鹅圆环病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立鹅圆环病毒(GoCV)抗体的检测方法,本研究通过原核表达重组核衣壳(Cap)蛋白,将纯化的该重组蛋白作为ELISA检测的包被抗原,利用交叉反应性,以羊抗鸡IgG(HRP-IgG)作为二抗,经反应条件的优化,建立了检测鹅血清GoCV抗体的间接ELISA方法。确立的ELISA反应最适条件为:抗原包被浓度为2.05μg/mL,待检血清稀释度为1∶50,HRP-IgG稀释度为1∶2000,待测血清和二抗均于37℃反应1.5h,底物于室温显色10 min。经38份阴性血清检测确定阴阳性临界值为0.25。特异性试验结果显示,该方法与大肠杆菌、新城疫、禽流感H5和H9、小鹅瘟、鹅副粘病毒抗原阳性血清均无交叉反应;重复性试验结果显示,其批内和批间变异系数均小于10%。应用该方法检测了从4群GoCV PCR检测阳性种鹅群采集的血清,结果显示其血清阳性率在60.0%～90.9%。本实验建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和重复性,为进一步开展GoCV流行病学调查提供了一种便捷可靠的手段。     

超抗原——在养殖业中应被重视的致病因子

超抗原是指浓度低于一般抗原(conventional antigens)即能刺激带有特殊TcR-Vβ(或TcR-Vγ)的T细胞大量增生,并从而改变机体免疫系统自身稳定性的一类蛋白质抗原分子.它主要是一些细菌的外毒素或逆转录病毒的基因产物.超抗原的概念在1989年由White提出以后,其强大的T细胞激活作用,在人医学界和免疫学界引起了巨大的反响,并迅速成为了20世纪90年代世界性研究的前沿课题之一.介绍如下.