细胞凋亡检测方法研究

细胞凋亡(apoptosis)是由基因控制的、有序的正常死亡现象(Kerr et al,1972),一旦它的调控体系出现紊乱,就会导致肿瘤、自身免疫、神经系统等许多疾病的发生(Hague andParaskeva,2004)。由于细胞的凋亡与胚胎发育、免疫耐受和内环境的稳定等方面有着极为密切的关系,因此,细胞凋     

扎龙自然保护区丹顶鹤3个小群体遗传变异水平的比较

应用6个微卫星分子标记位点评价了扎龙自然保护区包括野生、散养和笼养丹顶鹤3个小群体的遗传变异水平,以及野生与散养小群体间的基因流水平。结果表明,3个丹顶鹤小群体均表现出较高且相近的遗传变异水平,杂合度期望值(HE)为野生0.83300,散养0.80000,圈养0.81000,F-Statistics结果有97.5%以上的遗传多样性存在于群体内。同时还应用两种计算方法计算了野生与散养丹顶鹤小群体间基因流水平:应用稀有等位基因法计算两个小群体间的基因流值为每代1.9个个体;应用FST指数计算方法,并根据基因流值计算公式得出基因流值Nm为1个个体。这个基因流水平和机制能够维持扎龙自然保护区野生与散养丹顶鹤小群体间相近且较高的遗传变异水平。     

马鹿SCAI基因的克隆、生物信息学及组织表达分析

为探究细胞侵袭抑制因子(suppressor of cancer cell invasion, SCAI)基因编码蛋白的生物学特性及基因mRNA在马鹿(Cervus canadensis)鹿茸组织中的表达水平,试验采用PCR方法克隆马鹿SCAI基因编码序列区(CDS区)全长序列,测序后进行核苷酸序列同源性比对并构建系统进化树;通过生物信息学方法分析SCAI蛋白的组成、结构和理化性质等;利用实时荧光定量PCR方法检测SCAI基因mRNA在鹿茸组织中的表达水平。结果表明：马鹿SCAI基因CDS全长1 821 bp,与白尾鹿亲缘关系较近;与鸡亲缘关系较远。SCAI基因编码606个氨基酸,相对分子质量为70 337.48。理论等电点为8.85,平均亲水性为-0.433,为亲水性蛋白。SCAI蛋白中存在57个潜在磷酸化位点,不存在信号肽,亚细胞主要定位于细胞核中,不属于分泌蛋白。SCAI蛋白的二级结构中α-螺旋和无规则卷曲占比最大,为不稳定蛋白。马鹿SCAI基因在茸皮层中的相对表达量最高,其次为软骨层,在间充质和前软骨层中相对表达量最低。说明SCAI基因参与了马鹿鹿茸的生长发育。     

从动物毛中提取DNA研究初探

利用蛋白酶Ｋ分解毛发蛋白，并使用酚和氧仿除去蛋白质杂质方法提取毛中ＤＮＡ。结果测量获得的数据和曲线表明：动物脱落毛发以及从保存多年标本获得的毛发均可用来提取到具有一定纯度和数量的ＤＮＡ，完全可以满足聚合酶链式反应（ＰＣＲ）所需。     

RESEARCH ON LACTIC DEHYDROGENASES (LDH) ISOENZYMES OF FOUR SPECIES IN GALLIFORMES

Accordilgtothemoleculargenehcs,thekeyOfbiodiversitywassequenceofal1tinoacidsinPrOtelnwhosegenehclnformahonwerestoredinDNA.Inl958,CrickPOsedthefamouscentraldogmaandthesequencehy-POthesisandalsofOrcastedaPpearaceofthe.lll.Proteintaxonomy.InthefOllowing3Oyears,lotsofProteinswerepuredandsequenced.Thecomparisonofhomologenousproteinse-quencesfromvanousorganismsshowedthattheclosertwOsPecieswere,themoresimilarsequencesofawhnoacidswere,oronthecon-trary.ResearchesbasedonfossilsbycomparingsubshtU…     

限制性内切酶在PCR缓冲液中酶切活性的研究(英文)

选取6 种常用的限制性内切酶(Acc I、Ban II、EcoR I、Hind III、Sac I、Sca I)用于检测其直接在PCR 缓冲液中完全酶切DNA 的活性。结果表明:在PCR 缓冲液中,需要加入MgCl2作为激活因子的前提条件下,除了EcoR I 表现出星状活性外,其他酶均能完全酶切无甲基化λDNA,其结果与在酶生产厂商推荐的反应缓冲液中进行的酶切反应结果一致;在完成PCR 扩增的PCR 缓冲液中,所有酶(包括RcoR I)均能功能正常地对PCR 产物完全酶切,表明可在PCR 扩增完毕后的反应体系中直接加入限制性内切酶进行酶切反应,无需对PCR 产物进行预先纯化;镁离子浓度在2.5 mmol·L-1至10 mmol·L-1范围内对PCR 缓冲液中的限制性内切酶的活性无显著影响。上述方法可用于限制性片段长度多态(RFLP)以及单链构像多态(SSCP)研究中,但能否用于分子克隆有待进一步实验。图3 表1 参7。     

西洋杜鹃保护地扦插繁殖技术

西洋杜鹃最早在西欧的荷兰、比利时育成，故称西洋杜鹃，简称西鹃。其株形矮小、生长缓慢，花大种类繁多，忌曝晒，畏严寒，喜凉爽，一年中可以多次开花，具有很高的观赏价值，笔者就近年来西鹃扦插繁殖过程中的技术要求归纳如下。     

规模化畜禽养殖对生态环境的破坏与防治

正畜禽养殖一直以来都是我国农民增加收入的一种重要方式,近些年来,我国科技水平在不断提升,科技的发展,为畜禽养殖注入了新的生机和活力,在养殖畜禽的过程中,居民的收入大幅度提高。但是,畜禽养殖所引发的环境污染及破坏问题也极为严重,尤其是在发展了规模化畜禽养殖之后,由于养殖数量增大,环境问题也愈加突出。如何在发展畜禽养殖的时候,解决好环境问题是当前许多人关注的一个重点,本文重点介绍畜禽养殖对生态环境的破坏和防治。     

东北马鹿鹿茸软骨组织cDNA文库构建及IGF2基因克隆与结构分析

 【目的】从功能基因组学角度深入研究鹿茸软骨组织生长发育机理,探讨胰岛素样生长因子-II（IGF2）在鹿茸软骨组织生长发育过程中的作用。【方法】利用SMART技术构建了东北马鹿鹿茸软骨组织全长cDNA文库,并设计IGF2基因保守引物对该文库进行筛选。【结果】构建的未扩增文库滴度为1.8×106 pfu•ml-1,文库重组率大于89.8%;插入片段平均长度约为1.2 kb;扩增文库滴度为1.4×1010 pfu•ml-1;克隆东北马鹿IGF2基因（GenBank登录号：EF177491）CDS区为540 bp,编码179 aa长度的多肽,与GenBank中检索得到的猪、马、牛、羊、人、小鼠和大鼠IGF2基因进行比对分析显示,马鹿IGF2多肽无色氨酸（Trp）,组氨酸（His）与苏氨酸（Thr）含量在8个物种中最高;重建系统树结果显示,东北马鹿IGF2与牛和羊IGF2基因具有最高的相似性。【结论】成功构建东北马鹿鹿茸软骨组织cDNA文库并克隆到IGF2基因。