腹泻仔猪肠道大肠杆菌分离鉴定与毒力基因及耐药性分析

为了解粤西部分地区腹泻仔猪中大肠杆菌流行情况及耐药谱,采用鉴别培养基、革兰氏染色镜检、快速生化特性鉴定、PCR鉴定以及药敏纸片琼脂扩散法等方法,对粤西地区不同养殖场中114份腹泻仔猪直肠拭子样本进行大肠杆菌分离鉴定、毒力基因以及耐药性分析。结果表明,所有样本均分离得到优势大肠杆菌,其生化特性与大肠杆菌标准质控菌株ATCC 25922一致。在毒力基因检测试验中,对所有大肠杆菌分离菌株（共114株）进行9种毒力基因检测,结果显示,毒力基因总检出率为90.35%(103/114)。根据毒力基因PCR鉴定结果确定各毒力基因检出率：STa(71.93%,82/114)、STb(61.40%,70/114)、LT(11.40%,13/114)、K99(7.02%,8/114)、F41(6.14%,7/114)、F18ac(5.26%,6/114)、K88(0.88%,1/114)、Stx2e(3.51%,4/114),而黏附素987P未在分离菌株中检出。药敏试验结果显示,大肠杆菌对磺胺甲基异恶唑、氨苄西林、四环素均高度耐药,耐药率为100%(114/114)、97.37%(111/114)、96....     

猪源金黄色葡萄球菌分离鉴定及16srRNA基因遗传进化分析

从湖南省养猪场采集猪拭子和肺脏300份进行金黄色葡萄球菌(S.aureus)分离.用生化试验和PCR进行鉴定;选择5株分离菌进行遗传进化分析.结果显示,所有分离株触酶试验、糖发酵试验、VP试验、溶血试验和耐热核酸酶试验均为阳性.92.3%的分离株血浆凝固酶试验为阳性.PCR鉴定均为阳性.分离株16s rRNA和nuc部分基因片段与Genbank公开的相关序列相似性分别为98.0%以上和99.0%以上.5株分离株与S.aureus GHA10等处于同一进化分支.S.aureus分离率21.67%.肺脏、拭子、母猪和仔猪分离率分别是21.52%、21.79%、19.71%和23.41%.本研究结果对湖南地区S.aure-us致病性、耐药性和耐药机制的研究提供了素材.     

石榴皮水提物对猪源多重耐药大肠杆菌的抑菌作用研究

【目的】筛选腹泻仔猪中携毒力基因且多重耐药的大肠杆菌菌株,评估中药水提物对该菌株的抑菌活性,并探索中药抑菌机制。【方法】通过PCR方法与Kirby-Bauer(K-B)药敏纸片法评估临床大肠杆菌菌株的肠毒素基因携带情况和耐药性;通过微量肉汤稀释法评估中药水提物对多重耐药大肠杆菌菌株的抑菌活性,确定最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration, MBC);通过电导率仪以及相关试剂盒检测评估石榴皮水提物对多重耐药菌株作用不同时间后菌液电导率、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)含量及菌体内ATP含量的变化;通过SDS-PAGE和蛋白含量检测评估菌体内可溶性蛋白的含量变化;通过扫描电镜观察大肠杆菌形态变化。【结果】PCR检测14株临床大肠杆菌中肠毒素基因携带率达到78.57%,抗生素药敏试验结果显示,所有菌株至少对2种抗生素耐药,均属于多重耐药菌株。中药药敏试验结果显示,黄连、黄芩、石榴皮水提物对多重耐药菌株抑菌活性较好,其中石榴皮水提...