柑橘品种对不同基因型柑橘衰退病毒的抑制及变异的影响

为研究不同柑橘品种对柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）不同基因型的抑制效果,将T36、T30、VT和T3等基因型CTV的毒源分别接种于‘赛蒙斯’甜橙、‘邓肯’葡萄柚、‘墨西哥莱檬’和‘强徳勒柚’,运用RT-qPCR技术检测被接种植株中CTV复制水平的差异。结果表明,‘墨西哥莱檬’最适于CTV各基因型的复制。‘邓肯’葡萄柚中VT、T3和T36基因型的复制水平最低。4种柑橘品种对T36基因型CTV都有明显的抑制作用。通过对CTV的CP基因进行分析发现,VT基因型CTV在‘赛蒙斯’甜橙中发生了较大变异。     

柑桔裂皮类病毒江西分离物(CEVd-RJ)全长cDNA序列分析

运用RT-PCR技术对柑桔裂皮类病毒江西分离物CEVd-RJ的全长cDNA序列进行扩增、克隆,并对其片段进行序列测定。将获得的371bp的全长cDNA序列与GenBank登录的11个柑桔裂皮类病毒相应序列进行比对分析,结果发现CEVd-RJ与湖北分离物CEVd-HB的同源性为99.7%,与广东分离物CEVd-YC的同源性为90.8%,同国外9个分离物间的同源性在89.0%～98.6%之间。序列差异分析发现,CEVd-RJ的全长cDNA序列比CEVd-YC少一个碱基,有36个位点碱基发生了变化,与CEVd-HB只存在一个碱基位点的差异。     

柑橘衰退病毒分子生物学检测及基因型分析技术研究进展

由柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus, CTV)引起的柑橘衰退病是严重危害世界柑橘种植业的一种病害。随着我国柑橘产业的发展,柑橘衰退病的为害变得日趋严重。本文综合有关文献,对CTV分子生物学检测及基因型分析技术的研究进展作一综述。     

赣南脐橙主产区柑橘衰退病发病率调查研究

江西赣南是我国脐橙最适宜生长区域之一,目前已成为世界上最大的脐橙集中产区,为了解和探明赣南脐橙主产区柑橘衰退病毒的发生和危害情况,作者通过对赣南脐橙14个主产区柑橘果园进行调查和样品采集,运用直接组织点免疫法（DTBIA）和反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术对采集到的样品进行病毒检测,两种方法检测结果相一致,均发现试验中收集到的1498份柑橘样品中有673份样品携带CTV,感染率达44.9%,研究结果表明赣南脐橙主产区柑橘衰退病毒危害严重,生产上应加大防控力度。     

T3基因型柑橘衰退病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立及应用

根据不同基因型柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）ORF1a的序列差异,设计T3基因型CTV的特异性引物T3-4F/R,通过优化得到最佳反应条件建立T3基因型CTV分离株的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR,并进行灵敏性、重复性试验。应用该方法测定柑橘植株中T3基因型CTV分离株含量。建立了一种特异性检测T3基因型CTV分离株的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法,其灵敏性比普通RT-PCR方法高100倍。标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为97.1%,相关性系数为0.992。组内和组间变异系数均小于2.94%,表明该方法重复性好。田间样品中T3基因型CTV含量差异较大,最高含量是最低含量的1 250倍。本研究中建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法能够准确检测柑橘植株内的T3基因型CTV分离株,可用于研究T3基因型的CTV的变化规律。