猪细小病毒L株毒种最高代次范围及其依据

将猪细小病毒L株原始种毒E0代,在ST传代细胞上连续传代至E12代,检测E1～E12代病毒液的病毒含量和红细胞凝集价,并取E1、E3、E5、E7、E9和E12代病毒液进行了毒力、免疫原性、特异性和纯净性检验,来确定该病毒的遗传稳定性。试验结果表明,E1～E12代病毒液,病毒含量为10^7.36～10^7.60TCID₅₀/mL、红细胞凝集价在1512～11 024;E1、E3、E5、E7、E9和E12代病毒液,毒力稳定、免疫原性良好、特异、纯净。为进一步确保L株作为生产用毒种的遗传稳定性,将其作为生产用毒种的基础代次限定为E1～E5代,生产代次限定为E6～E8代,生产毒种最高使用代次不超过3代。     

一株H1N1病毒的分离鉴定

研究样本来自黑龙江省绥化市的一个生猪养殖场,分别采集疑似发生猪流感的病猪鼻拭子样本和濒死猪的肺组织样本,处理后接种到10日龄的SPF鸡胚中,分离出一株具有血凝性的病毒。采用血清学、RT-PCR、电镜、生物学特性及理化特性测定等方法对病毒进行鉴定,结果显示分离株的鸡红细胞的凝集价为1:256,只能够中和H1亚型猪流感特异性阳性血清;RT-PCR结果为H1、N1亚型,电镜下的病毒粒子为球形,直径约80 nm,具有囊膜,同时表面有刺突和纤突,对鸡胚的半数感染量(EI D_(50))为10(-5.17)/0.1 mL;该病毒对热、胰蛋白酶、氯仿及乙醚均敏感;从以上病毒特性的研究,可以判定分离得到的病毒为H1N1亚型的猪流感病毒。