创伤弧菌FJ03-X2胞外产物对欧洲鳗鲡的致病性和免疫原性分析

以70%饱和硫酸铵盐析法制备鳗源创伤弧菌生物1型高致病菌株FJ03-X2的胞外产物(ECPs),攻毒试验表明,该ECPs对鳗鲡无致病力;SDS-PAGE分析表明,该ECPs由约36 ku为主的系列蛋白条带组成。制备ECPs的免疫刺激复合物(ISCOMs),以20μg/尾的剂量腹腔注射免疫规格为15~20 g/尾的欧洲鳗鲡,ELISA分析表明,21 d和28 d时的血清抗体效价约为1∶1 280,免疫印记显示,ECPs中分子量为36 ku以上的蛋白成份可被免疫欧洲鳗鲡血清所识别,是构成ECPs的主要免疫原;免疫保护试验表明,免疫欧洲鳗鲡显示出较高的免疫保护力。试验结果也显示出,单纯以ECPs等剂量腹腔注射免疫欧洲鳗鲡,不能激发欧洲鳗鲡产生较高滴度的血清抗体,免疫欧洲鳗鲡也未能产生有效的保护性免疫应答。     

淀粉卵甲藻的危害与诊治

近年来，由于大黄鱼高密度非规范化养殖，海水污染等造成水质严重恶化，不少养殖户利用海区围垦池塘网箱养殖大黄鱼，因池塘内水体交换少，水流小以及其它外界因子的影响，易造成淀粉卵甲藻的大量繁殖，导致对大黄鱼等养殖鱼类的严重危害，现报告闽东地区发生的病例。１　病原　病原为眼点淀粉卵涡鞭虫（Ａｍｙｌｏｏｄｉｎｉｕｍｏｃｅｌｌａｔｕｍ），属于肉鞭动物门、鞭毛亚门、植鞭纲、腰鞭目、胚乳科。该虫的营养体（ｔｒｏｐｈｏｚｏｉｔｅ，ｔｒｏｐｈｏｎｔ），初期为梨形，后期则近于球形，大小为２０～１５０μｍ，最大的达３５０…     

嗜水气单胞菌单克隆抗体的制备及特性分析

利用杂交瘤单克隆抗体技术制备了AHYT—1和AHl05012株嗜水气单胞菌的菌体单抗，筛选出11个能稳定分泌抗嗜水气单胞菌单克隆抗体的细胞株，并对这些单抗进行了特性分析。经单抗类型测定，这些单抗分属IgM、IgG2a2个亚类，且均具有ELISA反应特性，腹水抗体效价在1：10^4—1：10^6，其中单抗4G4、2H4、GH9具有免疫荧光特性。ELISA特异性分析结果表明，4G4、2H4、FA4、GH9、CF2为嗜水气单胞菌血清型特异性单抗，4G4、2H4识别同一种血清型的嗜水气单胞菌分离株，而FA4、GH9、CF2却识别另外一种血清型的嗜水气单胞菌，并且与其他血清型的嗜水气单胞菌、温和气单胞菌以及鳗弧菌、爱德华氏菌、克鲁氏耶尔森菌、大肠杆菌、荧光假单胞菌均不反应。Western-blot结果表明，单抗4G4、2H4、FA4所针对的抗原是菌体脂多糖(LPS)，且它们所识别的LPS抗原表位不同。菌体单抗研究结果表明，4G4、2H4和GH93株单抗可应用于嗜水气单胞菌的诊断和血清分型。本研究目的旨为建立一种快速诊断鱼类嗜水气单胞菌病的方法和血清分型方法。     

PRV FB弱毒株与FA株gE,gI基因的同源性研究

用PCR方法扩增了PRVFB弱毒株和PRVFA野毒株的gE,gI基因,对FB弱毒株的gE,gI基因进行克隆和测序,并将其与GenBank中收录的PRVFA的gE,gI基因进行了比较。结果发现,PRVFB和PRVFA株的gE基因有2处碱基发生了点突变,同源性为99%;gI基因有7处碱基发生了突变,其中1处发生了3个碱基的插入突变,同源性为98%。表明PRVFB在传代过程中发生了遗传性变异。     

表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建

以PRRSV FJ-1a株为模板,采用RT-PCR法分别扩增出GP2a/GP2b-3、GP3、GP4、GP5和M蛋白基因片段,双酶切后插入穿梭质粒pDC316.利用AdMaxTM法,将5个重组穿梭质粒分别与腺病毒辅助质粒共转染293细胞,得到重组腺病毒Ad-GP2a/GP2b-3、Ad-GP3、Ad-GP4、Ad-GP5和Ad-M.重组腺病毒滴度为107.7～109.0TCID50·mL-1,而以Ad-GP5滴度最低,仅为107.7TCID50·mL-1.PCR检测第3、6、9代重组腺病毒稳定性,确证重组病毒均能稳定携带目的基因.对目的基因转录的RT-PCR鉴定结果显示,重组腺病毒分别感染293细胞后能转录产生目的基因mRNA.表达PRRSV主要囊膜蛋白基因重组腺病毒的获得,为进一步研制PRRSV基因工程疫苗,解析主要囊膜蛋白功能奠定基础.     

一例德保矮马异物性肠梗阻的诊疗

为了对一例患有急腹症的德保矮马进行诊治,试验采用基本临床诊断方法,结合血液生化指标及血常规指标检查进行诊断。结果表明:初步诊断该马所患疾病为异物性肠梗阻,并伴有轻度的脱水和贫血症状,遂采取禁食、止痛、补液、纠正电解质和酸碱平衡的治疗措施。在解除肠道异物(塑料网袋)后马匹病情得到明显改善,经过后续治疗马匹恢复健康顺利出院。说明应当加强饲养管理,避免马匹出现因食入异物而导致肠梗阻现象的发生。     

福建省小型猪类圆线虫病的调查

１９９３年秋季福建省各地调进的小型猪发生以腹泻为主要症状的疾病．死亡率高达５０％以上．对８个猪场３０００余头猪病情、病理、病原等的综合调查表明．该病由兰氏类圆线虫（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓｒａｎｓｏｍｉ）寄生于猪的小肠粘膜所致．病原经皮肤和口感染．该线虫经体外培养能进行多代繁殖并感染健猪．用丙硫苯咪唑（２０ｍｇ·ｋｇ－１）和伊维菌素（０．２ｍｇ·ｋｇ－１）治疗病猪２８７头，均有较高疗效，并可杀死虫卵．     

鸡减蛋综合征和新城疫二联油佐剂灭活苗的制备及应用

将减蛋综合征(EDS-76)H株和新城疫(ND)La Sota弱毒株分别接种鸭胚和鸡胚,收获胚液(HA价分别达2~(15)和2~(11)以上),福尔马林灭活后配制成EDS-ND二联油佐剂灭活苗。经无菌与安全性检验,免疫效力测定和田间应用结果表明,该苗安全性良好,于蛋鸡开产前1个月左右皮下或肌肉注射0.5ml/羽,免疫后21天HI抗体效价均达1:2~(10)以上,免疫期达6个月以上。     

嗜水气单胞菌 β-hemA 重组菌的优化培养及其生长曲线的测定

用正交试验探讨温度、培养基、时间三个因素对嗜水气单胞菌β-hemA重组菌E.coliDH5α(PCB)基因产物表达量的影响,通过优化培养,选择最佳培养条件,显著提高了β的溶血素基因(β-hemolysisgene,β-hemA)产物的产量。实验结果表明:该重组菌株在100mlTSB(添加0.05%酵母浸提物,1.8μg/mlZnCl2),37℃培养30h收获,其毒素蛋白含量为3258μg,毒素溶血价为17.44hu/μg,而在LB(100ml)和营养肉汤(100ml)中最高蛋白量和溶血活性分别为1260μg,14hu/μg和1199μg,8.22hu/μg。所选择的三个因子中对毒素蛋白质含量影响最大的是培养基,其次是温度;而对溶血素影响最大的则是温度,其次为时间。最佳生长曲线测定结果表明,在培养基预热至37℃的情况下,PCB6h能进入对数期。     

欧洲鳗鳗苗丙线磷中毒的诊治报告

环境中的有机磷（１０％丙线磷）进入鳗苗体内后能与胆碱酯酶结合，使该酶的活性下降，出现一系列胆碱反应系统临床表现。碘解磷定可使钝化的胆碱酯酶复活；硫酸阿托品可解除毒蕈碱样症状，掌握好这两种复活剂的用量，可以控制病情