中实现猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7基因的高效表达,对表达的重组蛋白进行纯化,并探讨其免疫学活性及应用价值。[方法]将已构建好的重组表达载体pET-ORF7转化大肠杆菌BL21（DE3）,用IPTG在最适条件下诱导表达,其表达产物用SDS-PAGE和Western Blot进行检测。应用Ni-NTAHis.Bind Resin层析柱在变性条件下纯化表达产物,通过梯度透析进行复性。采用Western Blot及间接ELISA法检测复性后重组蛋白的免疫学活性。[结果]重组质粒pET-ORF7在大肠杆菌中以融合形式成功表达,融合表达产物主要以包涵体形式存在。SDS-PAGE检测所表达的重组蛋白分子量为33 kD左右,与预期大小相符。Band-scan软件对表达蛋白分析发现,表达产物约占菌体蛋白的50%。Western Blot及间接ELISA法显示复性后的重组蛋白与PRRSV阳性血清有特异性结合反应,表明其具有良好的免疫学活性。[结论]该试验将为进一步研制PRRSV单克隆抗体及诊断试剂盒奠定基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的表达和重组蛋白的纯化及免疫学活性分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）为不分节段、聚腺苷酸化、有囊膜的单股正链RNA病毒。其基因组长约15kb,含有8个开放的阅读框架（ORFs）。PRRSV基因组的顺序依次为：5’-ORFla-ORFlb-ORF（2—6）．ORFT-3’。鲁韦韦等分析表明,PRRSV的ORF7基因保守性较好,变异较小。此外,ORF7编码的核衣壳蛋白（N蛋白）具有良好的免疫原性及反应原性,机体产生的PRRSV抗体主要是针对N蛋白的。因此,N蛋白常可作为诊断抗原来检测PRRSV。