羊毛角蛋白的分离与纯化

选择白色羊毛为材料,采用还原C法在不同温度下抽提粗蛋白,离子交换层析,SDS-PAGE分析和考马斯亮蓝法测定蛋白含量。结果表明,采用还原C法在72℃抽提3h,经DEAE-纤维素32柱层析,0.3mol/LNaCl洗脱,获得电泳纯的角蛋白组分,其相对分子质量约31ku,蛋白回收率为3.8%。光谱分析表明,该角蛋白组分最大紫外吸收峰约在280nm处,其荧光光谱峰约在346nm处,角蛋白可与Tb3 结合形成配合物,494和549nm处呈现Tb3 特征荧光峰,随着Tb3 浓度的增大,Tb3 敏化荧光逐渐增强并达到饱和。试验为进一步深入研究角蛋白性质和拓宽角蛋白的应用范围奠定了基础。