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乳腺特异性基因转基因山羊表达特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用胚胎显微注射的方法,将牛乳酪蛋白基因作为乳腺定位表达调控序列与人忆型肝炎表面抗原基因组成的两个融合构件导入山羊原核期受精卵。产出的G0代羊用HBx和casein800两个探针进行了PCR+Southern整合检测,分别获得λ106和λ207构件整合阳性羊16和24只。用ELISA/HBsAg试剂盒检测转基因羊乳汁中的重组人乙型肝炎表面抗原,在G0代转基因羊中,λ106乳腺表达率是47.2%,λ 相似文献
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转人乳铁蛋白基因山羊乳对大鼠生长及代谢机能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
选用30只100 g左右清洁级SD大鼠,雌雄各半,随机均分为3组,转基因乳组每天2次灌胃转人乳铁蛋白基因(hLF)波尔山羊乳1 mL(蛋白含量0.93 g·mL-1),普通乳组灌胃未经任何处理的普通波尔山羊乳1 mL(蛋白浓度0.93 g·mL-1),生理盐水组灌胃等量灭菌生理盐水;自由采食、饮水,连续15 d;颈部静脉采血致死,收集血清.结果显示:灌胃转hLF基因山羊乳显著提高了雌、雄大鼠的日增重,与生理盐水组相比差异极显著(P<0.01),与普通乳组相比差异显著(P<0.05),而普通乳组与生理盐水组相比差异不显著;灌胃转基因和普通山羊乳对其他表观及生化指标均无显著影响(P>0.05).试验结果表明:短期灌胃转hLF基因山羊乳能够促进大鼠的生长,但对大鼠的代谢机能没有显著影响. 相似文献
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珠蛋白肽对早期断奶仔猪生长性能和血液指标的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
将120头35日龄的"长×大"二元去势公猪随机分成3组,分别为基础日粮组、基础日粮+0.5%小肽组、基础日粮+1.0%小肽组,每组设4个重复,每个重复10头仔猪,试验期28d,研究珠蛋白肽对早期断奶仔猪生长性能和血液指标的影响。结果表明:与对照组相比,0.5%小肽组平均日增重提高了10.9%(P0.05),腹泻率降低52.1%(P0.05);IgG、总蛋白、球蛋白、谷丙转氨酶分别提高了59.1%、19.8%、29.1%、49.2%(P0.05),尿素氮浓度降低20.1%(P0.05)。以上结果显示,珠蛋白肽能提高早期断奶仔猪生长性能,增强机体的免疫机能。 相似文献
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采用活体穿刺技术(ovum pick up,OPU),分别间隔3/4(1周2次)、5、7、10、14d对同一批荷斯坦奶牛进行穿刺采卵,根据优势卵泡直径和所有卵丘细胞-卵母细胞复合体的状态确定采卵时卵泡所处的发育阶段,从而确定卵泡波的发育动态变化。并以间隔不同时间采卵获得的卵母细胞成熟后进行体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)制备克隆牛胚胎。重构胚体内培养7d后,通过比较克隆囊胚的发育率判定卵母细胞质量的差异,从而确定最佳的采卵时间间隔。结果显示:①穿刺采集所有直径超过3min的卵泡后,可起始1个新卵泡波,大约5d后从属卵泡开始进入凋亡阶段,7d后进入晚期凋亡阶段,第7~10d又起始1个新的卵泡波,第14d时第2个卵泡波中的从属卵泡起始凋亡。②间隔不同时间组克隆囊胚发育率存在差异,间隔3/4d(1周2次)为23.1%,间隔5d组为15.0%,间隔7d组为10.9%,间隔10d组为4.9%,间隔14d组为29.0%。结果显示:间隔不同的时间采卵,卵泡所处的发育状态存在差异。并对卵母细胞质量具有显著的影响。 相似文献
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通过胞质内精子注射法介导转基因已经成为生产转基因动物的一种有效手段。然而传统的ICSI介导法用冻融精子或Triton X-100处理的精子作为携带外源DNA的载体,经胚胎移植后生产转基因后代的效率很低,主要原因为这些处理方式在提高转染效率的同时对精子染色体造成了较大程度的损伤。最近研究者们提出了一种使用高浓度碱液对精子进行简单的预处理,高效地生产转基因后代的方法。这些精子完全失去了质膜与顶体,但仍保留有核的完整性,并且可以高效的将外源基因插入宿主基因组,比传统的精子处理方法获得了更理想的转基因动物的生产效率。 相似文献
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【目的】利用朊蛋白双基因敲除(PRNP-/-)羊制备朊蛋白多克隆抗体,并对其特性进行分析。【方法】构建山羊朊蛋白(PrP)原核表达载体,转入大肠杆菌并诱导表达,纯化获得羊PrP;将获得的PrP免疫PRNP-/-山羊,制备朊蛋白特异性的多克隆抗体;并对获得的朊蛋白多克隆抗体进行ELISA及Western-blot检测。【结果】获得了大量的朊蛋白特异性抗血清,间接ELASA检测抗血清中朊蛋白多克隆抗体的效价为25600;Western-blot检测显示所制备抗体不仅可以识别鼠、牛、羊脑组织内源性朊蛋白,而且能识别鼠脑组织内朊病毒。【结论】PRNP-/-转基因山羊可用于制备大量高亲和力朊蛋白多克隆抗体,获得的抗体可用于多种动物朊蛋白及朊病毒类疾病的检测。 相似文献
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