复合吸附剂对AFB_1和DON暴露鸡血清生化指标的影响

本试验旨在通过复合吸附剂(CA)对禽体内黄曲霉毒素B1(AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的吸附作用,根据血清生化指标变化,研究其对霉菌毒素污染的脱毒效果。选取120羽7日龄体质量接近的健康雏鸡,随机分成4组,分别为对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,其中对照组饲喂正常饲料,试验Ⅰ组饲喂霉变饲料,试验Ⅱ组饲喂正常饲料+0.5%CA,试验Ⅲ组饲喂霉变饲料+0.5%CA。试验期为21d。所有鸡只分别在7、28日龄进行称重,试验结束时,经鸡翅静脉采血,测定血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱基磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性;同时,每组选取5只鸡剖检,观察脏器病变,取肝脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊,计算脏器系数。结果显示,与对照组相比,试验Ⅰ组雏鸡肝脏、肾脏、脾脏脏器系数显著升高(P0.05),胸腺和法氏囊脏器系数显著降低(P0.05),血清TP和ALB含量显著下降(P0.05),ALT、ALP、LDH和MDA活性显著升高(P0.05),SOD活性显著降低(P0.05);试验Ⅲ组肝脏、肾脏和脾脏的脏器系数显著降低(P0.05),TP和ALB的含量显著提高(P0.05),ALT、ALP和MDA的活性显著降低(P0.05),SOD活性显著升高(P0.05);试验Ⅱ组的脏器系数及生化指标与对照组相比差异均不显著(P0.05)。结果表明,CA对AFB1和DON有良好的吸附作用,可用于饲料中霉菌毒素的脱毒。     

灰关联熵在长江中游杂交油菜新品种选育中的应用

运用灰关联熵分析方法,对11个2017～2018年度长江中游区国家油菜新品种的农艺性状与单株产量的灰关联熵分析,结果表明,各性状与单株产量的熵关联度为：硫苷0.9793,菌核病发病率0.9808,菌核病发病指数0.9806,株高,0.9863,有效分枝数0.9734,单株有效角数0.9876,角粒数0.9848,千粒重0.9807,单株产量0.9894;熵关联顺序为：单株产量、单株有效角数、株高、角粒数、菌核病发病率、千粒重、菌核病发病指数、硫苷、有效分枝数,为长江中游区杂交油菜品种选育指明方向。     

莲不同药用部位的体外抑菌作用初探

为比较莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)不同药用部位(莲子心、莲房、荷叶)对金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的抑菌作用效果,通过试管二倍稀释法测定各成分金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);绘制光密度-时间曲线,检测药物对细菌生长期的影响,分析莲不同药用部位的抑菌作用效果。结果显示,莲子心提取物、莲房提取物、荷叶提取物对副溶血弧菌的最小抑菌浓度分别为15.625、62.5、500mg/mL;莲房提取物、荷叶提取物对金黄色葡萄球菌的MIC分别为15.625、62.5mg/mL;荷叶提取物对肺炎克雷伯菌的MIC为125mg/mL。莲子心提取物对副溶血弧菌的MBC为其MIC的4倍,莲房和荷叶提取物对3种供试菌的MBC基本上为其MIC的4～8倍。当浓度为1 MIC时,莲子心莲不同药用部位基本上能完全抑制金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的生长。结果表明,莲不同药用部位(莲子心、莲房、荷叶)对金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌有一定的抑菌作用,但作用效果不同。     

基于生物信息学探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒感染特征及银花甘草汤防治机制

【目的】基于生物信息学分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染后的生物标志基因,并对银花甘草汤进行成分鉴定及网络药理学研究,探究银花甘草汤防治PRRSV的作用机制。【方法】通过高通量基因表达(GEO)数据库收集PRRSV感染不同组织或机体的转录组数据,利用GEO2R在线软件筛选差异表达基因,并通过STRING软件构建蛋白互作网络,使用CytoNAC软件筛选核心蛋白,利用GO功能与KEGG通路富集分析确定感染后核心蛋白信号通路及生物学功能变化;选用超高效液相色谱飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分析并鉴定银花甘草汤组成成分,结合SwissTargetPredication数据库进行活性成分筛选及作用靶点预测,进一步通过网络药理学预测银花甘草汤对PRRSV感染的防治机制。【结果】GEO数据库的5组基因芯片共鉴定出4 476个PRRSV感染后的差异表达基因,蛋白互作分析共筛选出164个核心蛋白。PRRSV感染后的主要基因特征变化为非常规核糖体蛋白S27a(RPS27A)、泛素A-52残基核糖体蛋白融合产物1(UBA52)和RPS家族,生物学功能变化为生物合成工艺和核糖体结构等...     

黄檗植物产小檗碱的内生真菌的分离鉴定

[目的]探索黄檗植物产小檗碱的内生真菌的分离与鉴定。[方法]从黄檗中分离内生真菌,采用改良的碘化铋钾试剂及薄层层析法对其代谢产物进行分析,对可能产生小檗碱的菌株进行扩大培养,然后对培养后提取物采用KBr涂片法进行红外光谱检测,并以氘代甲醇为溶剂进行核磁共振氢谱检测,最后进行初步形态学分类。[结果]从黄檗中分离得到13株内生真菌,其中菌株BBH6可能产生小檗碱：通过扩大培养以及红外光谱检测和核磁共振氢谱检测,最终确定内生真菌BBH6能够产小檗碱;该菌株菌丝发达,分生孢子暗色,多细胞,由横纵隔膜分成砖格状,依据真菌形态分类法,该菌株应归属于真菌门的交链孢霉属。[结论]该研究为药用植物内生真菌的研究提供了参考依据和借鉴。     

甘草多糖和甘草酸对NDV感染鸡胚成纤维细胞能力的影响

从甘草中提取甘草多糖和甘草酸,进行抗病毒活性比较。用MTT法比较了它们对鸡胚成纤维细胞(CEF)生长及以三种加药方式(先药后毒、先毒后药、药毒同时)抵抗新城疫病毒(NDV)感染细胞的影响,并用平均病毒抑制率比较甘草多糖和甘草酸的抗病毒活性。结果表明,先药后毒,甘草多糖能显著抑制NDV感染细胞(P0.05),平均病毒抑制率为60.6%;先毒后药,甘草多糖和甘草酸都能显著抑制NDV感染细胞(P0.05),其中甘草多糖的平均病毒抑制率为74.28%,甘草酸为62.3%。通过平均病毒抑制率比较,表明甘草多糖的抗病毒活性优于甘草酸。     

麦冬水提物对猫肾细胞的影响研究

麦冬是我国传统中药之一,兼备保健和治疗作用。为了探究麦冬能否应用在宠物食品中,本试验以不同浓度的麦冬水提物(3.91 ～8000 μg/mL)为受试药物,从细胞的形态、增殖、凋亡及周期4个方面对猫肾细胞(F81)进行安全性评价。结果表明：在试验浓度范围内,麦冬水提物没有抑制F81的增殖,且在3.91～62.5 μg/mL的浓度范围内,凋亡及周期结果经统计学分析均无显著性差异,与对照组接近,且细胞形态良好。说明在一定浓度范围内,麦冬水提物对F81细胞无毒害作用。     

猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用

为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示：该方法特异性好,可鉴别 PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1.00×10¹ copies/μL,PCV3最低检测下限为1.00×10⁰ copies/μL;重复性高,批内、批间的变异系数分别为0.01%～0.02%和0.02%～0.05%;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份,PCV2样品符合率为97.47%,PCV3样品符合率为96.85%;测序结果显示,PCV2均为2d亚型,PCV3均为3c亚型。结果表明,建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确,节约成本,可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。     

茯苓多糖对LPS诱导猫肾细胞炎症的保护作用研究

【目的】研究茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide, PCP)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的猫肾细胞(crandell rees feline kidney, CRFK)炎症反应的保护作用及抗炎机制。【方法】通过MTT法检测不同浓度PCP(5、10、15、25、35、45μg/mL)和LPS(20、40、60、80、100、125、150μg/mL)对CRFK细胞活力的影响;用不同浓度PCP处理LPS诱导的CRFK炎症模型,观察PCP干预后的细胞形态变化,通过硝酸还原酶法和流式细胞术检测CRFK中一氧化氮(NO)释放和细胞凋亡情况;利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测细胞炎症和凋亡相关基因以及蛋白表达水平。【结果】5～25μg/mL PCP对CRFK无毒性,且可逆转LPS刺激后CRFK细胞形态变化。25μg/mL PCP可显著降低LPS刺激后CRFK内NO释放和细胞凋亡率(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,不同浓度PCP能够显著降低LPS诱导CRFK中IL-6、TNF-α、Caspase3...     

五味消毒饮不同极性部位对猪细小病毒体外抑制作用研究

旨在研究五味消毒饮不同极性部位的成分及确定对猪细小病毒(PPV)的抑制作用,初步探讨抗病毒的作用机制。采用水煎醇沉法制备五味消毒饮浸膏,石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酸萃取不同极性部位,高效液相色谱法(HPLC)检测不同极性部位的特征图谱;测定对自由基DPPH、ABTS清除能力,比较不同部位抗氧化能力;CCK-8法和细胞病变效应(CPE)观察不同部位对PPV的抑制作用;荧光定量PCR(RT-qPCR)及Western blot检测五味消毒饮不同极性部位对PPV诱导自噬和凋亡相关蛋白和mRNA表达的影响。结果：五味消毒饮不同极性部位所含活性成分为绿原酸、咖啡酸、木樨草素、山奈酚,以醇提物、氯仿和乙酸乙酯部位抗氧化能力最强,各极性部位对PPV均有抑制作用,醇提物和氯仿提取物主要成分为绿原酸,可降低Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达抑制PPV诱导的凋亡;醇提物和乙酸乙酯部位主要活性成分为绿原酸和咖啡酸,可通过调节P62、Atg5 mRNA和蛋白表达量抑制自噬。研究结果为五味消毒饮的深度开发和猪细小病毒病防控药物的研制提供了依据。