miR-7081-5p靶向SOX6对羊驼黑色素细胞色素的调控

[目的]miR-7081-5p在白色和棕色羊驼皮肤中呈差异表达,推测miR-7081-5p可能参与色素生成.[方法]运用生物信息学和双荧光素酶报告实验对miR-7081-5p的靶基因进行预测和验证;通过脂质体转染的方法,运用qRT-PCR和Western blotting检测miR-7081-5p过表达对靶基因和黑色素生成相关基因表达水平的影响;使用碱溶法检测miR-7081-5p过表达对黑色素含量的影响;使用分光光度计检测miR-7081-5p过表达对酪氨酸酶活性的影响.[结果]生物信息学预测SOX6是miR-7081-5p靶基因之一,双荧光素酶报告实验证实SOX6是其靶基因之一.qRT-PCR和Western blotting结果显示:在羊驼黑色素细胞中,过表达miR-7081-5p显著降低了SOX6、MITF、TYR、TYRP1和TYRP2的表达,其中mRNA表达水平分别降低了40.51％、63.63％、59.22％、58.84％和63.80％,蛋白质表达水平分别降低了71.69％、65.23％、63.23％、58.52％和62.95％.黑色素含量检测结果显示:过表达miR-7081-5p显著降低了总黑色素、真黑素和褐黑素的相对含量,分别下降了49.03％,62.4％和63.8％.酪氨酸酶活性检测结果显示:过表达miR-7081-5p,黑色素细胞内酪氨酸酶活性显著降低了63.06％.[结论]miR-7081-5p靶向SOX6抑制了羊驼黑色素细胞的色素生成.     

珠颈斑鸠腺胃复管腺显微结构与组织化学研究

为了解珠颈斑鸠腺胃结构及相关细胞的形态特点与分布规律,通过普通光镜技术和3种组织化学的方法阐明了腺胃复管腺的显微组织结构,并对黏液细胞、肥大细胞和嗜银细胞进行了鉴定和统计分析。PAS反应结果显示,腺胃复管腺腺细胞呈PAS阴性,但窦上皮细胞呈PAS阳性,胞质紫红色;甲苯胺蓝染色结果表明,肥大细胞呈卵圆形,呈暗紫红色,多位于腺体之间或腺细胞底部的结缔组织内,血管周围分布较多;Grimelius银染表明,嗜银细胞呈纺锤形或长梭行,被染成棕黑色,多位于腺细胞底部的结缔组织内。     

余干乌骨鸡胃和小肠肥大细胞的分布特点

通过石蜡切片、改良甲苯胺蓝染色的方法对余干乌骨鸡主要胃肠道内的肥大细胞进行鉴定和分布特点分析。结果显示,在余干乌骨鸡的腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和回肠管壁内皆有肥大细胞的分布,尤其是腺胃和肌胃内肥大细胞尤为丰富。肥大细胞主要位于胃肠道管壁内的黏膜固有层和肌层中,有些围绕着血管周围分布。黏膜下层极少有肥大细胞分布。外膜内无肥大细胞,但空肠外膜外附有的结缔组织中,脂肪细胞周围有肥大细胞分布。肥大细胞体积较大,多数呈卵圆形,有的细胞形态不规则,甚至有突起。胞质中含有紫红色颗粒。结果表明,余干乌骨鸡胃肠道管壁内具有丰富的肥大细胞,余干乌骨鸡胃肠道具有较强的抗病原微生物和抗寄生虫功能,肠道免疫屏障较为完善。同时,大量的肥大细胞在胃肠道内的分布可能与黑色素的生成具有相关性。     

牛蛙皮肤显微结构与组织化学研究

运用HE染色和3种组织化学方法—改良甲苯胺蓝、阿利新蓝-PAS和多巴氧化酶法染色对牛蛙皮肤显微结构和特性进行了研究。结果表明,牛蛙皮肤由表皮和真皮组成,表皮由角质层、颗粒层和生发层组成,表皮内无黑色素分布,微血管较少。真皮比表皮厚,分为疏松层和致密层。真皮疏松层内有大量团块状、致密的黑色素,微血管较多。真皮疏松层中分布着黏液腺和颗粒腺,黏液腺多于颗粒腺。牛蛙皮肤肥大细胞主要分布于真皮疏松层和皮下层,且多为长条形。真皮致密层呈阿利新蓝-PAS染色强阳性,表皮与真皮交界处以及真皮疏松层和致密层交界处也有强阳性带。多巴氧化酶法染色结果表明,无黑色素分布的表皮层有许多弥散、细小的阳性棕黑色颗粒状色素,而有大块天然黑色素分布的真皮疏松层阳性颗粒色素较少。结果提示,牛蛙皮肤可通过腺体、肥大细胞和黑色素发挥重要的免疫防御和保护作用。