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选择ICR小鼠为受试动物,应用显微注射仪,将线状人β干扰素基因,按2940~10000拷贝,1~3pL的剂量注射到供体受精卵的雄前核,然后移植到假孕受体的输卵管。实验先后注射了301个受精卵,移植到20只假孕受体,其中5只妊娠,产仔25只。从所获得的25只亲代小鼠的尾组织提取DNA,用内切酶BamHI消化,以[α-~(32)P]-dCTP标记的上述外源基因为特异性核酸探针,应用DNA印迹法检测这些小鼠DNA内外源基因的整合状况.结果表明,亲代小鼠中有人β干扰素基因重组子的转基因小鼠,杂交带在6.8kb位置。应用上述同样方法对亲代转基因小鼠的子1代组织DNA检测发现,绝大多数小鼠的标本除见到1条1.8kb人β干扰素基因的较弱杂交带外,还有数条5.0kb以上强弱各异的杂交带,表明这种外源基因不仅整合到了亲代小鼠的遗传物质内,而且可经垂直方式传给子代。人β干扰素基因的鼠体水平表达检测发现,1只子1代转基因小鼠的肿瘤组织浸出液中含有人β干扰素,滴度达160U/mL,表明整合在小鼠DNA内的人β干扰素外源基因不经诱导而有一定表达。 相似文献
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在医学和兽医学领域中,疫苗已成为预防人、畜传染病的重大武器。但是,用疫苗来预防疾病还有许多问题需要解决。一是对某些疾病至今未研究出理想的疫苗;二是人们对目前普遍使用的活疫苗及灭活疫苗的安全性存有怀疑,如有的学者担心,减毒活疫苗总有一天会发生毒力返祖,减毒活疫苗和灭活疫苗内含有的微生物的核酸可能会造成正常体细胞的基因突变而诱发肿瘤等。人们期待着免疫学的新发展,不仅使每种传染病 相似文献
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从隐球酵母科酵母菌提取的酵母蛋白对杂交瘤细胞和骨髓瘤细胞具有促生长、促克隆率和诱生腹水的作用.在单个细胞克隆化不加饲养细胞的情况下,克隆率在50%以上.酵母蛋白对抗李氏杆菌杂交瘤细胞促生长作用为对照组的9.8倍,应用ELISA法测定培养上清抗体反应结果,吸光度值平均增加0.20.在不预先注射液体石蜡的情况下,将杂交瘤细胞或骨髓癌细胞悬于含酵母蛋白的培养液中,直接注入BALB/c小鼠腹腔,无论腹水出现时间还是产量收获均与预先注射液体石蜡常规对照组相似(P>0.05),且腹水效价实验组较常规液体石蜡对照组增加近1倍. 相似文献
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利用小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞系与纯化鸡IgG免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,成功地建立了5株能持续分泌抗鸡IgG单克隆抗体(McAbs)的杂交瘤细胞株。选择产生抗体效价高、生长快的C_(44)株,扩大培养后注射于小鼠制备腹水,经硫酸铵盐析粗提后,用HRP标记,制备出McAbs酶结合物。将制备的McAbs酶结合物和多克隆抗体(PcAbs)酶结合物,采用间接ELISA,对35份鸡血清中鸡新城疫病毒(NDV)抗体以及19份鸡血清中鸡嗜血杆菌(HG)抗体进行检测,McAbs和PcAbs两者的相关系数分别为0.928和0.921,证明制备的抗鸡IgG McAbs具有特异性强、效价高的特点. 相似文献
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