非洲猪瘟病毒pS273R蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

本研究旨在表达非洲猪瘟病毒（ASFV） pS273R蛋白,并制备其多克隆抗体,为ASFV pS273R的功能研究提供材料。试验通过大肠杆菌表达系统表达重组pS273R蛋白,采用镍亲和层析柱和分子筛纯化重组pS273R蛋白并免疫BALB/c小鼠制备血清,经Protein G琼脂糖树脂纯化鼠抗pS273R蛋白多克隆抗体,通过Western blotting、间接免疫荧光（IFA）和免疫沉淀试验（IP）分析多克隆抗体的反应原性和特异性。结果显示,在16 ℃、1 mmol/L IPTG诱导条件下,pS273R蛋白以可溶形式高效表达,经纯化并免疫小鼠后,通过Protein G可以纯化出高质量的鼠抗pS273R的多克隆抗体。以制备的多克隆抗体为一抗,通过Western blotting、IFA和IP检测到HEK293T细胞中瞬时表达的Flag-pS273R蛋白和ASFV感染肺泡巨噬细胞（PAMs）中的pS273R蛋白。本研究在大肠杆菌中实现了ASFV pS273R蛋白的高效表达,制备并纯化的抗pS273R多克隆抗体具有较高的反应性和特异性,这为深入探讨ASFV pS273R蛋白的生物学功能奠定了基础。     

青藏高原高寒草地沙化特征的研究进展

青藏高原占中国草地面积38%,是我国重要的生态屏障。由于过牧、气候干旱等原因,青藏高原高寒草地沙化状况日趋严重。随着草地沙化程度的加剧,土壤机械组成粗化、容重及固相率不断增高、孔隙度相比正常土壤明显降低、土壤含水量及储水量大幅度降低。同时,土壤有机质降低比率高达70.85%～97.24%,土壤剖面pH均呈现中性至微碱性反应;土壤pH都有不同程度的增加,且呈现出上部较低、下部偏高的趋势;土壤养分N、P、K都呈下降趋势。另外,随着草地沙化程度加剧,草群自然高度、盖度、丰富度、多样性指数、均匀性均明显降低;禾本科、莎草科等优势植物被杂类草、毒草所取代;草地植物表现出对寒冷胁迫、干旱胁迫、强辐射UV-B、盐化、草地病害、放牧强度的生态适应性。沙化草地的土壤退化和植被退化相互作用,并具有负反馈效应。通过草地的沙化特征及沙化机理的论述,可为当地生态治理及基础研究提供相应的参考依据。     

不同浓度PEG溶液对高寒退化草地土壤种子库种子萌发试验研究

为了研究不同浓度PEG溶液对西藏那曲地区不同退化草甸草地土壤种子库种子萌发的影响,采用0、-0．2、-0．4、-0．6、-0．8、-1．0、-1．2、-1．4、-1．6、-1．8Mpa的PEG溶液浸泡不同退化草甸草地土壤种子库种子后进行萌发试验,记录发芽数。结果显示．采用空白处理以及不同浓度的PEG溶液处理不同退化草地土壤种子库种子时,空白处理种子发芽率最高,且随着PEG浓度的增大,种子的发芽率逐渐降低。另外,土壤种子库中的植物种子因年份和草地退化程度的不同而有所变化。     

非洲猪瘟病毒pK145R蛋白的原核表达及抗血清的制备

为制备兔抗ASFV pK145R蛋白的多克隆抗体,本研究以中国首次分离的ASFV HLJ/18毒株K145R基因的真核表达质粒p CAGGS-Flag-K145R为模板扩增K145R基因,构建重组原核表达质粒p ET-21a-K145R,利用镍亲和层析预装柱纯化p K145R蛋白并免疫新西兰大白兔,制备兔抗ASFV pK145R蛋白多克隆抗体,并通过免疫印迹（WB）、间接免疫荧光（IFA）及免疫沉淀（IP）试验对该抗体进行验证。结果显示：本研究成功构建了原核表达质粒p ET-21a-K145R,将该质粒转化细菌BL21(DE3)获得能够可溶性表达p K145R蛋白的重组菌,分子量约为16.0 kDa;利用高度纯化的ASFV pK145R蛋白,制备了兔抗ASFV pK145R蛋白的多克隆抗体,该抗体能够特异性地识别HEK293T细胞中瞬时表达的Flag-K145R蛋白和ASFV感染猪肺泡巨噬细胞中表达的ASFV K145R蛋白。本实验为深入研究p K145R蛋白的功能及其在ASFV感染致病性中的作用奠定了基础。