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1.
基于克隆得到的黄淮山羊骨形态发生蛋白(BMP4)全长cDNA序列,推导氨基酸序列,运用生物信息学方法从蛋白质理化性质、信号肽、结构域、Motif、二级和三级结构预测等方面对BMP4结构和功能进行分析。结果表明,BMP4具有信号肽、TGFβ超家族7个保守半胱氨酸结构特征和潜在的糖基化等位点,无跨膜区,成熟肽与模板2h62A有91.176%的氨基酸序列一致。因此,山羊BMP4具有BMPs家族的典型结构特征,这些结构特征构成了该蛋白在山羊软骨和骨组织形成、原始卵泡发育及早期胚胎发育中发挥作用的基础。 相似文献
2.
根据GenBank公布的人和牛BMP4基因序列设计引物,通过RT-PCR和PCR方法分别扩增全长编码序列和内含子2、3,进行克隆及测序鉴定;根据已得到的序列设计引物扩增BMP4成熟蛋白cDNA,克隆入pET32a表达载体,转化E.coliBL21(DE3)plysS进行诱导表达,同时进行诱导条件的优化。结果显示,山羊BMP4基因全编码序列、内含子2和3序列长度分别为1 230、1 053、962 bp,与猪、人、小鼠和牛相应序列的同源性分别为:96.10%、94.96%、91.79%、99.19%,83.80%、76.03%、66.94%、96.71%和87.15%、80.24%、67.20%、98.13%。在E.coliBL21(DE3)plsS中表达的BMP4融合蛋白的相对分子量为31 000,适宜的诱导条件为:0.5 mmol/L IPTG、22℃、诱导8 h.结果表明,黄淮山羊BMP4基因全长编码序列和内含子2、3已被成功克隆。适宜表达条件的确定为进一步研究山羊BMP4的生物学功能奠定了基础。 相似文献
3.
猪骨形态发生蛋白4成熟肽cDNA的克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:克隆猪骨形态发生蛋白4(BMP-4)成熟肽基因。方法:提取猪肾的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出目的基因,并将其回收后与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,进行阳性克隆的筛选与鉴定。结果:琼脂糖凝胶电泳检测RT-PCR产物,显示结果与预期片段大小一致,质粒PCR检测、酶切鉴定证实重组克隆中插入了PCR产物,测序结果揭示BMP-4成熟肽cDNA长为351bp,编码116个氨基酸。序列对比表明,猪与人、小鼠、牛、绵羊BMP-4成熟肽cDNA序列的同源性分别为94.87%、90.60%、94.87%、94.59%,而相应的氨基酸同源性分别为99.12 %,99.12 %,100 %、100%。 结论:首次成功地克隆了猪BMP-4成熟肽编码基因,对于进一步研究猪BMP-4全基因结构、功能及其与繁殖性能的关系有重要的意义。 相似文献
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本试验通过对长×大(L×Y)、杜×长大(D×LY)、皮杜×长大(PD×LY)3个杂交组合猪的生长肥育、胴体品质及肉质性状进行研究,结果表明:PD×LY杂交组合的日增重、料肉比及屠宰率最优,日增重、屠宰率与L×Y组间差异显著(P<0.05);PD×LY的眼肌面积、后腿比例分别为48.09 cm2、34.23%,为3组合中最高,与L×Y组的差异显著(P<0.05),与D×LY组的差异不显著(P>0.05); D×LY组的肉色评分、嫩度测定结果最佳,组间差异显著(P<0.05);PD×LY组的失水率、熟肉率、嫩度最差,其中熟肉率、嫩度与其它组间差异显著(P<0.05)。综合评定:导入皮特兰猪的血液在提高了日增重、屠宰率、眼肌面积、后腿比例等性状的同时,却导致了肉质的下降; D×LY作为一个经典的杂交组合,生产性能总体稳定。 相似文献
5.
为获得牛生长激素(BST)蛋白,构建了工程菌并进行了诱导表达.先设计2对引物,从pUCm-T-BST克隆中扩增出BST成熟蛋白编码序列,双酶切后分别插入表达载体(pET30 a和pET29 a),转化E.coliDH5α并进行阳性克隆鉴定;再将重组质粒分别转化到E.coliBL21(DE3)和RosettaTM(DE3)pLysS中,构建BST原核工程菌;最后进行诱导表达.结果表明,重组表达载体pET30 a-BST和pET29 a-BST中均插入了正确的目的基因;经IPTG诱导后,以BL21(DE3)为宿主的工程菌无目的蛋白表达,而pET30 a-BST/RosettaTM和pET29 a-BST/RosettaTM分别可见分子量约29.5,26.5 kD的融合蛋白表达,约占菌体蛋白的26%,35%.说明稀有密码子限制BST基因在E.coli中的表达,选择适宜的宿主菌可克服此障碍. 相似文献
6.
动物繁殖学是动物科学、动物营养、动物医学等高牧兽医类专业的必修专业课程,同时也是一门实验性较强的应用学科。如何在动物繁殖学实验教学中更广泛、更科学地运用现代信息技术,合理利用实验动物以达到最佳的教学效果,成为提高教学效果的核心内容。因此,对该课程实验教学的规律和方法进行了初步探讨。 相似文献
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探明b型流感嗜血杆菌荚膜多糖发酵的最适培养基及接种量,为降低其疫苗荚膜多糖制备成本提供理论依据,设计6种培养基进行摇瓶培养,检测发酵上清液中的菌体量,筛选最适培养基,并在此基础上优化接种浓度及氯化血红素、辅酶I添加量进行发酵罐培养,测定荚膜多糖含量,评估培养效果。结果表明:接种后OD600值为0.1的接种量较为适宜b型流感嗜血杆菌生长;3号改良培养基(选择性大豆蛋胨、酵母浸粉、酸水解酪蛋白、K2HPO4、氯化钠、葡萄糖、氯化血红素、辅酶I分别为1%、1%、0.50%、0.25%、0.50%、0.70%、25mg/L和20mg/L)对b型流感嗜血杆菌液体进行发酵罐发酵可获得大量菌体且稳定,荚膜多糖含量为(105.6±13.2)mg/L。 相似文献
8.
克隆猪骨形态发生蛋白4(BMP-4)成熟肽基因。通过提取猪肾的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出目的基因,并将其回收后与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,进行阳性克隆的筛选与鉴定。琼脂糖凝胶电泳检测RT-PCR产物,显示结果与预期片段大小一致,质粒PCR检测、酶切鉴定证实重组克隆中插入了PCR产物,测序结果揭示BMP-4成熟肽cDNA长为351bp,编码116个氨基酸。序列对比表明,猪与人、小鼠、牛、绵羊BMP-4成熟肽cDNA序列的同源性分别为94.87%、90.60%、94.87%、94.59%,而相应的氨基酸同源性分别为99.12%,99.12%,100%、100%。首次成功地克隆了猪BMP-4成熟肽编码基因,对于进一步研究猪BMP-4全基因结构、功能及其与繁殖性能的关系有重要的意义。 相似文献
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通过形态学特征及28S rRNA序列比对对1株产红色素怀地黄内生真菌进行了菌种鉴定,并利用分光光度法测定吸光度值对其红色素稳定性及抗菌活性进行了研究。结果表明,该菌与蘑菇轮枝菌(Verticillium psalliotae)的28S rRNA序列同源性达到99%,所产色素在495 nm处有最大吸收峰,该色素对光相对比较稳定,pH 2~8,温度0~100℃条件下可以长时间保存。H_2O_2,Na_2SO_3对此色素有明显减色效果,金属离子对此色素有不同程度的影响,Cu~(2+),Fe~(3+)离子能够使色素溶液产生明显的颜色变化,Fe~(3+)离子能够使色素溶液产生沉淀,色素水溶液对大肠杆菌的抑制效果与硫酸链霉素的抑制效果相当。 相似文献
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动物繁殖学是动物科学、动物营养、动物医学等高牧兽医类专业的必修专业课程,同时也是一门实验性较强的应用学科.如何在动物繁殖学实验教学中更广泛、更科学地运用现代信息技术,合理利用实验动物以达到最佳的教学效果,成为提高教学效果的核心内容.因此,对该课程实验教学的规律和方法进行了初步探讨. 相似文献