抗大田软海绵酸单克隆抗体的制备与间接竞争ELISA的建立

用大田软海绵酸(okadaic acid,OA)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物OA-BSA作为免疫原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备OA单克隆抗体,并以纯化的抗体为探针建立了检测OA的快速、灵敏、简便的间接竞争ELISA(ciELISA)。回归方程和相关系数分别为:y=-0.3949x+0.6312,R2=0.9806;线性范围为0.3125~20 ng/mL;对OA的最低检出质量浓度为0.175 ng/mL;批内和批间变异系数分别为2.09%和3.27%;扇贝肉样的添加回收率为74.2%~80.8%;与鳍藻毒素(DTX1)的交叉反应(CR%)为51.82%,与石房蛤毒素(STX)无交叉反应。结果表明,建立了OA间接竞争ELISA检测方法,可用于海产品中OA残留检测。     

建立水产品中己烯雌酚残留ELISA检测方法

本试验利用己烯雌酚(DES)单克隆抗体,通过优化反应条件,加标回收试验,确定ELISA检测方法相关参数,建立了己烯雌酚残留的酶联免疫吸附(ELISA)检测法。试验结果显示,包被抗原最佳浓度为2μg/mL,DES单克隆抗体最佳稀释倍数为1∶3×104;标准曲线呈线性相关,相关系数R2=0.9956,IC50=1.103 ng/mL,最适检测范围为0.125~128 ng/mL,检测敏感度为0.077 ng/g;批内和批间变异分别为6.14%和7.48%;鳝鱼肌肉组织的加标回收率为77.6%~94.6%;特异性试验结果表明,该单抗与己烯雌酚单羧丙基醚交叉反应率为112.7%,与其它水产禁用药物交叉反应率0.1%。     

上海市猪弓形虫流行病学调查

为了解上海市郊猪弓形虫病流行情况,2008~2009年在大中小猪场随机采集882份血清,采用PAPS快速凝集试验、间接血凝凝集试验(indirect hemagglutination assay,IHA)两种方法进行了血清学检测。同时在上海某大型屠宰场收集猪血液和肺门淋巴结,部分血液用IHA进行抗体检测,其余部分抗凝处理用于血液涂片和虫体基因nested PCR检测,对肺门淋巴结进行虫体基因nested PCR检测和接种小鼠弓形虫分离试验。结果显示:大、中型规模猪场的阳性率显著低于小猪场阳性率;两种检测方法阴、阳性符合率高;74.07%的猪场处于10%感染率以下,18.52%的猪场处于10%~20%,7.41%的猪场处于20%~30%;屠宰猪阳性率为7.7%;虫体检测均为阴性。调查表明上海市猪弓形虫病感染率较先前报道有所下降,但对猪弓形虫病的防控仍需要进一步加强。