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采用以结晶纤维素(Avicel)为唯一碳源的平板活性筛选法,从60份森林腐殖土、腐术样品中分离得到2株在pH5.0、37℃条件下高效降解结晶纤维素的细菌菌株GXN152和GXN153。以菌株的总DNA基因为模板,用细菌的16S rRNA基因的通用引物扩增得到菌株GXN152和GXN153的16S rRNA基因序列。测序分析表明菌株GXN152的16S rRNA基因序列和洋葱假单胞菌(Burkholderia cepacia)菌株CNR22的16S rRNA基因序列的同源性最高,具有98%的同源性,生理生化特性检测表明菌株GXN152具有洋葱假单胞菌的鉴别特征,将结晶纤维素降解菌GXN152鉴定为洋葱假单胞菌。菌株GXN153的16S rRNA基因序列和类芽孢杆菌(Paenibacillus favisporus)菌株GMP01的16S rRNA基因序列的同源性最高,具有99%的同源性,生理生化特性检测表明菌株GXN153具有类芽孢杆菌的鉴别特征,将纤维素降解菌GXN153鉴定为类芽孢杆菌。 相似文献
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以人工合成的促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)/转运肽(TRS)基因与表达载体pGEX-6p-1相连的重组子(pGE-G)作为研究对象,转化大肠杆菌BL21(ED3)plyS。本文对GST-GnRH/TRS/BL21(DE3)plyS工程菌的GST-GnRH/TRS重组产物进行了诱导表达和分离纯化的研究,结果表明,该工程菌用LB培养基在30℃扩增至OD590为0.6左右,加IPTG(终浓度为0.2 mmol/L)诱导3.5h,此时GST-GnRH/TRS的表达量可占菌体总蛋白的33.3%。重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中。工程菌经溶菌酶破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再用8 mL 1%(V/V)Triton X-100变性溶解IBs,离心取上清,进行Glutathione Sepharose 4B柱一步法亲和层析,得到了纯度较高的GST-GnRH/TRS融合蛋白,为进一步研究和实际应用奠定基础。 相似文献
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木聚糖降解细菌的鉴定及其木聚糖酶的特性 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]探讨木聚糖酶的生理生化特性。[方法]采用平板活性筛选法从不同环境样品中筛选出木聚糖降解能力最强的菌株进行鉴定并对其所产粗木聚糖酶的特性进行研究。[结果]菌株GXM1被鉴定为洋葱假单胞菌,菌株GXM4为类芽孢杆菌。菌株GXMI所产木聚糖酶的最适pH为6.0,最适温度为55℃,菌株GⅫ咐所产木聚糖酶的最适pH为6.0,最适温度为50℃。2株菌株所产的木聚糖酶在40℃以下较为稳定。Mn^2+、Ca^2+和Zn^2+对菌株GXM1所产木聚糖酶有显著的激活作用,而Cu^2+、Fe^2+和Fe^2+对其有显著的抑制作用;Ca^2+和Fe^3+对菌株GXM4所产木聚糖酶有显著的激活作用,而Mn^2+、Zn^2+和Fe^2+对其有显著的抑制作用。[结论]为高效木聚糖酶的生产应用奠定了理论基础。 相似文献
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[目的]探索硒在大果山楂贮藏保鲜中的应用,并为开发富硒大果山楂提供理论依据。[方法]以富硒大果山楂为原料,对其果实中有关酶活性及贮藏品质进行研究。[结果]富硒大果山楂果实中过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性比对照组分别降低了49.2%和37.5%,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性比对照组分别增加了16.7%和33.5%。大果山楂果实硬度为25.29 N/cm~2,维生素C的含量为1 186.50 mg/kg,可溶性总糖的含量为144.00 g/kg,可溶性固形物的含量为16.60%,较对照组分别增加了13.2%、9.5%、29.0%、3.7%。[结论]硒能延缓大果山楂果实的成熟衰老,改善其品质。 相似文献
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从富集培养物宏基因组文库中筛选获得1个表达木聚糖酶活性的克隆pXYN12.鉴定分析表明:pXYN12上潜在的木聚糖酶基因umxyn10B大小为999 bp.编码产物与嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophi-lus)的木聚糖酶基因(GenBank索引号AAZ74783)的氨基酸序列有63%的一致性和76%的相似性,属于糖基水解酶家族10的成员.PCR扩增了umxyn10B的含催化功能域编码区的DNA序列并连接到表达载体pET-30a(+)上,构建成表达质粒在大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS中实现了表达,并对表达条件进行研究. 相似文献
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经过初筛、复筛,从活性污泥中分离出1株富产絮凝剂并适用于甘蔗蔗汁絮凝澄清的微生物菌株A.通过菌株A的5.8S rRNA基因两侧的内转录间隙(ITS)进行序列分析,并结合形态观察确定该菌株为盘多毛孢属(Pestalotiopsis sp).对培养条件进行单因素试验,获得该菌株产絮凝荆的最佳培养条件为:pH值为6.0、28℃、140r/min;培养4d;最佳碳氮源分别为葡萄糖和牛内膏.微生物发酵液在蔗汁沉降试验中的絮凝率为69.2%,清汁色值为87.4IU. 相似文献
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