油菜PEPase基因的克隆及其对应RNAi载体的构建

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPase)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶.采用RT-PCR方法从甘蓝型油菜中双4号中扩增出PEPase基因cDNA片段,与已发表的PEPase基因(登录号为D13987)序列同源性为98%.根据RNA 干扰(RNAi)目标序列的选取原则选取两段长度约为400bp的DNA序列,分别克隆到RNAi载体pHBM1301中,构建了油菜中对应于PEPase基因的RNAi载体pHBM1301-PEP1和pHBM1301-PEP2.     

湖北省花生平衡施肥技术研究 Ⅳ.农户花生施肥状况

对2007～2008年湖北省农户花生施肥状况进行了调查。结果表明,湖北省农户花生平均产量为2 968.1 kg/hm2,平均氮、磷、钾肥用量分别为114.7、60.7和25.2 kg/hm2。肥料类型主要有复合(混)肥、碳酸氢铵、过磷酸钙、尿素和农家肥等,以一次性基施为主,一次基肥加一次追肥次之。氮肥58.78%用于基肥,10.81%用于追肥,30.41%既作基肥也作追肥,磷、钾肥主要作基肥。分析认为湖北省农户花生氮肥用量偏高、磷肥用量较适宜,钾肥用量明显不足,有机肥料施用少,肥料类型、施用方式有待调整。建议根据花生的营养特性、目标产量、区域土壤养分特征等施肥,同时考虑养分周年统筹,轻简增施有机肥。     

湖北省花生平衡施肥技术研究I.土壤主要养分限制因子

采用土壤养分状况系统研究法分析了湖北省花生主产区的土壤主要养分含量,并在田间试验下进行了验证.结果表明,湖北省花生主产区土壤普遍缺氯,部分地区缺磷,大面积缺钾和硼.平衡施肥能够明显提高花生产量,但不同地区花生对各元素的敏感程度有所不同,应该在测土基础上合理施肥.     

油菜内生生防菌BY-2在油菜体内的定殖与对油菜菌核病的防治作用

 从油菜植株体内分离出的内生细菌BY-2,经过生物学鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。用BY-2回接油菜,重新分离到具有BY-2相同形态特征和抑制病原真菌能力的内生菌株。油菜接种后的第10 d,体内的BY-2菌数达(2.24~9.02)×10³ cfu/g鲜植株,25 d仍然保持在(3.13~8.59)×10³ cfu/g鲜植株。BY-2与油菜核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.) de Bary]对峙培养可以形成直径为3.1 cm的抑菌圈;可使油菜核盘菌菌丝细胞浓缩变短,细胞壁破裂,原生质外溢,从而抑制真菌生长发育;同时还能抑制菌核的萌发,抑制率达60%~70%;在油菜离体叶片试验中,BY-2对菌核病的防治效果达100%。     

不同氮效率油菜苗期碳氮代谢差异

为探究氮高效的机制,研究油菜苗期碳氮代谢规律,以两个氮效率差异显著的油菜种质（氮高效种质A294和氮低效种质A364）为材料,通过设置正常（CK, 9.5 mmol/L）和低氮（LN, 0.475 mmol/L）两个处理,比较不同氮效率油菜在根系形态、氮吸收转运同化、光合碳代谢生理指标以及碳氮代谢相关基因表达等方面的差异。结果表明,氮高效的A294在低氮胁迫下根系发达,植株生物量和氮累积量显著高于A364,前者根系吸收及向地上部转运氮的能力较强,而氮同化关键酶硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性在两个种质间无显著差异;同时,A294叶片SPAD值、光合色素含量、净光合速率及磷酸蔗糖合酶基因BnaSPS的表达均更高。进一步分析发现,低氮胁迫下A294根系中硝酸盐转运蛋白基因BnaNPF7.3的表达显著高于A364,而BnaNPF7.2b在A364根系的表达则显著高于A294;此外,A364可溶性糖含量的根叶比及根系中蔗糖合酶基因BnaSUS表达高于A294,说明低氮胁迫下氮高效油菜A294可以将更多的营养元素（氮）分配至地上部,使叶片保持较高的光合速率,为生物体构建提供保障;而氮低效油菜种质A364则倾向于将有限的营养元素（氮）分配在根系并维持其生长发育,同时其根系可溶性糖消耗占比高于A294,导致其根冠比高于A294。由此认为,油菜在响应外界氮缺乏胁迫时,氮素与能量物质（可溶性糖）的分配与消耗差异会影响叶片碳代谢（光合作用、蔗糖合成）速率,最终导致油菜苗期氮效率的差异。     

永州绿化草坪杂草种类及其化学防除研究

1998-2000年的调查与试验结果表明：永州市林业局机关大院内绿化草坪共有杂草17科34余种，分布较普遍的有马唐草、蟋蟀草、狗尾草、香附子、地锦、空心莲子草等，其中以香附子、马唐草、蟋蟀草、空心莲子草危害较为严重。用水花生净9.0g/10m^2 2.4-D1.0g/10m^2防除空心莲子草效果好，且对草坪草很安全；用莠去津 草甘磷原液点蔸防除莎草效果好，但易造成局部枯死，因此对于落草量少、分布范围又广又散的，为了减少成本，是一种很好的办法。     

一株大豆根系来源的不同类型土著B.japonicum菌株的共生特性

本文对未接种的大豆单株根系来源的不同类型Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ菌株共生效率进行了评价。结果表明，供试１２个菌株与６个大豆品种都形成有效共生，但不同菌株，品种和菌株－品种组合间均存在极显著差异，表现共生亲和多样性。菌株结瘤竞争力越强，其共生固氮效率越高。     

果胶细菌诱导油菜结瘤与固氮研究

果胶细菌处理油菜幼根（2天苗龄、根长3cm），同时接种紫云英根瘤菌突变菌株（Rhizobiumhuakuii），诱发类根瘤的结瘤率为96.80％。从这些类根瘤中分离的菌株能回接到原寄主。类根瘤的电镜观察可以明显地见到细胞内充满了细菌。乙炔还原法测定的固氨酶活性（C2H4）为76.80nmol／（planth）。     

类黄酮促进根瘤菌侵染油菜根系的研究

本文报道在类黄酮的作用下，田菁固氮根瘤菌Ａｚｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓ ＯＲＳ５７１侵染油菜根系的研究结果，侵染部位为侧根缝隙类黄酮能有效地提高侵染率。显微镜发现，细菌能在细菌间隙移动并存在于根内外皮细胞间隙，通过乙炔还原法测定到低的固氮酶活性。从油菜根系分离出的细菌回接到原寄主上能形成有效根瘤。     

湖北省花生平衡施肥技术研究Ⅵ.花生氮肥用量

在田间条件下研究了不同氮肥用量对花生产量和固氮的影响。结果表明,在红安低氮土壤上,施氮使花生产量和氮积累量显著增加,但固氮比例快速降低;在蔡甸高氮土壤上,施氮对花生产量和氮积累量影响不明显,固氮比例变化不大。建议生产上应根据土壤条件确定施氮策略,即低氮土壤上优先考虑增加花生产量来施氮,在高氮土壤上优先考虑发挥花生固氮能力来施氮。