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绵羊源爱知病毒D型(ovine Aichivirus D)是在国内绵羊中新发现的病毒,本研究根据绵羊源Aichivirus D 3D基因序列设计检测引物,通过反应体系和条件优化,成功建立了检测绵羊源Aichivirus D的TB Green染料法荧光RT-PCR方法,该方法特异性和稳定性良好,灵敏度高。对2020年4月―2021年5月采集自四川6个场253份绵羊粪便样本(健康羊的133份,腹泻羊的120份)进行检测,结果该病毒的平均检出率为8.7%,场阳性率为66.7%。其中,腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(17.5%)显著高于非腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(0.75%,P<0.001)。表明绵羊源Aichivirus D可能是引起以上地区绵羊腹泻的病原。从绵羊源Aichivirus D的阳性样本中成功克隆出大小为1 422 bp的13个完整的绵羊源Aichivirus D 3D基因,其核苷酸相似性为99.4%~100.0%。遗传演化分析发现这13株绵羊源Aichivirus D 3D基因与本实验室前期研究上传的绵羊源Aichivirus D 3D基因共同聚为单独的一个大支。本研究为绵羊源Aichivirus D的分子检测提供了一种新的方法和基础流行病学数据。 相似文献
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本实验的目的是从患有呼吸道疾病的山羊中分离支原体。采集13个病羊鼻腔棉拭子,接种于支原体液体培养基中,37℃、5%CO2培养6d,采用16Sr RNA通用引物检测支原体属PCR方法进行检测,阳性样本转移固体培养基分离鉴定并进行药敏试验。结果显示,从13份液体培养基中检测出5株支原体,经16Sr DNA序列分析证实为精氨酸支原体,遗传进化分析表明,5株精氨酸支原体独立的聚为1支。在固体培养基上分离得到2株支原体,药敏试验结果显示对红霉素、盐酸土霉素、酒石酸泰乐菌素、氧氟沙星、硫酸头孢喹诺、恩诺沙星、林可霉素、硫酸庆大霉素、头孢噻呋、硫酸链霉素10种抗生素敏感,对氟苯尼考耐药。本实验从患呼吸道病的山羊中成功分离出精氨酸支原体,鉴于该菌是人的致病菌,其公共卫生学意义值得进一步关注。 相似文献
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