水泡性口炎病毒2种血清型核衣壳蛋白的原核表达及生物信息学分析

用RT-PCR方法从水泡性口炎病毒(vsv)扩增印第安纳(Indiana)和新泽西(New Jersey)血清型核蛋白N基因,分别克隆至pMD20-T载体进行序列鉴定及生物信息学分析.构建重组表达质粒VSV-IN-pBCX和VSV-NJ-pB-CX,并经SDS-PAGE和Western-blot鉴定表明2种血清型病毒核衣壳蛋白N基因在BL21(DE3)宿主菌中成功表达,重组蛋白相对分子质量约为82 000,并能够与各自对应血清型阳性血清反应.这表明2个重组蛋白具有良好的抗原性,可作为用于建立水泡性口炎血清学诊断方法的诊断抗原.     

99%绿颖乳油对柑橘介壳虫的防治效果

柑橘介壳虫是永春县柑橘重要害虫之一,危害叶片、果实,一般百叶平均156头,严重(失管)的百叶平均312头,对当年和来年树势及产量造成严重影响.每年给当地柑橘生产带来不同程度的经济损失.一些果农由于防治不当造成用药次数增加或加大农药用量,不但增加了生产成本,而且降低了果品质量,同时造成农药残留问题.因此,为了更好地防治介壳虫,生产绿色安全果品,今年在县猛虎场柑橘园做了99%绿颖乳油对柑橘介壳虫的防效试验.     

甲基营养型芽胞杆菌BMF 04固态发酵条件优化及其对黄瓜幼苗生长的影响

甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus BMF 04是本实验室从连云港海域分离纯化得到的对多种植物病原真菌有较强抗菌作用的优良生防菌株.为进一步开发应用该菌株,以细菌总数和芽胞率为指标,通过单因素和响应面试验设计,优化固态发酵培养基配方和发酵条件,采用室内盆栽试验,测定发酵物对黄瓜幼苗生长...     

螨危24%悬浮剂对柑桔红蜘蛛防治效果示范试验

柑桔红蜘蛛是我县柑桔生产上的主要虫害,各个柑桔园均有不同程度的发生.受害重的平均百叶9.87头,虫叶率100%,一般平均百叶5.57头,虫叶率100%,对当年和来年树势及产量造成严重影响.为了更好地防治红蜘蛛,我站进行螨危24%悬乳剂防治柑桔红蜘蛛的效果和对柑桔的安全性试验.     

芦柑柑桔砂皮病的综合防治技术

柑桔砂皮病是永春县芦柑生产上的重要病害之一,特别是东关镇果园发生最严重.多年来,由于果园生态环境变化,生产技术变迁,市场开放与对外交流增多,柑桔砂皮病危害加剧,加上果农经验不足,疏于防治,造成蔓延传播.每年发生面积330公顷,轻的损失5%～10%,中等损失20%～30%,重的损失80%以上,严重影响果实外观品质与商品价值,减少了芦柑出口量.通过采取综合防治措施,柑桔砂皮病从叶发病率100%降到1%,果发病率从100%降到15%,可挽回产量0.15万吨.现将其发生特点及综合防治措施总结如下:     

利用重组抗原建立间接酶联免疫吸附试验检测猪传染性胃肠炎血清抗体

随着分子生物学的发展 ,重组抗原用于疾病的血清学诊断的报道越来越多 [3 ] 。周仲芳等报道了采用杆状病毒表达系统生产的TGE病毒纤突蛋白 ( S)建立了一种竞争ELISA检测猪 TGE血清抗体 ,获得了较为理想的特异性和准确性。本文报道了采用同样的重组抗原建立了一种间接 ELISA用于TGE血清抗体的检测 ,同时由于在结果判定中采用终点滴度技术 ( End- titer) ,使得检测结果的判定更直观和迅速。1　材料与方法1.1　 EL ISA操作方法　本研究中的抗原制备和包被方法见周仲芳等 ( 1997)的报道。ELISA板经抗原包被后可立即使用 ,也可保存…     

作物缺素症状

营养元素的丰缺对农作物的影响很大,从农作物长相特征我们可大致判断农作物缺乏什么营养元素。根据我们的经验和试验结果,列举农作物缺乏某些营养元素的症状,供参考。     

鸡毒支原体和滑液支原体的种特异性寡核苷酸探针

支原体可使家禽饲养蒙受重大经济损失。从家禽中已至少分离到16种支原体，其中以鸡毒支原体（Myc叩办。gallisePticum）和滑液支原体（Mxconlasmasynoviae）最为重要，可引起鸡和火鸡严重的呼吸道病。通常，对支原体的防治策略是直接扑灭种禽中的致病支原体。因此，需要确定种禽是否受到致病支原体的感染。但现行的支原体的鉴定方法其准确率和灵敏度均不高，需要发展新技术。本研究设计了两种rDNA寡核昔酸探针，通过直接滤膜杂交法（directjilterhybridizationexperhoent）分别用于鉴定鸡毒支原体和滑液支原体。借助计算机软件分析，将鸡…     

间摘录 法Dot—ELISA检测狸流行性腹泻抗体的研究

使用非洲绿猴肾细胞增殖适应传代细胞培养的猪流行性腹泻病毒,并经聚乙二醇沉淀法分离纯化ＰＥＤＶ抗原,建立斑点酶联免疫吸附试验检测猪流行性腹泻抗体。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒双重液相基因芯片检测方法的建立

为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性PRRSV毒株(HPPRRSV),根据PRRSV囊膜蛋白GP2基因保守序列和HP-PRRSV特有的Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法RT-PCR不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株PRRSV以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株PRRSV毒株并准确鉴别其中7株HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对PRRSV、HP-PRRSV病毒液的检测低限均小于每个反应0.5TCID_(50);其组内、组间检测变异系数均10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光RTPCR试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测PRRSV提供了一种新的分子生物学检测方法。